rhFGF21融合蛋白、编码其的多核苷酸、包含其组合物及其用途制造技术

本申请公开了一种重组人成纤维细胞生长因子21(rhFGF21)融合蛋白、编码其的多核苷酸、重组表达载体、重组细胞、包含其的药物组合物和试剂盒、其用途及产生其的方法。本申请通过基因工程方法高效可溶性地表达得到rhFGF21-(VPGXG)

【技术实现步骤摘要】
rhFGF21融合蛋白、编码其的多核苷酸、包含其组合物及其用途


[0001]本申请属于生物医药领域，具体而言，涉及一种包含融合在一起的重组人成纤维细胞生长因子21蛋白(rhFGF21)与类弹性蛋白(VPGXG)
n
的融合蛋白、编码其的多核苷酸、重组表达载体和重组细胞、包含其的组合物、试剂盒及其用途和产生该融合蛋白的方法。

技术介绍

[0002]成纤维细胞生长因子21(FGF21)是主要由肝脏产生的新陈代谢调控因子，其在肥胖症和2型糖尿病动物模型中发挥有效的降糖和降脂作用。FGF21代谢作用的主要位点是脂肪组织、肝脏和胰腺。实验研究已显示，在对糖尿病小鼠和灵长类施用FGF21后，糖尿病代偿和血脂异常有改善。
[0003]但是，FGF21在体内循环半衰期非常短，进而达不到理想的药效。用聚乙二醇(PEG)修饰FGF21能有效改善其药代动力学，改善药物分布，提高其疗效。然而，目前的PEG化FGF21存在如反应产率低、结合位点和偶联化学计量难以控制等弊端，在生产中增加了成本。因此，开发反应条件温和、步骤简单、快速、高效的位点特异本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组人成纤维细胞生长因子21融合蛋白，其中，所述融合蛋白包括融合在一起的rhFGF21和(VPGXG)
n
，所述rhFGF21包含以SEQ ID NO:1示出的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1具有至少80％一致性的氨基酸序列；X为A和/或V；n为选自20-80中的整数。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中，X为A和V，且A与V比例为(1-3):(1-3)、优选2:3；优选地，n为40-60中的整数、优选40；优选地，所述融合蛋白由融合在一起的rhFGF21和(VPGXG)
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以及任选的接头组成；更优选地，所述接头的氨基酸序列为RS和/或GS；优选地，所述融合蛋白具有以SEQ ID NO:2示出的氨基酸序列或与SEQ ID NO:2具有至少80％一致性的氨基酸序列。3.一种编码权利要求1或2所述的融合蛋白的多核苷酸；优选地，编码所述融合蛋白中的rhFGF21的多核苷酸部分包含以SEQ ID NO:3示出的核苷酸序列或与SEQ ID NO:3具有至少80％一致性的核苷酸序列；优选地，编码所述融合蛋白中的接头的多核苷酸部分包含以SEQ ID NO:4和/或SEQ ID NO:5示出的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:4和/或SEQ ID NO:5具有至少80％一致性的核苷酸序列；优选地，所述多核苷酸包含以SEQ ID NO:6示出的核苷酸序列或与SEQ ID NO:6具有至少80％一致性的核苷酸序列。4.一种含有权利要求3所述的多核苷酸的重组表达载体；优选地，所述重组表达载体为原核重组表达载体；更优选地，所述重组表达载体为携带分子伴侣的原核重组表达载体；进一步优选地，所述分子伴侣为小分子泛素样修饰蛋白；或者进一步优选地，所述重组表达载体为重组的pSUMO载体或重组的PET系列载体。5.一种含有权利要求4所述的重组表达载体或者在其基因组中整合有权利要求3所述的多核苷酸的重组细胞；优选地，用于构建所述重组细胞的宿主细胞为原核宿主细胞；更优选地，所述原核宿主细胞选自大肠杆菌、农杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、炭疽芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌或苏云金芽孢杆菌。6.一种药物组合物，其中，所述药物组合物包含权利要求1或2所述的融合蛋白；优选地，所述药物组合物进一步包含药学上可接受的辅料。7.一种试剂盒，其中，所述试剂盒包含权利要求1或2所述的融合蛋白或者权利要求6所述的药物组合物；优选地，所述试剂盒进一步包含pH 5.0-5.5的柠檬酸盐缓冲溶液；优选地，所述试剂盒进一步包含精氨酸水溶液、优选50mmol/L-150mmol/L的精氨酸水溶液；优选地，所述试剂盒进一步包含pH 5.0-5.5的精氨酸+柠檬酸盐缓冲溶液；优选地，所述试剂盒进一步包含精氨酸水溶液和pH 5.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，李德山，于丹，刘芝航，王振中，尹成凯，孙旭，
申请(专利权)人：江苏康缘瑞翱生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：