【技术实现步骤摘要】
ID NO：3或SEQ ID NO：4所示，以及含有所述编码基因的表达盒，表达载体及重组细胞。
[0010]本专利技术进一步提供上述的果糖-二磷酸酶突变体或其编码基因在碳水化合物合成中的应用。
[0011]在一个实施方式中，以二羟基丙酮为原料，经过羟基丙酮激酶、磷酸丙糖异构酶、果糖-二磷酸醛缩酶以及本专利技术所述的果糖-二磷酸酶突变体的催化反应，转化成F6P；优选地，其反应体系是Hepes缓冲液100mM，NaCl 100mM，Mg
2+
5mM，Zn
2+
10μM，DAK 0.77mg/mL，TPI 0.33mg/mL，FBA 0.15mg/mL，EDTA 0.1mM，ADP 1mM，多聚磷酸0.4mM(每小时补加0.2mM)，PPK 0.44mg/mL(多聚磷酸激酶，用于ATP再生)，化合物DHA 25mM，以及本专利技术果糖-二磷酸酶突变体0.3mg/mL。
[0012]或者以二羟基丙酮为原料，经过羟基丙酮激酶、磷酸丙糖异构酶、果糖-二磷酸醛缩酶、葡糖磷酸异构酶、磷酸己糖磷酸变位酶、葡萄糖-1-磷酸腺苷...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种果糖-二磷酸酶突变体，其特征在于，其相对于如SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的野生型果糖-二磷酸酶而言，其第104位赖氨酸突变为谷氨酰胺，且第132位精氨酸突变为异亮氨酸。2.如权利要求1所述的果糖-二磷酸酶突变体，其特征在于，进一步的，其第210位酪氨酸突变为苯丙氨酸，以及第218位赖氨酸突变为谷氨酰胺。3.如权利要求1至2任一项所述的果糖-二磷酸酶突变体的编码基因。4.如权利要求3所述的果糖-二磷酸酶突变体的编码基因，其特征在于，其核苷酸酸序列如SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示。5.含有如权利要求3或5所述基因的表达盒，表达载体及重组细胞。6.权利要求1至2任一项所述的果糖-二磷酸酶突变体或其编码基因在碳水化合物合成中的应用。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，以二羟基丙酮为原料，经过羟基丙酮激酶、磷酸丙糖异构酶、果糖-二磷酸醛缩酶以及如权利要求1至2任一项所述的果糖-二磷酸酶突变体的催化反应，转化成F6P。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，其反应体系是Hepes缓冲液100mM，NaCl 100mM，Mg
2+ 5mM，Zn
2+ 10μM，DAK 0.77mg/mL，TPI 0.33mg/mL，FBA 0.15mg/m...
【专利技术属性】
技术研发人员：马延和，蔡韬，乔婧，吕娟博，王钦宏，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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