【技术实现步骤摘要】
一种基于Au/CdS/CdIn2S4的光电化学适配体传感器检测沙门氏菌的方法
[0001]本专利技术属于食品安全检测领域,尤其是涉及一种检测食源性致病菌的半导体纳米生物传感器及其制备方法。
技术介绍
[0002]在世界范围内,随着人们对加工食品依赖程度的不断提高,致使全球食源性疾病的数量逐年增加。据统计,全世界每年有数亿人因食物污染而致病。其中,由微生物污染而引起的患者人数居于首位,是目前世界上最突出的健康卫生问题。近年来,我国食源性疾病的比例呈上升趋势,约有六分之一的人口患有食源性疾病。因此,食源性致病菌引起的食物中毒和食源性疾病已成为中国食品安全面临的首要问题。
[0003]食源性致病菌有几十种,其中沙门氏菌是最常见的食源性致病菌,沙门氏菌所引起的疾病,主要由食用遭受污染的食物导致,是许多国家食物中毒的重要病源。鉴于沙门氏菌造成的问题,亟需快速检测方法的开发。生物传感器作为新型的检测手段,具有方便、省时、精度高、设备简单、价廉,易于微型化等优点,并且数据的收集与处理也很简便,亦不会造成污染,可实现现场大通量样品的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于Au/CdS/CdIn2S4的光电化学适配体传感器检测沙门氏菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、制备CdS/CdIn2S4纳米粒子;a.在50mL乙二醇中制备四水合硝酸镉(Cd(NO3)2·
4H2O)和硫代乙酰胺的前驱体溶液,并以1:1的摩尔比例混合,然后使用磁力搅拌器剧烈搅拌40分钟。将获得的均相溶液转移到100mL反应釜中,保持在160℃反应12小时,自然冷却至室温。通过离心收集产物,用去离子水和乙醇洗涤2次以除去残留的有机溶剂和无机盐,然后在70℃下在空气中干燥8小时,研磨后得到CdS粉体。b.在70mL乙二醇中制备Cd(NO3)2·
4H2O,InCl3.4H2O和硫代乙酰胺的前驱体溶液,并以1:2:4的摩尔比例混合,然后加入一定量步骤1a制备的CdS粉末,使用磁力搅拌器剧烈搅拌40分钟。将获得的均相溶液转移到100mL反应釜中,保持在160℃反应12小时,然后自然冷却至室温。通过离心收集产物,用去离子水和乙醇洗涤2次以除去残留的有机溶剂和无机盐,然后在70℃下在空气中干燥8小时,研磨后置于300℃的马弗炉中煅烧2h,随炉自然冷却至室温后再次研磨所得到的产物为CdS/CdIn2S4粉体。步骤2、制备纳米金溶液将98mL去离子水加入双颈烧瓶中,再加入2mL浓度为50mmol/L的HAuCl4溶液使最终HAuCl4溶液的浓度为1mmol/L;将冷凝器、玻璃塞分别连接到双颈烧瓶的两个颈上,在120℃的油浴锅中边搅拌边回流;当溶液开始回流时,取下玻璃塞迅速加入10mL浓度为38.8mmol/L的柠檬酸钠溶液,使溶液颜色在1min内由浅黄色变为酒红色,随后继续回流20min,最后关闭加热源使其在搅拌中冷却至室温,存放4℃冰箱中以备待用;步骤3、制备辣根过氧化物酶(HRP)
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cDNA复合物取5μL 100μmol/L的cDNA,然后将其加入到1mL的5mmol/L PBS缓冲液。继续往该PBS中加入50μL 1mg/mL的HRP,孵育1h,于12000rpm离心分离,去除未结合的HRP,用5mmol/L PBS清洗沉淀,并将清洗过的沉淀重新分散在含有0.1%牛血清白蛋白(BSA)的5mmol/L PBS中,4℃保存,备用。步骤4、构建传感器工作电极a.称取一定量的步骤1b制备的CdS/CdIn2S4样品,加入2mL去离子水配置成一定浓度的CdS/CdIn2S4溶液,常温下磁力搅拌30min,在40℃条件下超声溶解30min,之后在研钵中研磨30min使CdS/CdIn2S4粉体形成均匀的悬浮液,无细小颗粒感;取25μL所述的均匀悬浮液滴涂于FTO电极上,在常温无风处自然干燥,然后300℃条件下煅烧2h,煅烧完毕后样品随炉自然冷却,得到CdS/CdIn2S4/FTO电极;b.将20μL制备好的纳米Au溶液滴涂到CdS/CdIn2S4/FTO电极表面,然后用玻璃棒涂匀,干燥后得到Au/CdS/CdIn2S4/FTO电极;随后将20μL一定浓度的沙门氏菌适配体溶液滴涂到得到的Au/CdS/CdIn2S4/FTO电极表面,在4℃下孵化过夜;适配体与Au NPs通过Au
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S键...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝洪顺,丁超,赵一睿,朱良良,甘寒薇,侯红漫,张公亮,毕景然,闫爽,
申请(专利权)人:大连工业大学,
类型:发明
国别省市:
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