一种产生抗体的新方法技术

本公开涉及产生与目的抗原特异性结合的抗体或其抗原结合片段的方法，涉及诱导PBMC增殖、B细胞活化和分化、B细胞成熟和/或促进在产生抗体的PBMC中的类别转换以产生IgG的方法，涉及用于体外免疫的组合物以及鉴定用于体外免疫的抗体增强因子的方法。免疫的抗体增强因子的方法。免疫的抗体增强因子的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种产生抗体的新方法
专利

[0001]本公开总体上涉及生产抗体的新方法，特别是体外生产全人抗体的方法。
[0002]背景介绍
[0003]抗体制备方法已被广泛用于实验室和临床。这些方法包括杂交瘤技术，转基因动物模型和体外免疫。传统的杂交瘤技术是一项主流的成熟技术，包括对动物进行免疫、分离淋巴细胞、将淋巴细胞与永生化细胞(如骨髓瘤)融合、进行抗体人源化和亲和力成熟。可以高通量生产抗体，但是它不得不面对诸多缺点，包括成本高、生产周期长、亲和力低、对重链和轻链的可变区不可预测等问题。转基因动物模型是一种相对较新的技术，其对动物进行了基因修饰以通过未知的机制表达人类抗体可变区。近年来，文献提出了不需要对动物进行免疫的体外免疫技术的概念，其制作过程成本低，操作更快更容易，并且抗体可以是完全人源的，而无需人源化的步骤。然而，使用这种方法成功产生抗体的报道却很少。因此，需要继续开发新的有效的体外免疫技以产生全人抗体。

技术实现思路

[0004]本公开提供了一种产生与目的抗原特异性结合的抗体或抗原结合片段的方法，所述方法包括：
[000本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种产生与目的抗原特异性结合的抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括在培养基中混合所述抗原、抗体产生细胞组合物(AGC)和抗体增强组合物以形成混合物，培养所述混合物，从所述混合物中获得抗体，其中所述AGC包含至少一种B细胞和至少一种其他类型的源自外周血单核细胞(PBMC)的细胞，并且所述抗体增强组合物包含一种或多种脂肪组织衍生的分泌蛋白(ADSP)。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体增强组合物还包含IL2和/或IL21。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述脂肪组织衍生的分泌蛋白包括一种或多种细胞因子和/或一种或多种细胞粘附分子。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述细胞因子包括一种或多种白介素和/或一种或多种趋化因子。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述白介素选自IL
‑
1β、IL1f9、IL10、IL27、IL33和IL18BP。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述趋化因子包含一种或多种选自CCL4、CCL8、CCL6、CCL9和CCL11的CC趋化因子，或一种或多种选自CXCL2、CXCL5、CXCL16、CXCL9和CXCL13的CXC趋化因子。7.根据权利要求3或4所述的方法，其中所述细胞因子选自IL
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1β、CCL8和CXCL5。8.根据权利要求3所述的方法，其中所述细胞粘附分子选自ICAM1、CSF3r、Itgam、Siglecf、Adam8、Chl、Sirpa、Nrcam、Emilin2、Emilin1、Tubb6和/或Parvb。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中，所述ADSP衍生自脂肪组织。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述AGC包含至少一种B细胞和至少一种T滤泡辅助细胞。11.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述AGC包含至少一种B细胞和至少一种树突细胞。12.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述AGC包含至少一种B细胞、至少一种T滤泡辅助细胞和至少一种树突细胞。13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述AGC还包含至少一种脂肪细胞。14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述AGC包含PBMC。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述PBMC分离自血液样品，所述血液样品源自人造血干细胞(HSC)、源自诱导多能干细胞(iPSC)或源自脐带血。16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述增强抗体的组合物还包含共刺激剂、toll样受体(TLR)激动剂、CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)、抗凋亡蛋白、TNF、干扰素(INF)、脂质、avasimid、EFNB1、EPHB4、从蛋白B2、轴突导向蛋白4C、BLIMP
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1、IRF4或其任何组合。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述共刺激物包括CD40、CD40L、ICOSL、ICOS、APRIL、TNF家族的B细胞活化因子(BAFF)、OX40和/或OX40L。18.根据权利要求16所述的方法，其中所述CpG ODN包括CpG2006和/或D/KCpG。19.根据权利要求16所述的方法，其中所述抗凋亡蛋白包括Bcl
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2、Bcl
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6、Bcl
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XL、Bcl
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w、Mcl
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1和/或其类似物。20.根据权利要求16所述的方法，其中所述TLR激动剂包括TLR1激动剂、TLR2激动剂、TLR3激动剂、TLR4激动剂、TLR5激动剂、TLR6激动剂、TLR7激动剂、TLR8激动剂、TLR7/8激动剂和/或TLR9激动剂。21.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述脂肪组织衍生的分泌蛋白增强经由AGC的抗体产生、增强AGC中的B细胞的活化和分化和/或增强AGC中的B细胞的成熟。22.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其进一步包括分离所述混合物中产生的抗体。23.根据权利要求22所述的方法，其进一步包括获得编码所述抗体的可变区的核酸序列。24.根据权利要求23所述的方法，其进一步包括在适于表达所述抗体或其抗原结合片段的条件下将所述核酸序列引入宿主细胞。25.根据前述权利要求中任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁白，姚虹洋，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：