【技术实现步骤摘要】
一种用于定向创制植物突变体的方法
[0001]本专利技术属于植物突变的
,具体涉及一种用于定向创制植物突变体的方法。
技术介绍
[0002]突变体创制是研究植物基因功能的重要实验材料,现在主要是通过化学方法、物理诱变或者生物学方法插入或者基因编辑等技术手段。
[0003]现有突变体创制的方法,均在一定程度上存在缺陷,例如化学诱变和T
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DNA突变的方法创制突变体具有不定向性,获得突变体需要鉴定突变位置,工作量巨大;利用基因编辑的方法创制突变体,操作相对简单,但不利于同时创制多种突变体或大量突变体的创制。
技术实现思路
[0004]针对上述问题,本专利技术的目的在于提供一种用于定向创制植物突变体的方法,将基因编辑技术与纳米材料相结合,可实现大量定向突变体的创制,操作简单。
[0005]本专利技术的
技术实现思路
如下:本专利技术提供了一种用于定向创制植物突变体的方法,包括如下步骤:1)浸染植物愈伤组织,导入基因,获取过表达基因的阳性愈伤组织;2)准备纳米材料:包括M
2+
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于定向创制植物突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)浸染植物愈伤组织,导入基因,获取过表达基因的阳性愈伤组织;2)准备纳米材料:包括M
2+
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N
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类水滑石纳米材料或纳米管;3)将步骤2)纳米材料的水溶液与带有PAM结构的特异基因gRNA片段混合;4)将步骤3)获得的混合液浸染步骤1)过表达基因的阳性愈伤组织,培养获得小苗,即为植物突变体,提取突变体叶片的DNA进行鉴定。2.由权利要求1所述的用于定向创制植物突变体的方法,其特征在于,步骤1)所述植物的品种包括拟南芥、烟草、杨树、樟树、苹果以及木荷。3.由权利要求1所述的用于定向创制植物突变体的方法,其特征在于,步骤1)所述浸染的操作包括利用农杆菌介导法浸染植物愈伤组织:将编辑基因通过酶切连接或重组酶法构建到植物过表达载体中,再将重组质粒转化至农杆菌感受态,用活化的带有目标载体的农杆菌浸染在分化培养基上预培养的植物叶片,之后转移至抗性相应的抗性培养基上,进行分化以及生长培养,产生愈伤组织,筛选出过表达基因的阳性愈伤组织。4.由权利要求3所述的用于定向创制植物突变体的方法,其特征在于,所述编辑基因包括Cas 9或Cas 12a基因。5.由权利要求3所述的用于定向创制植物突变体的方法,其特征在于,所述抗性培养基为在...
【专利技术属性】
技术研发人员:尧俊,蔡燕灵,张谦,何波祥,谢佩吾,汪迎利,梁东成,白青松,连辉明,侯晨,李兵,陈春如,李泽波,
申请(专利权)人:广东尚善环境建设有限公司广东森霖造绿有限公司,
类型:发明
国别省市:
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