产生固定噬菌体制造技术

噬菌体共价连接到基底，通过(a)将(i)基底与(ii)噬菌体结合，其中在结合之前或在结合过程中，(i)或(ii)或(i)和(ii)两者被激活，并且其中(b)在结合过程中，噬菌体被包含在平均直径为150微米或更小的液滴中。径为150微米或更小的液滴中。径为150微米或更小的液滴中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】产生固定噬菌体


[0001]本专利技术涉及将噬菌体固定在基底如颗粒、细丝和平面表面上的方法和设备以及由此制得的组合物。特别地，本专利技术涉及用于将噬菌体特别是固定在颗粒上的大规模方法。

技术介绍

[0002]近年来，由于对常规抗生素的抗药性持续增长，并且由于环境原因，化学杀菌剂的应用变得越来越不可接受，因此人们已将注意力转向控制细菌污染的替代方法。一种有希望的方法涉及噬菌体的应用。
[0003]从WO 03/093462已知使用化学方法或放电将噬菌体连接到基底，从而产生例如共价连接到颗粒或聚合物条的噬菌体。
[0004]在WO 2007/072049中，将这些方法发展为使用脉冲场电晕放电；由放电激活的颗粒被滴入噬菌体溶液中。类似地，在WO 2012/175749中，将噬菌体溶液与激活种子结合。
[0005]重要的是，以这种方式固定的噬菌体保留了其抗菌效力，并且有利地，赋予了额外的稳定性，从而显著增强了对降解和干燥的抵抗力。
[0006]然而，已知方法存在许多问题。在现有技术中描述的方法中，通过使颗粒通过放电来激活颗粒会导致其过热和/或颗粒对设备的粘附。通常不可能控制每个颗粒的噬菌体数量或在平面或丝状基底上的连接均匀性，这导致不稳定和不一致的结果。另外，在细颗粒(必须以粉末形式处理)的情况下，目前尚无可确保将颗粒(包含细粉末)的表面快速可靠地与噬菌体并置从而进行固定的方法。使用放电产生的自由基的衰减很快，并且现有系统可能无法足够快地将基底和噬菌体聚集在一起，从而无法高效结合。
[0007]在现有技术中，仅批量制造方法是可行的。例如，将材料放置在浅的激活容器中，并从上方进行电晕激活，然后迅速使其与含有要固定的噬菌体的溶液接触。该方法或多或少对于在一个表面上发生固定的片状(平面)材料是可接受的，尽管它对于丝状和颗粒状材料也无效。不言而喻，例如，球形颗粒表面的某些方面可能比另一种具有更多数量的固定噬菌体，而更均匀的分布可能是优选的。在任何横截面的丝状材料中都可以看到类似的效果。
[0008]专利技术目的
[0009]本专利技术的一个目的是提供制备包含共价固定在基底上的噬菌体的组合物的替代方法。优选实施例的目的是提供改进的方法，特别是其中噬菌体更均匀地分布在其所连接的产物上。优选实施例的另一个目的是提供连接有噬菌体的新产物。优选实施例的又一个目的是提供可以连续使用的方法。设计实施该方法的设备是另外的目的。具体实施例的另一个目的是提供将激活的基底和噬菌体快速、连续且大规模地聚集在一起的方法和系统。

技术实现思路

[0010]因此，本专利技术提供了一种将噬菌体共价连接到基底的方法，包括：
[0011]a)在两个电极之间产生等离子体；以及
[0012]b)使流体在所述电极之间流动以使所述等离子体或所述等离子体的一部分移位
到不在所述电极之间的移位区域；以及
[0013]c)(i)在所述基底未通过所述电极之间的情况下将所述基底引入所述移位区域的等离子体中，并将所述基底与所述噬菌体结合，或者(ii)在所述噬菌体未通过所述电极之间的情况下将所述噬菌体引入到所述移位区域中的等离子体中，并将所述噬菌体与所述基底结合。
[0014]用于执行这种方法的本专利技术的设备包括：
[0015]a)第一电极和第二电极以及用于在所述电极之间产生等离子体的等离子体发生器；
[0016]b)第一导管，所述第一导管连接到压力下的流体的供给源，用于在所述电极之间引入流体流，其中，所述流体的流动将所述等离子体或所述等离子体的一部分移位到不在所述电极之间的移位区域；
[0017]c)第二导管，所述第二导管连接到噬菌体或基底的供给源，用于将所述噬菌体或所述基底引入到所述移位区域中而不经过所述电极之间；
[0018]d)腔室，噬菌体和基底在所述腔室内结合以将所述噬菌体共价连接到所述基底。
[0019]本专利技术还提供了一种将噬菌体共价连接到基底的方法，包括：
[0020]a)将(i)基底与(ii)噬菌体结合，其中在所述结合之前或在所述结合过程中，(i)或(ii)或(i)和(ii)两者被激活，并且其中
[0021]b)在所述结合过程中，所述噬菌体被包含在液滴中。
[0022]用于执行这种方法的本专利技术的设备包括：
[0023]a)(i)基底的供给源以及(ii)产生含有噬菌体的液滴的装置；
[0024]b)(i)与液滴激活台结合产生等离子体以使(a)的液滴与所述等离子体接触的等离子体发生器，或(ii)与基底激活台结合产生等离子体以使所述基底与所述等离子体接触的等离子体发生器；以及
[0025]c)腔室，所述基底和所述噬菌体可在所述腔室中在与所述等离子体接触的同时或之后结合在一起，从而在所述噬菌体和所述基底之间形成共价键。
[0026]本专利技术还还提供了一种将不同菌株或类型的两种噬菌体共价连接到单个基底颗粒上的方法，包括：
[0027]a)将所述颗粒与第一噬菌体结合，其中，在所述结合之前或在所述结合过程中，所述颗粒或所述噬菌体或这两者均被激活，从而产生包含与所述第一噬菌体共价连接的颗粒的中间产物；以及
[0028]b)将(a)的中间产物与菌株或类型与所述第一噬菌体不同的第二噬菌体结合，其中，在所述结合之前或在所述结合过程中，将所述中间产物或所述第二噬菌体或这两者激活，从而产生包含与所述第一噬菌体和所述第二噬菌体共价连接的颗粒。
具体实施方式
[0029]本专利技术解决的问题是在被放电激活的同时对基底的损坏或损失。
[0030]因此，本专利技术提供了一种将噬菌体共价连接到基底的方法，包括：
[0031]●
在两个电极之间产生等离子体；
[0032]●
使流体在电极之间流动以使等离子体或等离子体的一部分移位到不在电极之
间的移位区域；
[0033]●
将基底或噬菌体引入移位区域内的等离子体中而不经过电极之间；以及
[0034]●
将噬菌体和基底结合。
[0035]因此，基底或噬菌体不会在形成激活场的带电电极之间通过。可以减少或消除由于在电极之间通过而引起的过度加热效应的风险。此外，可以类似地减少或消除导致例如颗粒与电极融合以及颗粒在电极上熔化的与电极碰撞的风险。过程变得更加高效。
[0036]噬菌体或基底或两者均可被激活。因此，在一种方法中，将基底引入移位区域内的等离子体中以激活基底，然后与噬菌体结合。其他方法包括将噬菌体引入移位区域内的等离子体中以激活噬菌体，以及将激活的噬菌体与基底结合以产产生物，即共价连接到基底的噬菌体。另外的选项是将噬菌体和基底都引入移位区域内的等离子体中以激活两者，以及将激活的基底与激活的噬菌体结合以产产生物。
[0037]基底或噬菌体可进入到电极侧面并与电极相邻的移位区域。流体流量可以使得移位区域与电极间隔开，从而进一步降低了与现有技术方法相关联的加热和碰撞风险。通过改变流体流量，等离子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.将噬菌体共价连接到基底的方法，包括：(a)将(i)基底与(ii)噬菌体结合，其中在所述结合之前或在所述结合过程中，(i)或(ii)或(i)和(ii)两者被激活，并且其中(b)在所述结合过程中，所述噬菌体被包含在液滴中。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述液滴的平均直径为150微米或更小。3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述液滴的平均直径为100微米或更小。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述基底包括平均直径为500微米或更小的颗粒。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述基底包括平均直径为200微米或更小的颗粒。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述液体是水性的。7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述液体是水。8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述液体是非水性的。9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述液体是或包括在大气压和20℃下为气体的化合物，并且其中，所述方法在使所述化合物形成液滴的温度和压力条件下进行。10.根据权利要求9所述的方法，其中，使所述共价连接的噬菌体和基底产物经受使所述化合物蒸发得到干燥产物的改变的温度和/或压力条件。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，用于将噬菌体连接到水敏性基底上。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述基底包括高吸水性树脂。13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括激活所述基底并将激活的基底与所述液滴结合。14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括激活所述液滴并将激活的液滴与所述基底结合。15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括激活基底和液滴两者并将它们结合。16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括结合由预定浓度的噬菌体悬浮液制备的预定大小的液滴，以控制连接到所述基底的噬菌体的数量和/或密度。17.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括将质量中值直径为1
‑
200微米的液滴与质量中值直径为1
‑
200微米的颗粒结合。18.根据权利要求17所述的方法，包括将直径为100微米或更小的液滴与直径为100微米或更小的颗粒结合。19.根据权利要求17或18所述的方法，其中，液滴和颗粒各自的直径之比为1：3至3：1。20.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括激活颗粒和基底两者，其中，使用放电来激活所述颗粒，并且使用带相反电荷的放电来激活所述基底。21.根据权利要求20所述的方法，其中，所述放电是电晕放电。22.根据权利要求21所述的方法，包括使用带负电的电晕放电来激活所述颗粒，并且使用带正电的电晕放电来激活所述液滴。23.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括同时形成并激活所述颗粒。24.用于执行前述权利要求中任一项所述的方法的设备。25.根据权利要求24所述的设备，用于将噬菌体共价连接到基底，包括：
(d)产生含有噬菌体的液滴的装置；(e)(i)与液滴激活台结合产生等离子体以使(a)的液滴与所述等离子体接触的等离子体发生器，或(ii)与基底激活台结合产生等离子体以使所述基底与所述等离子体接触的等离子体发生器；以及(f)腔室，所述基底和所述噬菌体可在所述腔室中在与所述等离子体接触的同时或之后结合在一起，从而在所述噬菌体和所述基底之间形成共价键。26.根据权利要求25所述的设备，适于产生溶剂或溶液的液滴，所述溶剂或溶液在室温和20℃下为包含噬菌体的气体。27.根据权利要求25或26所述的设备，其中，b(ii)的等离子体发生器适于产生等离子体以激活所述基底。28.根据权利要求25或26所述的设备，其中，b(i)的等离子体发生器适于产生等离子体以激活包含噬菌体的液滴。29.根据权利要求25或26所述的设备，其中，将所述等离子体发生器和所述腔室布置成使得所述噬菌体和所述基底结合并与所述等离子体接触，从而在相同的腔室中同时被激活。30.根据权利要求25至29中任一项所述的设备，其中，所述基底包括平均直径为500微米或更小的颗粒。31.将不同菌株或类型的两种噬菌体共价连接到单个基底颗粒上的方法，包括：(c)将所述颗粒与第一噬菌体结合，其中，在所述结合之前或在所述结合过程中，所述颗粒或所述噬菌体或这两者均被激活，从而产生包含与所述第一噬菌体共价连接的颗粒的中间产物；以及(d)将(a)的中间产物与菌株或类型与所述第一噬菌体不同的第二噬...

【专利技术属性】
技术研发人员：马泰，
申请(专利权)人：固定噬菌体有限公司，
类型：发明
国别省市：