利用银纳米裂隙壳的阿尔茨海默病诊断方法技术

本发明专利技术涉及一种能够以高灵敏度多重检测多个阿尔茨海默病靶标生物标志物并以非侵入式早期诊断阿尔茨海默病的利用银纳米裂隙壳的阿尔茨海默病诊断方法。的阿尔茨海默病诊断方法。的阿尔茨海默病诊断方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用银纳米裂隙壳的阿尔茨海默病诊断方法


[0001]本专利技术涉及利用银纳米裂隙壳(Ag Nanogapshell：AgNGS)的阿尔茨海默病诊断方法。更具体而言，本专利技术涉及利用基于银纳米裂隙壳的SERS免疫测量法的阿尔茨海默病诊断方法，涉及一种可以以高灵敏度多重检测多个阿尔茨海默病靶标生物标志物并以非侵入方式早期诊断阿尔茨海默的诊断方法。

技术介绍

[0002]临床上的阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease：AD)诊断依赖于PET等脑影像成像技法、问诊、脑脊液中存在的Aβ40、Aβ42等酶联免疫吸附检查(Enzyme
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linked immunosorbent assay：ELISA)。最近，为了AD诊断的准确度及早期诊断，正在开发基于多样纳米技术的诊断法。特别是基于SERS的诊断法，在灵敏度及多重检测方面受到相当关注，但根据以往技术开发的基于SERS的诊断法存在局限于对单一靶标的检测且灵敏度也相当低的问题。因此，正在继续进行旨在开发能够以高灵敏度检测血液内的多种靶标生物标志物的基于SERS的AD诊断法的研究。
[0003]以往的方法需要昂贵的装备，并由于侵入式的脑脊液采样而伴随着患者的痛苦。另外，由于无法追踪疾病的进展程度，存在只有症状在相当程度上进展后才能诊断的致命问题。另外，为了追踪复杂机制的AD发病及进展程度，同时追踪相关多种生物标志物的技术是提高疾病诊断准确度及早期诊断可能性所必需的，但以往技术存在仅仅追踪单一生物标志物的界限。而且，为了早期诊断，要求通过非侵入式或最小侵入式方法而从血液等患者样本中检测多种生物标志物的技术，但在血液样本中存在pg/mL水平的极少量的AD靶标生物标志物，因而需要用于对此进行检测的非常灵敏的诊断技术，但诸如ELISA的以往技术存在无法达到相应灵敏度的问题。因此，依然要求用于以高灵敏度进行非侵入式多重检测及早期诊断AD的技术。

技术实现思路

[0004]技术问题
[0005]本专利技术要实现的技术课题旨在解决前述问题，提供一种能够同时检测用于阿尔茨海默病诊断的多个生物标志物的包含银纳米裂隙壳的阿尔茨海默病诊断用组合物。
[0006]另外，本专利技术的另一目的提供一种利用所述诊断用组合物的阿尔茨海默病诊断方法和鉴别并诊断阿尔茨海默病及轻度认知障碍的方法。
[0007]但是，本专利技术要实现的课题不限于以上提及的课题，未提及的其他课题是相应
的普通技术人员可以从以下记载理解的。
[0008]技术方案
[0009]为了解决所述课题，本专利技术提供一种包含银纳米裂隙壳作为有效成分的阿尔茨海默病诊断用组合物，其中，所述银纳米裂隙壳导入了选自由对淀粉样蛋白β(Amyloid beta：Aβ)40的特异性抗体及对Aβ42的特异性抗体构成的组的1种以上抗体。
[0010]另外，本专利技术提供一种包括导入了对Aβ40或Aβ42的特异性抗体的银纳米裂隙壳及固定有所述银纳米裂隙壳的基板的阿尔茨海默病诊断用生物传感器。
[0011]作为本专利技术的一个体现例，所述基板可以包括磁珠，利用磁珠而固定银纳米裂隙壳。
[0012]另外，本专利技术提供一种阿尔茨海默病诊断方法和用于阿尔茨海默病诊断的信息提供方法，包括：
[0013](1)将对淀粉样蛋白β(Amyloid beta：Aβ)40的特异性抗体接合于银纳米裂隙壳(AgNGS)的表面而制备AgNGS
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Aβ40的步骤；(2)将对Aβ42的特异性抗体接合于AgNGS的表面而制备AgNGS
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Aβ42的步骤；(3)将所述AgNGS
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Aβ40及AgNGS
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Aβ42和生物学样本在生物体外混合而诱导基于银纳米裂隙壳的夹层复合体(AgNGS
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based Sandwich complex)形成的步骤；(4)在所述样本中测量各复合体的拉曼信号并计算Aβ40与Aβ42之比的步骤；及(5)当所述Aβ40与Aβ42之比为2.5至999时判定为阿尔茨海默病的步骤。
[0014]作为本专利技术的一个体现例，所述生物学样本可以为血液或血清，优选地，可以为血清。
[0015]另外，本专利技术提供包含导入对Aβ40的特异性抗体的银纳米裂隙壳(AgNGS
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Aβ40)及导入对Aβ42的特异性抗体的银纳米裂隙壳(AgNGS
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Aβ42)作为有效成分的阿尔茨海默病与轻度认知障碍鉴别诊断用组合物。
[0016]另外，本专利技术提供一种在基板上固定有所述AgNGS
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Aβ40和AgNGS
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Aβ42的阿尔茨海默病与轻度认知障碍鉴别诊断用生物传感器。
[0017]另外，本专利技术提供一种包括下述步骤的鉴别并诊断阿尔茨海默病与轻度认知障碍的方法及用于鉴别诊断的信息提供方法：
[0018]一种用于阿尔茨海默病与轻度认知障碍的鉴别诊断的信息提供方法，包括：
[0019](1)将对淀粉样蛋白β(Amyloid beta：Aβ)40的特异性抗体接合于银纳米裂隙壳(AgNGS)的表面而制备AgNGS
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Aβ40的步骤；(2)将对Aβ42的特异性抗体接合于AgNGS的表面而制备AgNGS
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Aβ42的步骤；(3)将所述AgNGS
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Aβ40及AgNGS
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Aβ42和生物学样本在生物体外混合而诱导基于银纳米裂隙壳的夹层复合体(AgNGS
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based Sandwich complex)形成的步骤；(4)在所述样本中测量各复合体的拉曼信号并计算Aβ40与Aβ42之比的步骤；及(5)为
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999至1.1时，区分为正常人，为1.1至2.5时，区分为轻度认知障碍，为2.5至999时，区分为阿尔茨海默病的步骤。
[0020]另外，本专利技术提供一种用于阿尔茨海默病与轻度认知障碍的鉴别诊断的AgNGS
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Aβ40及AgNGS
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Aβ42的用途。
[0021]技术效果
[0022]根据本专利技术的利用银纳米裂隙壳的阿尔茨海默病诊断方法，可以利用极强地显示出标志物固有的特异性表面增强拉曼散射(Surface
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enhanced Raman scattering：SERS)信号的AgNGS纳米探针和磁珠，以免疫测量法同时检测2种淀粉样肽(Aβ40、Aβ42)。
[0023]特别是基于AgNGS的SERS免疫测量法针对Aβ40、Aβ42，可实现不足1pg/mL的超高灵敏度检测，对各靶标特异性地进行反应，因而具有可以无干扰地同时检测多个靶标生物标志物的优点。
[0024]而且，根据本专利技术，即使在复杂环境的人血清条件下，也以高灵敏度多重检测Aβ
40、Aβ42，从而具有基于血液的AD非侵入早期诊断可能性，这具有除AD以外，还可应用于要求高灵敏度及多重检测能力的多种疾病诊断与本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含银纳米裂隙壳作为有效成分的阿尔茨海默病诊断用组合物，其中，所述银纳米裂隙壳导入了选自由对淀粉样蛋白β40的特异性抗体及对Aβ42的特异性抗体构成的组的1种以上抗体。2.根据权利要求1所述的阿尔茨海默病诊断用组合物，其特征在于，所述银纳米裂隙壳由二氧化硅颗粒及完全包裹所述二氧化硅颗粒并具有形成多个裂隙的表面的金属层构成，所述金属层包含银，在所述银裂隙内导入拉曼标记，所述抗体导入到所述金属层表面。3.一种用于阿尔茨海默病诊断的信息提供方法，包括：(1)将对淀粉样蛋白β40的特异性抗体接合于银纳米裂隙壳的表面而制备AgNGS
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Aβ40的步骤；(2)将对Aβ42的特异性抗体接合于AgNGS的表面而制备AgNGS
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Aβ42的步骤；(3)将所述AgNGS
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Aβ40及AgNGS
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Aβ42和生物学样本在生物体外混合而诱导基于银纳米裂隙壳的夹层复合体形成的步骤；(4)在所述样本中测量各复合体的拉曼信号并计算Aβ40与Aβ42之比的步骤；及(5)当所述Aβ40与Aβ42之比为2.5至999时判定为阿尔茨海默病的步骤。4.根据权利要求3所述的用于阿尔茨海默病诊断的信息提供方法，其特征在于，所述生物学样本是选自由血液及血清构成的组的1种以上的非侵入性样本。5.一种阿尔茨海默病诊断方法，包括：(1)将对淀粉样蛋白β40的特异性抗体接合于银纳米裂隙壳的表面而制备AgNGS
‑
Aβ40的步骤；(2)将对Aβ42的特异性抗体接合于AgNGS的表面而制备AgNGS
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Aβ42的步骤；(3)将所述AgNGS
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Aβ40及AgNGS
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Aβ42和生物学样本在生物体外混合而诱导基于银纳米裂隙壳的夹层复合体形成的步骤；(4)在所述样本中测量各复合体的拉曼信号并计算Aβ40与Aβ42之比的步骤；及(5)当所述Aβ40与Aβ42之比为2.5至999时诊断为阿尔茨海默病的步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：金悰浩，梁眞京，黄仁俊，金慧仁，
申请(专利权)人：汉阳大学校ERICA产学协力团，
类型：发明
国别省市：