一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用制造技术

本申请属于生物技术领域，尤其涉及一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用。本申请提供了一种复合透皮重组纤连蛋白，包括：透皮短肽、纤连蛋白和胶原蛋白顺次连接的融合多肽；透皮短肽的氨基酸序列具有如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列；纤连蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列；胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸序列。本申请公开了所述复合透皮重组纤连蛋白在制备穿过皮肤屏障产品和促进细胞粘附、伸展及生长产品中的应用。本申请提供一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用，能有效解决现有纤连蛋白存在的透皮能力低、细胞粘附，伸展及生长的能力差的技术问题。伸展及生长的能力差的技术问题。伸展及生长的能力差的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用


[0001]本申请属于生物
，尤其涉及一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用。

技术介绍

[0002]纤连蛋白(Fibronectin，FN)，是一种高分子量(约440kDa)的细胞外基质的糖蛋白，它与整合素跨膜受体蛋白结合。纤连蛋白有许多生物学功能，例如对创面愈合和胚胎发育等过程至关重要。细胞纤连蛋白聚集在细胞外基质中，这是一种不溶性的网络，可以分离和支持有机体的器官和组织。纤连蛋白与纤维蛋白在损伤部位沉积，形成血凝块，止血并保护皮下组织其次，在细胞粘附、伸展、生长、迁移和分化过程中起着重要作用。纤连蛋白在医学、美容化妆品以及科研领域有广泛应用及巨大市场，但从人体或动物血液和组织中提取的天然纤连蛋白产量极为有限，成本昂贵。再者，由于纤连蛋白分子太大，难以被角质结构完整的皮肤吸收。因此限制了FN在很多方面的应用和生产，尤其是美容护肤领域。此外，皮肤表面有一层物质屏障，阻止了绝大多数蛋白类药物通过皮肤，纤连蛋白为蛋白类分子，透皮能力低，因而在皮肤屏障完整或部分完整情形下应用效果不佳。

技术实现思路

[0003]为了解决上述问题，本申请提供一种复合透皮重组纤连蛋白及其应用，能有效解决现有纤连蛋白存在的透皮能力低、细胞粘附，伸展及生长的能力差的技术问题。
[0004]本申请第一方面提供了一种复合透皮重组纤连蛋白，包括：透皮短肽、纤连蛋白和胶原蛋白顺次连接的融合多肽；
[0005]所述透皮短肽的氨基酸序列具有如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；
[0006]所述纤连蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；
[0007]所述胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.3所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.3所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。
[0008]另一实施例中，所述透皮短肽与所述纤连蛋白以连接肽连接；
[0009]所述纤连蛋白与所述胶原蛋白以连接肽连接。
[0010]另一实施例中，所述连接肽的氨基酸序列为GGGGS、GSGGSGGGSGGSGGG或GGGGSGGG中的一种。
[0011]本申请第二方面提供了编码所述任一项复合透皮重组纤连蛋白的核苷酸序列。
[0012]另一实施例中，
[0013]所述SEQ ID NO.1所示透皮短肽具有如SEQ ID NO.4所示核苷酸序列；
[0014]所述SEQ ID NO.2所示纤连蛋白具有如SEQ ID NO.5所示核苷酸序列；
[0015]所述SEQ ID NO.3所示胶原蛋白具有如SEQ ID NO.6所示核苷酸序列。
[0016]具体的，所述透皮短肽TD
‑
1的氨基酸序列为SEQ ID No:1：ACSSSPSKHCG，其核苷酸序列SEQ ID No:4：GCTTGTAGTAGCAGCCCGAGCAAACATTGCGGT。
[0017]具体的，所述透皮短肽TD
‑
1的C端通过连接肽连接纤连蛋白片段，所述纤连蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No:2:IQWNAPQPSHISKYILRWRPKNSVGRWKEATIPGHLNSYTIKGLKPGVVYEGQLISIQQYGHQEVTRFDFTTTSTSTGSAVPPPTDLRFTNIGPDTMRVTWAPPPSIDLTNFLVRYSPVKNEEDVAELSISPSDNAVVLTNLLPGTEYVVSVSSVYEQHESTPLRGRQKTVSDVPRDLEVVAATPTSLLISWDAPAVTVRYYRITYGETGGNSPVQEFTVPGSKSTATISGLKPGVDYTITVYAVTGRGDSPASSKPISINYRT，其核苷酸序列为SEQ ID No:5：ATCCAGTGGAATGCACCACAGCCATCTCACATTTCCAAGTACATTCTCAGGTGGAGACCTAAAAATTCTGTAGGCCGTTGGAAGGAAGCTACCATACCAGGCCACTTAAACTCCTACACCATCAAAGGCCTGAAGCCTGGTGTGGTATACGAGGGCCAGCTCATCAGCATCCAGCAGTACGGCCACCAAGAAGTGACTCGCTTTGACTTCACCACCACCAGCACCAGCACAGGATCTGCTGTTCCTCCTCCCACTGACCTGCGATTCACCAACATTGGTCCAGACACCATGCGTGTCACCTGGGCTCCACCCCCATCCATTGATTTAACCAACTTCCTGGTGCGTTACTCACCTGTGAAAAATGAGGAAGATGTTGCAGAGTTGTCAATTTCTCCTTCAGACAATGCAGTGGTCTTAACAAATCTCCTGCCTGGTACAGAATATGTAGTGAGTGTCTCCAGTGTCTACGAACAACATGAGAGCACACCTCTTAGAGGAAGACAGAAAACAGTTTCTGATGTTCCGAGGGACCTGGAAGTTGTTGCTGCGACCCCCACCAGCCTACTGATCAGCTGGGATGCTCCTGCTGTCACAGTGAGATATTACAGGATCACTTACGGAGAAACAGGAGGAAATAGCCCTGTCCAGGAGTTCACTGTGCCTGGGAGCAAGTCTACAGCTACCATCAGCGGCCTTAAACCTGGAGTTGATTATACCATCACTGTGTATGCTGTCACTGGCCGTGGAGACAGCCCCGCAAGCAGCAAGCCAATTTCCATTAATTACCGAACA。
[0018]具体的，所述纤连蛋白的C端通过连接肽连接胶原蛋白片段，其中所述胶原蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No:3：GFPGER，其核苷酸序列为SEQ ID No:6：GGTTTCCCGGGTGAACGT。
[0019]本申请第三方面提供了一种重组表达载体，含有所述核苷酸序列。
[0020]本申请第四方面提供了一种工程菌，含有所述的重组表达载体。
[0021]本申请第五方面公开了所述复合透皮重组纤连蛋白在制备穿过皮肤屏障产品中的应用。
[0022]本申请第六方面公开了所述复合透皮重组纤连蛋白在制备促进细胞粘附、伸展及生长产品中的应用。
[0023]本申请第七方面提供了一种皮肤用制剂，包括所述复合透皮重组纤连蛋白和药学上可接受的辅料。
[0024]具体的，所述药学上可接受的辅料选自本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合透皮重组纤连蛋白，其特征在于，包括：透皮短肽、纤连蛋白和胶原蛋白顺次连接的融合多肽；所述透皮短肽的氨基酸序列具有如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；所述纤连蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；所述胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸序列；或SEQ ID NO.3所示氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸，且与SEQ ID NO.3所示氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的复合透皮重组纤连蛋白，其特征在于，所述透皮短肽与所述纤连蛋白以连接肽连接；所述纤连蛋白与所述胶原蛋白以连接肽连接。3.根据权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：温龙平，钱洁颖，武洪淼，
申请(专利权)人：北京添易医学研究院，
类型：发明
国别省市：