Fc区变体制造技术

本发明专利技术发现了：包含抗体Fc区变体的多肽，与包含天然型IgG的Fc区的多肽相比，维持对FcγRIIb的结合活性，且减少对所有活性型FcγR、其中对FcγRIIa(R型)的结合活性，该抗体Fc区变体包含组合有EU编号第238位的氨基酸改变和其它特定的氨基酸改变的氨基酸序列。其它特定的氨基酸改变的氨基酸序列。

【技术实现步骤摘要】
Fc区变体
本申请是国际申请日为2014年4月2日、国际申请号为PCT/JP2014/059706于2015年12月1日进入中国国家阶段、申请号201480031490.X、专利技术名称“Fc区变体”的申请的分案申请。


[0001]本专利技术涉及Fc区变体、包含该Fc区变体的多肽以及含有该多肽的药物组合物，所述Fc区变体通过在抗体的Fc区导入氨基酸改变，与包含天然型人IgG的Fc区的多肽相比时，可以维持对FcγRIIb的结合活性，同时降低对所有活性型FcγR的结合活性、特别是对FcγRIIa(R型)的结合活性。

技术介绍

[0002]抗体在血浆中的稳定性高、副作用也少，因此作为药物受到关注。其中，多数IgG型的抗体药物已经市场销售，现在仍在开发多数的抗体药物(非专利文献1和非专利文献2)。另一方面，作为可以适用于第二代抗体药物的技术开发了各种各样的技术，报道了使效应子功能、抗原结合能力、药代动力学、稳定性提高或使免疫原性风险降低的技术等(非专利文献3)。通常抗体药物的给药量非常高，因此难以制作皮下给药的制剂、制造成本高等作为课题被考虑。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Fc区变体，该Fc区变体包含Fc区的EU编号第238位的氨基酸、以及下述(a)～(k)的任一项所述的氨基酸改变，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减少，(a)Fc区的EU编号第235位的氨基酸；(b)Fc区的EU编号第237位的氨基酸；(c)Fc区的EU编号第241位的氨基酸；(d)Fc区的EU编号第268位的氨基酸；(e)Fc区的EU编号第295位的氨基酸；(f)Fc区的EU编号第296位的氨基酸；(g)Fc区的EU编号第298位的氨基酸；(h)Fc区的EU编号第323位的氨基酸；(i)Fc区的EU编号第324位的氨基酸；(j)Fc区的EU编号第330位的氨基酸；(k)选自(a)～(j)的至少2个氨基酸。2.权利要求1所述的Fc区变体，其中，权利要求1的(k)中选择的至少2个氨基酸为下述(1)～(3)的任一项所述的氨基酸的组合：(1)Fc区的EU编号第241位的氨基酸、第268位的氨基酸、第296位的氨基酸以及第324位的氨基酸；(2)Fc区的EU编号第237位的氨基酸、第241位的氨基酸、第296位的氨基酸以及第330位的氨基酸；(3)Fc区的EU编号第235位的氨基酸、第237位的氨基酸、第241位的氨基酸以及第296位的氨基酸。3.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp、且具有下述(a)～(k)的任一项所述的氨基酸，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减少，(a)Fc区的EU编号第235位的氨基酸为Phe；(b)Fc区的EU编号第237位的氨基酸为Gln或Asp；(c)Fc区的EU编号第241位的氨基酸位Met或Leu；(d)Fc区的EU编号第268位的氨基酸位Pro；(e)Fc区的EU编号第295位的氨基酸位Met或Val；(f)Fc区的EU编号第296位的氨基酸为Glu、His、Asn或Asp；(g)Fc区的EU编号第298位的氨基酸为Ala或Met；(h)Fc区的EU编号第323位的氨基酸为Ile；(i)Fc区的EU编号第324位的氨基酸为Asn或His；(j)Fc区的EU编号第330位的氨基酸为His或Tyr；(k)选自(a)～(j)的至少2个氨基酸。4.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp、且具有下述(1)～(3)的任一项所述的氨基酸：(1)Fc区的EU编号第241位的氨基酸为Met、第268位的氨基酸为Pro、第296位的氨基酸
为Glu以及第324位的氨基酸为His；(2)Fc区的EU编号第237位的氨基酸为Gln或Asp、第241位的氨基酸为Met、第296位的氨基酸为Glu以及第330位的氨基酸为His；(3)Fc区的EU编号第235位的氨基酸为Phe、第237位的氨基酸为Gln或Asp、第241位的氨基酸为Met以及第296位的氨基酸为Glu。5.Fc区变体，该Fc区变体包含Fc区的EU编号第238位的氨基酸和第271位的氨基酸、以及下述(a)～(h)的任一项所述的氨基酸改变，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减少，(a)Fc区的EU编号第234位的氨基酸；(b)Fc区的EU编号第235位的氨基酸；(c)Fc区的EU编号第236位的氨基酸；(d)Fc区的EU编号第237位的氨基酸；(e)Fc区的EU编号第239位的氨基酸；(f)Fc区的EU编号第265位的氨基酸；(g)Fc区的EU编号第267位的氨基酸；(h)Fc区的EU编号第297位的氨基酸。6.权利要求5所述的Fc区变体，其中，上述氨基酸改变为下述(1)～(3)的任一项所述的氨基酸改变的组合：(1)Fc区的EU编号第233位的氨基酸、第238位的氨基酸、第264位的氨基酸、第267位的氨基酸、第268位的氨基酸以及第271位的氨基酸；(2)Fc区的EU编号第233位的氨基酸、第237位的氨基酸、第238位的氨基酸、第264位的氨基酸、第267位的氨基酸、第268位的氨基酸、第271位的氨基酸、第296位的氨基酸、第297位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第396位的氨基酸；(3)Fc区的EU编号第233位的氨基酸、第238位的氨基酸、第264位的氨基酸、第267位的氨基酸、第268位的氨基酸、第271位的氨基酸以及第296位的氨基酸。7.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp和第271位的氨基酸为Gly、且具有下述(a)～(h)的任一项所述的氨基酸，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减少，(a)Fc区的EU编号第234位的氨基酸为Ala、His、Asn、Lys或Arg；(b)Fc区的EU编号第235位的氨基酸为Ala；(c)Fc区的EU编号第236位的氨基酸为Gln；(d)Fc区的EU编号第237位的氨基酸为Arg或Lys；(e)Fc区的EU编号第239位的氨基酸为Lys；(f)Fc区的EU编号第265位的氨基酸为Lys、Asn、Arg、Ser或Val；(g)Fc区的EU编号第267位的氨基酸为Lys、Arg或Tyr；(h)Fc区的EU编号第297位的氨基酸为Ala。8.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp和第271位的氨基酸为Gly、且包含下述(1)～(3)的任一项所述的氨基酸：(1)Fc区的EU编号第233位的氨基酸为Asp、第238位的氨基酸为Asp、第264位的氨基酸
为Ile、第267位的氨基酸为Arg、第268位的氨基酸为Glu以及第271位的氨基酸为Gly；(2)Fc区的EU编号第233位的氨基酸为Asp、第237位的氨基酸为Asp、第238位的氨基酸为Asp、第264位的氨基酸为Ile、第267位的氨基酸为Ala、第268位的氨基酸为Glu、第271位的氨基酸为Gly、第296位的氨基酸为Asp、第297位的氨基酸为Ala、第330位的氨基酸为Arg以及第396位的氨基酸为Met；(3)Fc区的EU编号第233位的氨基酸为Asp、第238位的氨基酸为Asp、第264位的氨基酸为Ile、第267位的氨基酸为Arg、第268位的氨基酸为Pro、第271位的氨基酸为Gly以及第296位的氨基酸为Glu。9.权利要求1～8的任一项所述的Fc区变体，其中，该Fc区变体进一步减少与补体的结合。10.权利要求9所述的Fc区变体，其中，减少与补体的结合的Fc区变体包含Fc区的EU编号第322位的氨基酸改变，或者Fc区的EU编号第327位、第330位和第331位的氨基酸改变。11.权利要求9所述的Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第322位的氨基酸为Ala或Glu，或者Fc区的EU编号第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser和第331位的氨基酸为Ser。12.Fc区变体，该Fc区变体包含Fc区的EU编号第238位的氨基酸、第271位的氨基酸、第327位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第331位的氨基酸的氨基酸改变，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减少。13.权利要求12所述的Fc区变体，其中，进一步包含下述(a)～(e)的任一项所述的氨基酸改变：(a)Fc区的EU编号第233位的氨基酸；(b)Fc区的EU编号第237位的氨基酸；(c)Fc区的EU编号第264位的氨基酸；(d)Fc区的EU编号第267位的氨基酸；(e)Fc区的EU编号第268位的氨基酸。14.权利要求13所述的Fc区变体，其中，上述氨基酸改变为下述(1)～(4)的任一项所述的氨基酸改变的组合：(1)Fc区的EU编号第237位的氨基酸、第238位的氨基酸、第268位的氨基酸、第271位的氨基酸、第327位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第331位的氨基酸；(2)Fc区的EU编号第233位的氨基酸、第237位的氨基酸、第238位的氨基酸、第268位的氨基酸、第271位的氨基酸、第327位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第331位的氨基酸；(3)Fc区的EU编号第238位的氨基酸、第267位的氨基酸、第268位的氨基酸、第271位的氨基酸、第327位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第331位的氨基酸；(4)Fc区的EU编号第238位的氨基酸、第264位的氨基酸、第267位的氨基酸、第271位的氨基酸、第327位的氨基酸、第330位的氨基酸以及第331位的氨基酸。15.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp、第271位的氨基酸为Gly、第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser以及第331位的氨基酸为Ser，与天然型IgG的Fc区相比时，该Fc区变体对FcγRIIb的结合活性维持、且对所有活性型FcγR的结合活性减
少。16.权利要求15所述的Fc区变体，其中，进一步具有下述(a)～(h)的任一项所述的氨基酸：(a)Fc区的EU编号第233位的氨基酸为Asp；(b)Fc区的EU编号第237位的氨基酸为Asp；(c)Fc区的EU编号第264位的氨基酸为Ile；(d)Fc区的EU编号第267位的氨基酸为Ala；(e)Fc区的EU编号第268位的氨基酸为Asp或Glu。17.Fc区变体，其中，Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp和第271位的氨基酸为Gly、且包含下述(1)～(4)的任一项所述的氨基酸：(1)Fc区的EU编号第237位的氨基酸为Asp、第238位的氨基酸为Asp、第268位的氨基酸为Asp或Glu、第271位的氨基酸为Gly、第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser以及第331位的氨基酸为Ser；(2)Fc区的EU编号第233位的氨基酸为Asp、第237位的氨基酸为Asp、第238位的氨基酸为Asp、第268位的氨基酸为Asp、第271位的氨基酸为Gly、第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser以及第331位的氨基酸为Ser；(3)Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp、第267位的氨基酸为Ala、第268位的氨基酸为Glu、第271位的氨基酸为Gly、第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser以及第331位的氨基酸为Ser；(4)Fc区的EU编号第238位的氨基酸为Asp、第264位的氨基酸为Ile、第267位的氨基酸为Ala、第271位的氨基酸为Gly、第327位的氨基酸为Gly、第330位的氨基酸为Ser以及第331位的氨基酸为Ser。18.权利要求1～17的任一项所述的Fc区变体，其中，对FcγRIIb的结合活性具有天然型IgG的Fc区的结合量的至少80％，对FcγRIIaR的结合活性为天然型IgG的Fc区的结合量的30％以下。19.权利要求1～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：味元风太，坚田仁，井川智之，
申请(专利权)人：中外制药株式会社，
类型：发明
国别省市：