呼吸道病毒的免疫测定方法和检测试剂盒技术

本发明专利技术旨在进行呼吸道病毒的免疫测定方法，其中非特异性反应得到抑制。该目的可以通过用于呼吸道病毒的免疫测定方法来实现，该方法包括：(A)使可能含有呼吸道病毒的生物样品与阴离子表面活性剂接触；(B)使呼吸道病毒与缀合物接触，形成第一复合物；(C)使第一复合物与对呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体接触，形成第二复合物；和(D)测量源自缀合物的信号。和(D)测量源自缀合物的信号。和(D)测量源自缀合物的信号。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】呼吸道病毒的免疫测定方法和检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种检测呼吸道病毒例如流感病毒的免疫测定方法和检测试剂盒。本专利技术还涉及一种用于检测呼吸道病毒例如流感病毒的免疫测定方法中的样品稀释剂。

技术介绍

[0002]感染哺乳动物(例如人类)的呼吸器官的病毒的例子包括RS病毒、冠状病毒、流感病毒、巨细胞病毒和腺病毒。其中，流感是一种流行性呼吸道病毒感染，并且影响人群广泛。流感病毒是一种单链RNA病毒，属于正粘病毒科。根据M1蛋白和NP蛋白的抗原性，流感病毒分为A、B和C三种类型。A型和B型表示流行性盛行(epidemic prevalence)。流感会引起全身症状，例如发烧(通常发烧38℃或更高)、头痛、全身不适、肌肉疼痛和关节疼痛。另外，流感常常并发老年人的肺炎或者婴幼儿的脑病等，有些情况下导致死亡。此外，流感可能会成为大流行病。
[0003]对于呼吸道感染，早期诊断很重要，以便在感染变得严重之前在感染的早期阶段开始治疗。早期诊断对于防止传染给家庭成员和朋友也很重要。有鉴于此，在患者所在地实时进行POCT(即时检测，point
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of
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care testing)，以快速获取对诊断和治疗有用的信息。为了检测POCT中呼吸道感染的致病病毒，广泛开展了使用与呼吸道病毒特异性反应的抗体的免疫测定。然而，在样本中含有诸如细菌、病毒和具有交叉抗原性的蛋白质的污染物的情况下，这种免疫测定法往往伴随着非特异性反应。这是有问题的，因为这种假阳性反应可能会妨碍准确诊断。
[0004]专利文献1公开了，通过使含有流感病毒的样本与特定的非离子表面活性剂接触，可以提高免疫测定中流感M1蛋白的测量灵敏度。然而，当本专利技术人对专利文献1中使用的几种非离子表面活性剂进行测试时，结果是在流感病毒的检测中发生了非特异性反应。
[0005]专利文献2公开了一种用于制备待进行免疫测定的样本悬浮液的培养基组合物，其含有离子表面活性剂。然而，该试验仅用阳离子表面活性剂或两性表面活性剂进行。此外，无法明确确定产生这种效果的因素是否是除离子表面活性剂以外的因素，例如添加的精氨酸量的增加，或离子表面活性剂的添加。
[0006]引用列表
[0007]专利文献
[0008]专利文献1：WO 2015/037635
[0009]专利文献2：JP
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A
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2005
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291783

技术实现思路

[0010]技术问题
[0011]本专利技术的一个目的是提供一种呼吸道病毒的免疫测定方法，该方法抑制非特异性反应。
[0012]问题解决方案
[0013]专利技术人发现，通过使可能含有呼吸道病毒的生物样品与阴离子表面活性剂接触，然后执行抗原抗体反应，即呼吸道病毒与缀合物反应，可以有效抑制非特异性反应，从而完成本专利技术。
[0014]更具体地说，本专利技术如下。
[0015]<1>一种呼吸道病毒的免疫测定方法，该方法包括：
[0016](A)使可能含有呼吸道病毒的生物样品与阴离子表面活性剂接触；
[0017](B)使呼吸道病毒与缀合物接触以形成第一复合物；
[0018](C)使第一复合物与对呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体接触以形成第二复合物；和
[0019](D)测量源自缀合物的信号。
[0020]<2>根据<1>的免疫测定方法，其中呼吸道病毒是流感病毒。
[0021]<3>根据<1>或<2>的免疫测定方法，其使用免疫层析法。
[0022]<4>根据<3>的免疫测定方法，其特征在于，该方法使用具有以下配置的免疫层析测试条：
[0023]一种测试条，包括以下(1)和(2)：
[0024](1)样品垫，含有样品施加区，用于施加可能含有呼吸道病毒的生物样品；和
[0025](2)不溶性膜，含有至少一个检测区，对呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体固定在检测区上；
[0026]其中(1)或(2)包括含有缀合物的缀合物区，并且其中缀合物区设在样品施加区和检测区之间。
[0027]<5>根据<1>至<4>中任一项的免疫测定方法，其中步骤(A)是将生物样品与含有阴离子表面活性剂的样品稀释剂混合的步骤。
[0028]<6>根据<5>的免疫测定方法，其中在含有阴离子表面活性剂的样品稀释剂中的阴离子表面活性剂的浓度为0.1至10质量％。
[0029]<7>根据<1>至<6>中任一项的免疫测定方法，其中生物样品是呼吸道分泌物。
[0030]<8>根据<1>至<7>中任一项的免疫测定方法，其中呼吸道病毒是乙型流感病毒。
[0031]<9>根据<1>至<8>中任一项的免疫测定方法，其中阴离子表面活性剂选自基于磺酸盐的阴离子表面活性剂、基于羧酸盐的阴离子表面活性剂、基于聚氧乙烯烷基醚硫酸钠的阴离子表面活性剂及其组合。
[0032]<10>一种呼吸道病毒检测试剂盒，包括以下(1)和(2)：
[0033](1)使用呼吸道病毒抗体的检测试剂；和
[0034](2)包含阴离子表面活性剂的生物样品稀释剂。
[0035]<11>根据<10>的呼吸道病毒检测试剂盒，其中呼吸道病毒是流感病毒。
[0036]<12>根据<10>或<11>的呼吸道病毒检测试剂盒，包括具有以下配置的免疫层析测试条：
[0037]一种测试条，包括以下(3)和(4)：
[0038](3)样品垫，含有样品施加区，用于施加可能含有呼吸道病毒的生物样品；和
[0039](4)不溶性膜，含有至少一个检测区，对呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体固定在检测区上；
[0040](3)或(4)包括含有缀合物的缀合物区，并且其中缀合物区设在样品施加区和检测区之间。
[0041]<13>根据<10>至<12>中任一项的呼吸道病毒检测试剂盒，其中包含阴离子表面活性剂的样品稀释本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种呼吸道病毒的免疫测定方法，所述方法包括：(A)使可能含有呼吸道病毒的生物样品与阴离子表面活性剂接触；(B)使所述呼吸道病毒与缀合物接触以形成第一复合物；(C)使所述第一复合物与对所述呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体接触以形成第二复合物；和(D)测量源自所述缀合物的信号。2.根据权利要求1所述的免疫测定方法，其中所述呼吸道病毒是流感病毒。3.根据权利要求1或2所述的免疫测定方法，其使用免疫层析法。4.根据权利要求3所述的免疫测定方法，其特征在于，所述方法使用具有以下配置的免疫层析测试条：一种测试条，包括以下(1)和(2)：(1)样品垫，含有样品施加区，用于施加可能含有所述呼吸道病毒的生物样品；和(2)不溶性膜，含有至少一个检测区，对所述呼吸道病毒具有免疫反应性的抗体固定在所述检测区上；其中(1)或(2)包括含有缀合物的缀合物区，并且其中所述缀合物区设在所述样品施加区和所述检测区之间。5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫测定方法，其中所述步骤(A)是将所述生物样品与含有所述阴离子表面活性剂的样品稀释剂混合的步骤。6.根据权利要求5所述的免疫测定方法，其中所述含有阴离子表面活性剂的样品稀释剂中的所述阴离子表面活性剂的浓度为0.1～10质量％。7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫测定方法，其中所述生物样品是呼吸道分泌物。8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫测定方法，其中所述呼吸道病毒是乙型流感病毒。9.根据权利要求1至8中任一项所述的免疫测定方法，其中所述阴离子表面活性剂选自基于磺酸盐的阴离子表面活性剂、基于羧酸盐的阴离子表面活...

【专利技术属性】
技术研发人员：东加奈子，家治翔平，森田元喜，
申请(专利权)人：积水医疗株式会社，
类型：发明
国别省市：