本实用新型专利技术涉及利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片，包括芯片载体，所述芯片前端设有样品采样孔，后端设有出样孔，所述芯片载体内嵌微通道、IgG反应槽和IgM反应槽，所述样品采样孔为圆形，所述样品采样孔底部设置通孔，所述芯片载体内部设有微通道、IgG反应槽和IgM反应槽，所述IgG反应槽和IgM反应槽经多聚赖氨酸处理后，具有黏附性，反应槽底部平均分布IgG/IgM检测用抗体，所述出样孔与各个反应槽通过微通道连接。利用本发明专利技术，其技术简单实用，稳定性高，检测效果好，能够很好的在检测方面取代现有ELISA检测技术。够很好的在检测方面取代现有ELISA检测技术。够很好的在检测方面取代现有ELISA检测技术。
【技术实现步骤摘要】
利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片
[0001]本技术属于抗体检测
，具体涉及利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片。
技术介绍
[0002]针对于登革热病毒的快速检测，由于ELISA技术的进程比较长，操作繁琐等原因，具有检测不便的劣势。
技术实现思路
[0003]为解决上述问题，本技术提供了利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片，包括芯片载体，所述芯片前端设有样品采样孔，后端设有出样孔，所述芯片载体内嵌微通道、IgG反应槽和IgM反应槽，其中，所述样品采样孔为圆形，所述样品采样孔底部设置通孔，所述芯片载体内部设有微通道、 IgG反应槽和IgM反应槽，所述IgG反应槽和IgM反应槽经多聚赖氨酸处理后，具有黏附性，反应槽底部平均分布IgG/IgM检测用抗体，所述出样孔与各个反应槽通过微通道连接。
[0004]优选的是，所述芯片载体为透明可视结构。
[0005]在上述任一方案中优选的是，所述芯片载体由聚甲基丙烯酸甲酯材料制作而成。
[0006]在上述任一方案中优选的是，所述IgG反应槽包埋有抗人IgG抗体，所述IgM 反应槽包埋有抗人IgM抗体。
[0007]在上述任一方案中优选的是，彩色荧光微球是采用罗丹明B荧光染料与改性苯乙烯一起发生共聚而制备出来，微球呈现粉红色(可肉眼观察)，在532nm 激发波长照射下，显示红色荧光，所述彩色荧光微球标记表面经缩合反应嫁接了登革热病毒特异性抗原。
[0008]本技术的有益效果为：本技术提供的利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片，本专利技术采用新的红色荧光标记点(直径300nm的微球)和抗原或者抗体进行缩合反应，形成不可逆的整体，实现了对目标蛋白的标记，并制备出登革热病毒抗体检测卡，红色荧光标记点是由含有红色荧光染料(罗丹明B)的改性苯乙烯的直径在300nm的微球组成，球体外部有羟基功能团，通过缩合反应可以与目标蛋白合成为一体，最终形成代用红色荧光标记的蛋白。
[0009]相对于ELISA等常规检测方法，由于ELISA技术的进程比较长，操作繁琐等原因，因此利用本专利技术，其技术简单实用，稳定性高，检测效果好，能够很好的在检测方面取代现有ELISA检测技术。
附图说明
[0010]图1为按照本技术的利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片的一优选实施例示意图；
[0011]图2为按照本技术的利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片
的一优选实施例侧视图。
[0012]图中标注说明：1
‑
采样孔；2
‑
微通道；3
‑
IgG反应槽；4
‑
IgM反应槽；5
‑
出样孔。
具体实施方式
[0013]为了更进一步了解本技术的
技术实现思路
，下面将结合具体实施例详细阐述本技术。
[0014]如图1和图2所示，本专利技术采用一种利用红色荧光微球标记的登革热病毒快速检测芯片，包括芯片载体，所述芯片载体前端设有样品采样孔1，所述芯片载体后端设有出样孔5，所述采样孔1为圆孔形，所述芯片载体上设置微通道2，与IgG反应槽3和IgM反应槽4，所述IgG反应槽3和IgM反应槽4经多聚赖氨酸处理后，具有黏附性，反应槽底部平均分布IgG/IgM检测用抗体，所述出样孔5与各个反应槽通过微通道2连接，IgG反应槽3和IgM反应槽4利用微通道3与出样孔5连接，使用时，将已经处理好的样品通过空气压缩泵按照一定流速通过微通道2导入IgG反应槽3和IgM反应槽4，平放于桌面上，于室温下静置五分钟，利用空气压缩泵将样品通过微通道2从出样孔5导出芯片，将一定量PBS缓冲液(含2％吐温20)利用空气压缩泵按照一定流速通过微通道2 导入IgG反应槽3和IgM反应槽4，进行清洗，并通过空气压缩泵将PBS缓冲液通过微通道2从出样孔5导出芯片，重复3次，然后可通过相关的检测仪器进行观察红色荧光值并定量检测。
[0015]实施例二
[0016]红色荧光标记球的制备：
[0017]1.将红色荧光微球用盐水配成浓度为5μM；
[0018]2.待标记蛋白用磷酸缓冲液(0.01M，PH6.8)稀释至5mg/ml；
[0019]3.取一定量的微球加入到反应器中，开始搅拌，依次加入计算好用量的 EDC水溶液(10mg/ml)、NHS水溶液(10mg/ml，调节PH至7.0左右)，搅拌0.5h；
[0020]4.按比例加入待标记蛋白(登革热特异性抗原)，搅拌4h；
[0021]5.反应结束，用0.22μm针头式滤器将样品过滤，测浓度。于4℃保存；检测样本待处理方法：
[0022]取测试患者的血液样本(全血，血清或者血浆)100ul，与20ul含有已经标记的微球红色荧光溶液，利用微量移液器充分混匀，室温下静置30分钟，每隔 5分钟，用微量移液器混匀一次。
[0023]结果判断：
[0024]IgG定量检测：IgG反应槽3显示红颜色(在532nm激发波长照射下，显示红色荧光)，通过相应的荧光检测仪进行定量检测；利用空气压缩泵将待测血清(被红色微球标记好，与红色荧光微球的登革热病毒重组抗原结合成抗原抗体复合物)通过采样孔1导入到微通道2内，然后流转到IgG反应槽3，首先，抗原抗体复合物上，被测抗体的另一结合位点与包被在此处的抗人IgG抗体结合，形成单抗体结合一个抗体和一个抗原(双抗体夹心)的微球复合物，因有红色荧光微球在此沉积，故IgG反应槽3显红色，然后利用空气压缩泵将PBS 缓冲液(含2％吐温20)注入到IgG反应槽3，进行清洗，重复3次，所有废液经微通道2从出样孔5导出芯片。
[0025]IgM定量检测：IgM反应槽4显示红颜色(在532nm激发波长照射下，显示红色荧光),
通过相应的荧光检测仪进行定量检测；利用空气压缩泵将待测血清(被红色微球标记好，与红色荧光微球的登革热病毒重组抗原结合成抗原抗体复合物)通过采样孔1导入到微通道2内，然后流转到IgM反应槽4。首先，抗原抗体复合物上，被测抗体的另一结合位点与包被在此处的抗人IgM抗体结合，形成单抗体结合一个抗体和一个抗原(双抗体夹心)的微球复合物，因有红色荧光微球在此沉积，故IgM反应槽4显红色。然后利用空气压缩泵将PBS 缓冲液(含2％吐温20)注入到IgM反应槽4，进行清洗，重复3次，所有废液经微通道2从出样孔5导出芯片。
[0026]本领域技术人员不难理解，本技术的利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片包括上述本技术说明书的
技术实现思路
和具体实施方式部分以及附图所示出的各部分的任意组合，限于篇幅并为使说明书简明而没有将这些组合构成的各方案一一描述。凡在本技术的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.利用红色荧光微球标记的登革热病毒抗体快速检测芯片，包括芯片载体，所述芯片载体前端设有样品采样孔，后端设有出样孔，所述芯片载体内嵌微通道、IgG反应槽和IgM反应槽，其特征在于，所述样品采样孔为圆形，所述样品采样孔底部设置通孔，所述芯片载体内部设有微通道、IgG反应槽和IgM反应槽，所述IgG反应槽和IgM反应槽经多聚赖氨酸处理后，具有黏附性，反应槽底部平均分布IgG/IgM检测用抗体，所述出样孔与各个反应槽通过微通道...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵钢，
申请(专利权)人：苏州诺威百奥生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：
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