常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法技术

本发明专利技术公开了毛细管领域的常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，所述将液相色谱填料匀浆后，在常压下利用装填设备将填料装入毛细管中，然后将装有填料的毛细管柱一端用硅橡胶封住，在毛细管色谱柱的另一端用加热拉制喷针，从而形成一体柱，最后将该一体柱连接到色谱仪，利用高压泵将填料床层压实，截掉毛细管柱的空管部分，完成色谱柱的制备。将色谱填料做成匀浆，匀浆剂与色谱填料的质量比为1:1

【技术实现步骤摘要】
常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法


[0001]本专利技术涉及毛细管领域，具体是常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法。

技术介绍

[0002]液相色谱
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质谱联用技术已经成为蛋白质组、脂质组、多肽组样品分析的最常使用的工具。大多数实验室采用自己装填的毛细管色谱柱，装填方法有电动填充法，气压匀浆填充法和液压匀浆填充法。
[0003]而气压法则主要利用高压氮气瓶提供压力，将匀浆好的填料通过气压直接压入拉好喷针的毛细管柱，但是该方法不适用于长度超过20cm色谱柱的填充，液压法则利用高压泵将匀浆好的填料压入拉好喷针的毛细管柱中。该方法需要昂贵的设备，同样难以装填超过50cm的长毛细管色谱柱。因此，本领域技术人员提供了常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：所述将液相色谱填料匀浆后，在常压下利用装填设备将填料装入毛细管中，然后将装有填料的毛细管柱一端用硅橡胶封住，在毛细管色谱柱的另一端用加热拉制喷针，从而形成一体柱，最后将该一体柱连接到色谱仪，利用高压泵将填料床层压实，截掉毛细管柱的空管部分，完成色谱柱的制备。
[0006]作为本专利技术进一步的方案：所述匀浆剂为甲醇、丙酮、乙醇、异丙醇或氯仿，色谱填料为1.7
‑
10 μm粒径的C18、C8、C4反相色谱填料以及氨基、羟基的亲水色谱填料，匀浆剂和填料的质量比为1:1
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10:1（w/w）。
[0007]作为本专利技术再进一步的方案：所述毛细管外径为360
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380 μm，内径为50 μm、75 μm、100 μm、150 μm、200 μm和250 μm内径的石英毛细管。
[0008]作为本专利技术再进一步的方案：所述装填设备有两个部分组成，色谱进样针、二通接头、连接头和套管，通过二通接头将毛细管和进样器连接起来，色谱进样针吸取匀浆好的色谱填料通过这一装置注射到毛细管柱中。
[0009]作为本专利技术再进一步的方案：所述加热方法为激光加热拉制或火焰加热拉制，加热的位置为毛细管未封口一端距出口5
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10cm处。
[0010]作为本专利技术再进一步的方案：所述高压泵将色谱填料装入毛细管柱后，将毛细管柱连接到色谱仪系统，利用色谱仪的高压泵将乙腈、甲醇或水流过色谱柱，使其中的色谱填料流向喷针方向，从而完成色谱填料床层的压实。高压泵压力为10
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100 MPa。
[0011]作为本专利技术再进一步的方案：所述加热利用酒精喷灯或高温喷火枪，利用其外焰
加热毛细管柱，通过拉力将毛细管柱受热部分拉制成喷针；又可以利用激光拉针仪，利用激光进行加热，通过拉力使其形成喷针。
附图说明
[0012]图1为本专利技术的填装毛细管柱示意图；图2为本专利技术的烧结拉制毛细管柱示意图；图3为本专利技术中切割毛细管柱示意图；图4为本专利技术中毛细管色谱柱连续上样3次的总离子流图； 图5为保留时间靠前、居中、靠后三个位置提取的离子色谱峰峰宽示意图。
具体实施方式
[0013]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0014]请参阅图1～4，本专利技术实施例中，常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，将液相色谱填料匀浆后，在常压下利用装填设备将填料装入毛细管中，然后将装有填料的毛细管柱一端用硅橡胶封住，在毛细管色谱柱的另一端用加热拉制喷针，从而形成一体柱，最后将该一体柱连接到色谱仪，利用高压泵将填料床层压实，截掉毛细管柱的空管部分，完成色谱柱的制备。
[0015]其中，匀浆剂为甲醇、丙酮、乙醇、异丙醇或氯仿，色谱填料为1.7
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10 μm粒径的C18、C8、C4反相色谱填料以及氨基、羟基的亲水色谱填料，匀浆剂和填料的质量比为1:1
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10:1（w/w）；毛细管外径为360
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380 μm，内径为50 μm、75 μm、100 μm、150 μm、200 μm和250 μm内径的石英毛细管；装填设备有两个部分组成，色谱进样针、二通接头、连接头和套管，通过二通接头将毛细管和进样器连接起来，色谱进样针吸取匀浆好的色谱填料通过这一装置注射到毛细管柱中；加热方法为激光加热拉制或火焰加热拉制，加热的位置为毛细管未封口一端距出口5
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10cm处；高压泵将色谱填料装入毛细管柱后，将毛细管柱连接到色谱仪系统，利用色谱仪的高压泵将乙腈、甲醇或水流过色谱柱，使其中的色谱填料流向喷针方向，从而完成色谱填料床层的压实。高压泵压力为10
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100 MPa；加热利用酒精喷灯或高温喷火枪，利用其外焰加热毛细管柱，通过拉力将毛细管柱受热部分拉制成喷针；又可以利用激光拉针仪，利用激光进行加热，通过拉力使其形成喷针。
[0016]本专利技术的工作原理是：首先将色谱填料做成匀浆，匀浆剂与色谱填料的质量比为1:1
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10:1。色谱填料为反相色谱填料或亲水填料，匀浆剂为甲醇、乙醇、异丙醇、氯仿等，色谱填料既可以为1.7
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10 μm的C18、C8和C4的反相填料，也可以为氨基、羟基的亲水色谱填料，混合后，用超声法超声3
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5 min后，形成均匀的悬浊液。将色谱填料加入到离心管里，加入匀浆剂，超声使填料形成均匀的悬浊液，将色谱填料匀浆后，用进样针抽取一定量的含有填料的悬浊液，进样针为色谱进样最常用的微量进样器，体积为50
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500 μL。二通接头可以为常用的金属二通也可以为PEEK二通。毛细管为常用的石英毛细管，内径为50
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250 μm，外径为365
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380 μm。毛细管的长度依据实验需要，选择在0.1
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2 m范围内任意长度。填满的毛
细管柱用硅橡胶封住其中一端，另一端不用密封，通过二通接头与毛细管连接。将该悬浊液推入毛细管内，至毛细管内充满含填料的悬浊液。取下毛细管，将毛细管的入口用硅橡胶堵住，并在毛细管出口测5
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10 cm左右处，利用拉针仪或火焰加热拉制形成喷针，形成一体柱，一体柱是在未密封的毛细管一端，在距毛细管出口5
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10cm处加热拉制喷针。拉制好的喷针通常可以直接使用，如果喷针内径过小，可以使用陶瓷刀进行修剪，取下毛细管入口端的硅橡胶塞，连接到色谱仪，利用一定的压力将色谱填料压实，色谱柱压实，则是将拉好喷针的一体柱利用色谱仪的高压泵将填料压实。由于装填过程并未有压力，所以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，其特征在于：所述将液相色谱填料匀浆后，在常压下利用装填设备将填料装入毛细管中，然后将装有填料的毛细管柱一端用硅橡胶封住，在毛细管色谱柱的另一端用加热拉制喷针，从而形成一体柱，最后将该一体柱连接到色谱仪，利用高压泵将填料床层压实，截掉毛细管柱的空管部分，完成色谱柱的制备。2.根据权利要求1所述的常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，其特征在于：所述匀浆剂为甲醇、丙酮、乙醇、异丙醇或氯仿，色谱填料为1.7
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10 μm粒径的C18、C8、C4反相色谱填料以及氨基、羟基的亲水色谱填料，匀浆剂和填料的质量比为1:1
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10:1（w/w）。3.根据权利要求1所述的常压下带喷针的毛细管液相色谱一体柱制备方法，其特征在于：所述毛细管外径为360
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380 μm，内径为50 μm、75 μm、100 μm、150 μm、200 μm和250 μm内径的石英毛细管。4.根据权利要求1所述的常压下带喷针的毛细管液相色谱一体...

【专利技术属性】
技术研发人员：周愿，田璐，吴祥佳，洪聪聪，顾兵，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：