一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用技术

本发明专利技术提出了一种从头合成黄烷酮的高活性三功能酶，将4

【技术实现步骤摘要】
一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用，分类号为C12P，属于生物医药


技术介绍

[0002]黄酮类化合物一般是指基本母核为2
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苯基色原酮的一大类天然小分子植物次生代谢产物，现在泛指两个苯环通过中央三碳链相互连接形成具有C6
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C3
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C6主体结构的一系列化合物。根据中央C环的差异，一般将黄酮类化合物分为黄烷醇、黄酮、黄酮醇、黄烷酮、花青素和异黄酮等六个亚类。这些化合物具有多种生物学和药理学活性，是当前生物医药领域的热点之一，在医药、食品、化妆品等行业具有广泛的应用开发前景。其中，黄烷酮化合物由于具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗高血压、抗血小板凝集等有利于人类健康的重要活性而受到广泛关注。
[0003]黄烷酮在自然界分布非常广泛，由于其显著的药理生理活性及其独特的可塑性结构，一般作为形成黄酮类化合物各个主要亚类的骨架，在研究黄酮类化合物的生物合成途径中具有重要作用。制备黄烷酮的主要方法一般可以分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从头合成黄烷酮的三功能酶，其特征在于：所述三功能酶的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示。2.一种从头合成黄烷酮的三功能酶的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、从大豆中克隆4
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香豆酰辅酶A连接酶基因4CL1和查尔酮异构酶基因CHI、从高粱中克隆查尔酮合酶基因CHS至原核表达载体pET
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32a
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SUMO，构建重组质粒pET
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32a
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SUMO
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4CL1
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(GGGGS)2‑
CHS2
‑
(GGGGS)2‑
CHI；步骤2、将重组质粒pET
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32a
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SUMO
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4CL1
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(GGGGS)2‑
CHS2
‑
(GGGGS)2‑
CHI转化大肠杆菌表达株,经IPTG诱导、表达，纯化得到重组酶蛋白。3.根据权利要求2所述一种从头合成黄烷酮的三功能酶的合成方法，其特征在于，所述步骤1中，克隆4CL1基因时，设计一对PCR引物：正向引物为5
’‑
GAACAGATTGGTGGTGGATCCATGGCACCTTCTCCACAA
‑3’
；反向引物为5
’‑
CGACCCACCTCCGCCCGACCCACCTCCGCCACTAGTATTGGCCACCACCAAACC
‑3’
；克隆CHS2基因时，设计一对PCR引物：正向引物为5
’‑
GGCGGAGGTGGGTCGGCTAGCATGGCCGGCGCGACTGTG
‑3’
；反向引物为5
’‑
ACTGCCCCCGCCACCCGATCCCCCGCCACCGGATCC...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新跃，何妍之，聂也森，张智萍，丁笠，陈磊，廖凯，赵晨宏，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：