咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用。本发明专利技术以白色念珠菌为供试对象，筛选高效、低毒、不易产生耐药性的化合物，发现咖啡醇或其衍生物对白色念珠菌的粘附性、菌丝形成、生物膜形成和致病性具有很好的抑制作用。且其豆醇对白色念珠菌菌株SC5314的小鼠口腔侵染有很好的抑制作用，该化合物本身对人类细胞无毒；低浓度的咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌的细胞生长没有抑制作用，表明咖啡醇或其衍生物对白色念珠菌的作用并不是依靠杀死白色念珠菌细胞，而是抑制白色念珠菌的致病因子表达，因此不易产生耐药性。这在新型抗真菌药物的开发，尤其是抗白色念珠菌药物的开发方面具有很好的应用前景。有很好的应用前景。有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，特别涉及咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用。

技术介绍

[0002]白色念珠菌(Candida albicans)是在人类中广泛传播的真菌疾病，是一种重要的条件致病真菌，通常会引起急性、亚急性或慢性感染，也是现在医院获得性感染最重要的病原之一。在健康人体黏膜表面，如口腔、肠道，白色念珠菌通常不会引起病害，但在免疫系统受到损害或抑制的病人体内，如化疗病人、器官移植病人或艾滋病人中，会引起严重的系统性感染，其致死率高达40％。
[0003]目前在临床上抗真菌药物种类有限，其中唑类药物(氟康唑)应用广泛，氟康唑是通过抑制真菌复制起到抑菌的作用，但是随着抗生素的滥用，耐药性的现象越来越严重。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用。
[0005]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用。
[0006]所述的衍生物优选为咖啡豆醇，CAS号为6894
‑
43
‑
5，其结构式如下所示：
[0007][0008]所述的咖啡醇，亦称为咖啡油醇，CAS号为469
‑
83
‑
0，其结构式如下所示：
[0009][0010]具体地，所述的抗白色念珠菌是指抑制白色念珠菌的粘附性、菌丝形成、生物膜形成、致病性(白色念珠菌的侵染致病能力)。
[0011]所述的抗白色念珠菌药物包括用于预防和/或治疗白色念珠菌感染的药物，以及用于预防和/或治疗白色念珠菌引起的感染性疾病药物。
[0012]所述的日用品优选为漱口水或阴道洗液。
[0013]本专利技术具有以下有益效果：
[0014]酵母
‑
菌丝二相性是白色念珠菌特有的特性。游离的酵母态在感染期间对于宿主是没有致病性的，主要行使粘附于受体组织的作用，随后进行由酵母态向菌丝态的转变以促进入侵，之后以菌丝态的形式侵染寄主组织，进一步发挥致病毒力作用。酵母
‑
菌丝的形态转变是白色念珠菌发挥毒力的重要过程。因此，本专利技术在前期的研究工作中，从白色念珠菌特有的酵母
‑
菌丝二相性入手，针对性地筛选高效、低毒、不易产生耐药性的化合物。然后以白色念珠菌(Candida albicans)为供试对象，分别考察了本专利技术筛选的咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌的粘附性、菌丝形成率、生物膜形成以及细胞毒力的影响作用，目的是通过检测咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌毒力因子的干扰，进一步影响白色念珠菌的侵染作用。结果显示，高浓度的咖啡豆醇对白色念珠菌的生长具有轻微的抑制作用，低浓度的咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌的生长没有抑制作用且它们都对白色念珠菌的粘附性、菌丝形成、生物膜形成和致病性具有很好的抑制作用，表明咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌的毒力抑制作用并不主要是依靠杀死白色念珠菌细胞，而是通过抑制白色念珠菌的粘附性、菌丝形成、生物膜形成和致病性达到的，因此不易产生耐药性。而且，咖啡豆醇和咖啡油醇不影响人体细胞，对人体细胞无毒。因此，咖啡豆醇和咖啡油醇在新型抗真菌药物的开发，尤其是抗白色念珠菌感染药物的开发方面具有很好的应用前景
[0015]因此，咖啡豆醇和咖啡油醇在制备抗白色念珠菌感染的药物中的应用，以及在制备预防和/或治疗白色念珠菌引起的感染性疾病的药物中的应用，均应在本专利技术的保护范围之内。
附图说明
[0016]图1是终浓度为30μg/mL的咖啡豆醇和咖啡油醇分别抑制白色念珠菌菌丝生成的显微镜照片图；其中，设置了DMSO对照组。
[0017]图2是咖啡豆醇和咖啡油醇分别抑制白色念珠菌菌丝形成率的测定结果图；此数据显示的是3次生物学实验的平均结果，误差棒反映了标准差。
[0018]图3是咖啡豆醇和咖啡油醇分别抑制白色念珠菌粘附性的结果图；其中， DMSO作为对照组；数据显示的是4个生物学重复的平均结果，误差棒反映了标准差。
[0019]图4是咖啡豆醇和咖啡油醇分别抑制白色念珠菌生物膜形成的结果图；其中，DMSO作为对照组；数据显示的是4个生物学重复的平均结果，误差棒反映了标准差。
[0020]图5是咖啡豆醇和咖啡油醇分别对白色念珠菌生长速率的影响结果图；其中，DMSO作为对照；数据显示的是4个生物学重复的平均结果，误差棒反映了标准差。
[0021]图6是咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌分别在A549细胞毒力方面的影响结果图；其中，图A是终浓度为30μg/mL的咖啡豆醇和咖啡油醇对A549细胞的细胞毒性检测结果图；图B是不同浓度的咖啡豆醇和咖啡油醇抑制白色念珠菌侵染细胞后的检测结果图。
[0022]图7是咖啡豆醇对白色念珠菌菌株SC5314的小鼠口腔侵染检测结果图。
具体实施方式
[0023]下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限
于此。
[0024]除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。
[0025]除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
[0026]实施例1咖啡豆醇和咖啡油醇抗菌活性检测
[0027]1、试验方法：
[0028](1)白色念珠菌菌株的活化：
[0029]将白色念珠菌标准菌株SC5314(名称亦为ATCC MYA
‑
2876)于LB固体培养基活化(胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L、琼脂15g/L)，置于30℃培养箱培养过夜。
[0030](2)咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌菌株SC5314菌丝的影响：
[0031]挑取LB固体平板上(胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L、琼脂15g/L)的SC5314菌株，接种于GMM培养液(6.7g/L YNB、0.2％葡萄糖) 中，30℃、200rpm振荡培养过夜，测定菌液OD
600
，用GMM将菌液稀释至 OD
600
＝0.1。取500μL菌液于1.5mL EP管中，加入咖啡豆醇和咖啡油醇，终浓度为30μg/mL；同时设置DMSO对照；DMSO对照组中DMSO按咖啡豆醇和咖啡油醇处理组的相同体积加入到菌液中得到。震荡混匀，置于37℃水浴锅中孵育， 6h后，离心5000rpm，10min，弃上清，加入40μL GMM培养液重悬菌体，于 Zeiss Axioplan 2显微镜下观察菌丝的形成，取不同视野拍摄照片，并计算菌丝形成率。
[0032](3)咖啡豆醇和咖啡油醇对白色念珠菌菌株SC5314粘附性的影响：
[0033](a)人非小细胞肺癌细胞系A549细胞的复本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用。2.根据权利要求1所述的咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用，其特征在于：所述的抗白色念珠菌药物是具有抑制白色念珠菌的粘附性、菌丝形成、生物膜形成、致病性的药物。3.根据权利要求1所述的咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓音乐，宋施豪，王歌润，谭慧慧，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：