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细胞含有液用保存液和细胞含有液用保存容器制造技术

技术编号:40929196 阅读:2 留言:0更新日期:2024-04-18 14:51
本发明专利技术提供在将细胞含有液与保存液的混合液冷藏保存的情况下能够抑制基因组DNA向细胞外漏出的细胞含有液用保存液。本发明专利技术的细胞含有液用保存液包含甲醛供体化合物(A)和作为无机盐、有机酸或有机盐的化合物(B),所述细胞含有液用保存液的电导率为3ms/cm以上且20ms/cm以下。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及用于保存细胞含有液的保存液。此外,本专利技术涉及具备所述保存液的细胞含有液用保存容器。


技术介绍

1、血液、血浆、血清以及尿等体液中包含游离dna(cell free dna,cfdn a)。已知,与健康人相比,在具有恶性肿瘤的人以及罹患了传染病的人等的体液中,cfdna以高浓度存在。

2、近年,在癌和基因疾病等领域中,正在进行以cfdna为检体的检查等。以cfdna为检体的检查与从患者处采集病变组织而进行的检查相比,对患者的负担更小。

3、此外,在母体血中包含来源于胎儿的游离dna(cell free fetal dna,cff dna)。在出生前遗传学的检查中,也会进行以cffdna为检体的检查。

4、以cfdna为检体的检查如果不是拥有qpcr装置或下一代测序器(next generationsequencer,ngs)等专用装置的专门机关的话是很难实施的。因此,在病院等处采集得到的血液等细胞含有液需要运送到专门机关处,从细胞含有液的采集到分析,需要一定程度的天数。该期间,所述细胞含有液用特定的容器保存。

5、在下述的专利文献1、2中,记载了通过使存在于全血中的细胞,特别是白细胞稳定化,而稳定地回收cfdna的方法。

6、此外,在下述的专利文献3中,公开了一种不包含血清,含有选自羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、和羟乙基甲基纤维素中的至少一种水溶性纤维素类冻结保护物质作为冻结保护物质的动物细胞的玻璃化冻结保存液。在专利文献3中,记载了所述玻璃化冻结保存液优选包含特定的细胞膜透过性冻结保护物质或特定的细胞膜非透过性冻结保护物质。

7、现有技术文献

8、专利文献

9、专利文献1:wo2013/123030a1

10、专利文献2:cn107083382a

11、专利文献3:日本特开2011-111406号公报


技术实现思路

1、专利技术所要解决的技术问题

2、现在,以血液等细胞含有液中包含的cfdna为检体的检查正在被使用。血液等细胞含有液被采集至容纳有保存液的保存容器后,被运送至具有qpcr装置或下一代测序器的专门机关处。送至专门机关途中的输送也有在冻结环境下进行的,但从抑制输送成本的观点以及减少输送中的麻烦的观点出发,优选在冷藏环境下进行。

3、然而,在专利文献1~专利文献3所记载的现有方法中,当细胞含有液在冷藏环境下保存时,基因组dna(gdna)有时会从细胞漏出。例如,在以往的容纳有保存液的保存容器中,在细胞含有液在冷藏环境下保存的情况下,该细胞含有液中所含的细胞发生破坏或死亡,基因组dna有时会从该细胞漏出。

4、在以cfdna为检体的检查中,若基因组dna向细胞外漏出,则对检查结果造成很大影响。

5、本专利技术的目的在于提供在将细胞含有液与保存液的混合液冷藏保存的情况下能够抑制基因组dna向细胞外漏出的细胞含有液用保存液。此外,本专利技术的目的还在于提供具备所述细胞含有液用保存液的细胞含有液用保存容器。

6、解决技术问题的手段

7、根据本专利技术的广泛方面,提供一种细胞含有液用保存液(以下,有时简称为“保存液”),其包含甲醛供体化合物(a)和作为无机盐、有机酸或有机盐的化合物(b),所述细胞含有液用保存液的电导率为3ms/cm以上且20ms/cm以下。

8、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述保存液包含分子量为100以下且在0℃下不冻结的细胞膜透过性化合物(c)。

9、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述细胞膜透过性化合物(c)为多元醇。

10、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述细胞膜透过性化合物(c)为乙二醇、丙二醇、甘油、二甲基亚砜、乙酰胺、1,3-丙二醇或丁二醇。

11、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述保存液包含分子量为300以上的细胞膜非透过性化合物(d)。

12、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述细胞膜非透过性化合物(d)的分子量为1000以上。

13、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述细胞膜非透过性化合物(d)为聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚乙烯醇、多糖类、多糖类的衍生物、糖醇或ficol l。

14、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述甲醛供体化合物(a)为dmdm乙内酰脲或1-羟基甲基-5,5-二甲基乙内酰脲。

15、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述化合物(b)为柠檬酸、柠檬酸盐或氯化钠。

16、在本专利技术的保存液的某特定方面,所述细胞含有液为血液。

17、根据本专利技术的广泛方面,提供一种细胞含有液用保存容器,其为采集给定量的细胞含有液的细胞含有液用保存容器,其中,所述细胞含有液用保存容器具备容器主体和容纳于所述容器主体内的保存液,所述保存液为所述的细胞含有液用保存液。

18、在本专利技术的细胞含有液用保存容器的某特定方面,所述细胞含有液用保存容器具备以下的构成p。

19、构成p:得到相对于生理盐水1l混合有次氯酸钠7.4g的溶液pa,将与待采集至细胞含有液用保存容器中的细胞含有液的给定量等量的所述溶液pa采集至细胞含有液用保存容器中,得到将该溶液pa与所述保存液混合而成的混合液p时,在所述混合液p中,甲醛的含量为100mg/l以上且400mg/l以下。

20、在本专利技术的细胞含有液用保存容器的某特定方面,所述细胞含有液用保存容器具备以下的构成q。

21、构成q:将与待采集至细胞含有液用保存容器中的细胞含有液的给定量等量的生理盐水采集至细胞含有液用保存容器中,得到将该生理盐水与所述保存液混合而成的混合液q时,所述混合液q的渗透压为300mosm/l以上且1100mosm/l以下。

22、在本专利技术的细胞含有液用保存容器的某特定方面,所述保存液包含分子量为100以下且在0℃下不冻结的细胞膜透过性化合物(c),所述细胞含有液用保存容器具备以下的构成r。

23、构成r:将所述给定量的细胞含有液采集至细胞含有液用保存容器中,得到将该细胞含有液与所述保存液混合而成的混合液r时,在所述混合液r中,所述细胞膜透过性化合物(c)的含量为1vol%以上且5vol%以下。

24、在本专利技术的细胞含有液用保存容器的某特定方面,所述保存液包含分子量为300以上的细胞膜非透过性化合物(d),所述细胞含有液用保存容器具备以下的构成s。

25、构成s:将所述给定量的细胞含有液采集至细胞含有液用保存容器中,得到将该细胞含有液与所述保存液混合而成的混合液s时,在所述混合液s中,所述细胞膜非透过性化合物(d)的含量为0.5μmol/l以上且5μmol/l以下。

26、专利技术效果

27、本专利技术的细胞含有液用保存液包含甲醛供体化合物(a)和作为无机盐、有机酸或有机盐的化合物(b),所述细胞含有液用保存液的电导率为3ms/cm以上本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞含有液用保存液,其包含:

2.根据权利要求1所述的细胞含有液用保存液,其包含:

3.根据权利要求2所述的细胞含有液用保存液,其中,

4.根据权利要求2所述的细胞含有液用保存液,其中,

5.根据权利要求1~4中任一项所述的细胞含有液用保存液,其包含:

6.根据权利要求5所述的细胞含有液用保存液,其中,

7.根据权利要求5或6所述的细胞含有液用保存液,其中,

8.根据权利要求1~7中任一项所述的细胞含有液用保存液,其中,

9.根据权利要求1~8中任一项所述的细胞含有液用保存液,其中,

10.根据权利要求1~9中任一项所述的细胞含有液用保存液,其中,

11.一种细胞含有液用保存容器,其为用于采集给定量的细胞含有液的细胞含有液用保存容器,其中,

12.根据权利要求11所述的细胞含有液用保存容器,其中,

13.根据权利要求11或12所述的细胞含有液用保存容器,其中,

14.根据权利要求11~13中任一项所述的细胞含有液用保存容器,其中,

15.根据权利要求11~14中任一项所述的细胞含有液用保存容器,其中,

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种细胞含有液用保存液,其包含:

2.根据权利要求1所述的细胞含有液用保存液,其包含:

3.根据权利要求2所述的细胞含有液用保存液,其中,

4.根据权利要求2所述的细胞含有液用保存液,其中,

5.根据权利要求1~4中任一项所述的细胞含有液用保存液,其包含:

6.根据权利要求5所述的细胞含有液用保存液,其中,

7.根据权利要求5或6所述的细胞含有液用保存液,其中,

8.根据权利要求1~7中任一项所述的细胞含有液用保存液,其中,

9.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:内山嵩也驹井邦哉井上智雅
申请(专利权)人:积水医疗株式会社
类型:发明
国别省市:

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