一株不依赖抗生素并能高效生产γ-氨基丁酸的谷氨酸棒杆菌的构建制造技术

本发明专利技术公开了一株不依赖抗生素并能高效生产γ

【技术实现步骤摘要】
一株不依赖抗生素并能高效生产
γ
‑
氨基丁酸的谷氨酸棒杆菌的构建


[0001]本专利技术涉及一株不依赖抗生素并能高效生产γ
‑
氨基丁酸的谷氨酸棒杆菌的构建，属于基因工程和微生物发酵


技术介绍

[0002]γ
‑
氨基丁酸(GABA)是一种重要的天然非蛋白质氨基酸，分子式C4H9NO2，分子量103.1，广泛存在于动物、植物及微生物中。
[0003]在动物体内，GABA是一种重要的抑制性神经递质，对神经元的兴奋程度有着重要的影响；在植物体内，与植物的抗逆性及抗真菌感染有重要关系；在某些微生物如大肠杆菌细胞内，GABA支链途径是微生物重要的耐酸机制之一。
[0004]欧洲食品安全局(EFSA)、美国食品药品监督管理局(FDA)和中国卫生部等均已批准GABA的商品化使用。目前GABA被广泛应用于功能性食品添加剂、保健品、饲料添加剂、药物及临床研究中。
[0005]GABA的生产方法主要有化学合成法、酶或全细胞转化法及微生物发酵法。化学合成法生产的GABA一般本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述谷氨酸棒杆菌表达了来源于Lactobacillusbrevis的谷氨酸脱羧酶基因gadB2、来源于E.coli W3110谷氨酸脱氢酶基因gdhA和/或来源于E.coli W3110的柠檬酸合酶基因gltA，敲除了基因gabP、lldD、aldB2、eutD、poxB、gabP、ldh、pknG和基因簇gabTD中的一个或多个基因，并且强化表达了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc和/或谷氨酰胺合成酶glnA2。2.根据权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc的启动子替换为P
tac
或P
tacM
启动子；利用P
tac
启动子启动所述基因glnA2表达。3.根据权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，将来源于E.coli W3110的柠檬酸合酶基因gltA插入ppc下游，利用P
tac
或P
tacM
启动子表达gltA。4.根据权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，将来源于E.coli W3110的gdhA和来源于Lactobacillusbrevis的谷氨酸脱羧酶基因gadB2插入谷氨酸棒杆菌ATCC 13032基因组中，所述基因gdhA和gadB2的拷贝数为2:3。5.根据权利要求1～4任一所述重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述基因gabP、lldD、aldB2、eutD、poxB、ldh、pknG、gabTD、ppc、glnA2的核苷酸序列分别如GenBank：NC_003450.2的第504325～505572位、第3119621～3120883位、第2980179～2981699位、第29...

【专利技术属性】
技术研发人员：王小元，姚城镇，胡晓清，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：