一种蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法和应用，属于有机磷降解酶技术领域；蚕丝素固定化有机磷降解酶包括以下步骤：S1、选择原料：S2、制备再生蚕丝蛋白溶液；S3、制备蚕丝素固定化有机磷降解酶。本发明专利技术以无交联剂固定化包埋技术为手段，向再生蚕丝蛋白（RSF）溶液中加入有机磷降解酶（OPH），室温下混合，反应液经冷冻干燥制成OPH/RSF固定化酶；本发明专利技术的制备方法操作简单，反应条件温和、反应性强、热安全性好，无需使用交联剂，后处理简单，降低了生产成本，提高了酶载量，增加了酶活回收率，能够用于有机磷化合物的降解，同时采用天然蛋白材料，降低了固定载体材料对环境的二次污染。二次污染。二次污染。

【技术实现步骤摘要】
一种蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及降解酶
，具体是一种蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法和应用。

技术介绍

[0002]有机磷降解酶又称磷酸三酯酶，可降解有机磷分子，破坏有机磷化合物分子和一些军用神经毒剂如沙林的磷酯键而使其脱毒。有机磷降解酶广泛存在于微生物、乌贼、原生生物、新鲜蚌类和许多哺乳动物体内。1946年，Mazur等人首次报道发现，此类酶存在于动物组织中，可以降解乙酰胆碱酶抑制剂二异丙基磷酰氯。有机磷降解酶种类繁多，分为水解酶、脱脂酶等，其中有机磷水解酶（OPH）是研究得最广泛的一类降解酶。OPH是一种有机磷化合物作为底物的酶，可以高效水解有机磷化合物中的P
‑
O、P
‑
S、P
‑
F和P
‑
CN键，且水解后的产物是无毒的。然而，OPH的活性受环境影响较大，特别是在高温、有机溶剂、去污剂等条件下其活性显著降低乃至失活，这在很大程度使其应用受到了一定的限制。
[0003]蚕丝素蛋白具有超微、多级结构，无毒、无刺激性、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、选择原料：以天然蚕丝为原料；S2、制备再生蚕丝蛋白溶液；S3、制备蚕丝素固定化有机磷降解酶：以无交联剂固定化包埋技术为手段，向再生蚕丝蛋白溶液中加入有机磷降解酶，混合搅拌，反应液经冷冻干燥制成蚕丝素固定化有机磷降解酶。2.根据权利要求1所述的蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法，其特征在于，所述S2中制备再生蚕丝蛋白溶液包括以下步骤：（1）脱胶：称取一定量的蚕丝素样品置于碳酸钠溶液中煮沸，重复3次以上，用去离子水清洗，烘干，得脱胶蚕丝；（2）盐溶：将脱胶蚕丝溶于氯化钙乙醇溶液中；（3）透析：用透析袋对蚕丝蛋白溶液进行透析，去除水分，制备蚕丝蛋白粉末；（4）配制10%的再生蚕丝蛋白溶液：将蚕丝蛋白粉末溶于溶剂中得到10%的再生蚕丝蛋白溶液。3.根据权利要求2所述的蚕丝素固定化有机磷降解酶的制备方法，其特征在于，所述（1）中碳酸钠的质量分数为5%，煮沸时间为30min；去离子水温度为50
‑
65℃；所述（2）中氯化钙乙醇溶液为氯化钙、乙醇和水以摩尔比1:8:2混合得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪波，徐冬，于艳杰，王金玉，刘昌财，
申请(专利权)人：中国人民解放军六一六九九部队，
类型：发明
国别省市：