特定空间结构多肽及其在制备iPSC中的应用制造技术

技术编号:30534147 阅读:27 留言:0更新日期:2021-10-30 13:08
本发明专利技术提供了特定空间结构多肽及其在制备iPSC中的应用,本发明专利技术的特定空间结构多肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1

【技术实现步骤摘要】
特定空间结构多肽及其在制备iPSC中的应用


[0001]本专利技术涉及细胞工程领域,尤其是涉及特定空间结构多肽及其在制备iPSC中的应用。

技术介绍

[0002]干细胞是一类能够通过细胞有丝分裂进行自我更新的细胞,并且能够在特定条件下分化为各种特化细胞。干细胞的这种自我更新能力是器官和组织发育所需的细胞分化和特化的基础。最近的证据显示干细胞可用于组织重建并且使生理功能和组织功能恢复。因此,干细胞具有用于治疗多种疾病和损伤(包括神经系统创伤,恶性肿瘤,遗传性疾病,血红蛋白病和免疫缺陷)的潜力。干细胞移植疗法是再生医学研究的一个重要方向,干细胞移植可被用来治疗心脏损伤,神经系统退行性疾病,脊髓损伤,肾衰竭、血液系统疾病等等。然而,干细胞移植疗法面临着异体排斥、细胞来源有限等很多难以解决的问题。
[0003]诱导性多能干细胞(iPSC,induced pluripotent stem cell)是一种类似于胚胎干细胞且具有发育全能性的细胞,通过将特定的基因导入体细胞,能够诱导体细胞重编程而获得干细胞特性。
[0004]2006年,日本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特定空间结构多肽,其特征在于,所述多肽具有下列氨基酸序列至少之一:1)SEQ ID NO.1

5中至少之一所示的氨基酸序列;2)SEQ ID NO.1

5中至少之一所示的氨基酸序列的一部分;3)与(1和(2)中所示氨基酸序列具有至少80%,优选至少90%,更优选至少95%,进一步优选至少99%序列同一性的氨基酸序列。2.一种融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包含权利要求1所述的多肽与其他多肽,所述其他多肽连接于权利要求1所述的多肽的C端;优选地,所述其他多肽与所述多肽通过GS linker连接;优选地,GS linker包括(GS)n、(GGS)n、(GGGS)n、(GGGGS)n,其中,n为自然数;优选地,所述其他多肽包含促进蛋白转录表达的多肽;优选地,所述其他多肽是VP32;优选地,所述VP32的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。3.一种核酸分子,其特征在于,所述核酸分子包含第一核酸分子,所述第一核酸分子具有下列核苷酸序列至少之一:1)SEQ ID NO.1

5中至少之一所示的核苷酸序列;2)SEQ ID NO.1

5中至少之一所示的核苷酸序列的一部分;3)与(1和(2)中所示核苷酸序列具有至少80%,优选至少90%,更优选至少95%,进一步优选至少99%序列同一性的核苷酸序列。优选地,所述第一核酸分子具有下列核苷酸序列至少之一:1)SEQ ID NO.6

10中至少之一所示的核苷酸序列;2)SEQ ID NO.6

10中至少之一所示的核苷酸序列的一部分;3)与(1和(2)中所示核苷酸序列具有至少80%,优选至少90%,更优选至少95%,进一步优选至少99%序列同一性的核苷酸序列;4)与在严格杂交条件下与SEQ ID NO.6

10中至少之一所示的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;优选地,所述核酸分子还包含第二核酸分子,所述第二核酸分子编码权利要求2中所述的其他多肽;优选地,所述其他多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。4.一种构建体,其特征在于,所述构建体包含权利要求3所述的核酸分子;优选地,所述构建体还包括与权利要求3所述的核酸分子可操作性连接的调控元件;优选地,所述调控元件包括启动子、增强子;优选地,所述启动子是EF1α启动子;优选地,所述构建体包括质粒、噬菌体、人工染色体、粘粒、病毒中的一种或多种;优选地,所述构建体是质粒;优选地,所述质粒是pEF1α质粒。5.一种诱导体细胞产生诱导性多能干细胞的产品,其特征在于,所述产品包括以下至少一种:1)权利要求1所述的多肽;2)权利要求2所述的融合蛋白;3)权利要求2所述的核酸分子;4)权利要求3所述的构建体;优选地,所述产品包括组合物、试剂盒;优选地,所述组合物或所述试剂盒还包括药学上可接受的载体;优选地,所述组合物还包括其他重编程因子、其他重编程因子构建的融合蛋白、其他重
编程因子的编码核酸分子、表达其他重编程因子的构建体;优选地,其他重编程因子包括现有技术中已经公开的重编程因子,其他重编程因子的实例但不限于:Oct 3/4、Sox2、Sox1、Sox3、Sox15、Sox18、Klf1、Klf2、Klf4、Klf5、c

myc、L

myc、N

myc、NANOG、LIN28、RARg、Lrh

1、P53、ECAT1、UTF1、ESRRB、HESRG、CDH1、TDGF1、DPPA4、DNMT3B、ZIC3、L1TD1。6.一种经工程改造过的细胞或其群体,其特征在于,所述经工程改造过的细胞或其群体表达权利要求1所述的多肽或权利要求2所述的融合蛋白;优选地,所述经工程改造过的细胞或其群体包含权利要求3所述的核酸分子或权利要求4所述的构建体;优选地,所述经工程改造过的细胞或其群体不包含权利要求3所述的核酸分子或权利要求4所述的构建体。7.一种制备权利要求6所述的经工程改造过的细胞或其群体的方法,其特征在于,所述方法包括向细胞导入权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的融合蛋白、权利要求3所述的核酸分子、权利要求4所述的构建体中的一种或多种。8.一种诱导体细胞产生诱导性多能干细胞的方法,其特征在于,所述方法包括向体细胞导入权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的融合蛋白、权利要求3所述的核酸分子、权利要求4所述的构建体中的一种或多种;优选地,所述方法包括以下步骤:1)向体细胞导入权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:尹乐顾雨春
申请(专利权)人:呈诺再生医学科技珠海横琴新区有限公司
类型:发明
国别省市:

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