一种伯克霍尔德氏菌及其用途制造技术

本发明专利技术提供了一种伯克霍尔德氏菌，于2020年8月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为CCTCC NO：M 2020410，分类命名为Burkholderia sp.M

【技术实现步骤摘要】
一种伯克霍尔德氏菌及其用途


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种伯克霍尔德氏菌及其用途。

技术介绍

[0002]硝基苯酚类化合物（Nitrophenol）常作为医药、农药、染料等合成前体，不仅在光化学品生产过程中得到广泛应用，也可用作生化检测试剂。随着工业的不断发展，环境中来自于有机合成、制造染料、生产炸药以及医药等行业的硝基苯酚类化合物污染也持续增长。
[0003]这类化合物在生产和使用过程中很容易被释放到外界环境中，已成为重要的环境污染物质。硝基苯酚类化合物在环境中稳定且难以降解的原因是硝基的引入，芳香硝基化合物苯环上的H被硝基取代，硝基基团的吸电子特性会使得本就具有高稳定性的苯环电子云密度降得更低，更难受到氧的攻击从而被微生物降解，在环境中长期残留、积累，在生物体内滞留、富集。
[0004]硝基苯酚类化合物对自然和人类产生了巨大的危害，如何处理自然界中残余的此类化合物成为一个重要的问题。目前可用于硝基苯酚污染治理的方法中，物理法主要包括吸附法，但吸附法对吸附材料要求较高；而化学法主要包括氧化法，此种方法能量消耗大且适用范围窄。目前迫切需要找到一种简便高效的降解硝基苯酚类化合物的方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术针对上述问题，提供了一种解决方法，即公开了一种伯克霍尔德氏菌及其用途，该种2,6
‑
二硝基酚降解菌株是以2,6
‑
二硝基酚为唯一碳氮源的菌株，对于水体和土壤中的2,6
‑
二硝基酚污染均有较高的降解效率和浓度耐受限度。
[0006]本专利技术提供了一种菌株：该菌株于2020年8月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为CCTCC NO: M 2020410，分类命名为Burkholderia sp.M
‑
1。
[0007]所述菌株M
‑
1的筛选方法，包括：先将含有硝基苯酚类化合物的土壤或水体在条件适宜的培养基中培养，获得菌落，所述菌落中包含多种菌株；再将所述多种菌株分别培养，通过测定培养基中硝基苯酚类化合物的含量筛选出所述菌株M
‑
1；其中，所述培养基被配置为以硝基苯酚类化合物为唯一碳源的培养基。
[0008]本专利技术还提供了所述菌株M
‑
1用于降解硝基苯酚类化合物的用途。
[0009]经实验验证，菌株M
‑
1在与硝基苯酚类化合物混合培养时，能够脱去硝基苯酚类化合物中的硝基，使得原本因苯环上的H被硝基取代从而难以降解的硝基苯酚类化合物变得易于修复。因此，菌株M
‑
1可以用于降解硝基苯酚类化合物，脱去硝基苯酚类化合物中的硝基基团。
[0010]本专利技术还提供了所述菌株M
‑
1用于降解2,6
‑
二硝基酚的用途。
[0011]经筛选获得的菌株M
‑
1，在以2,6
‑
二硝基酚作为唯一碳源和氮源的无机盐培养基中培养后，能将0.3mM 2,6
‑
二硝基酚完全降解，降解菌株生长的OD
600
值上升。同时，未添加
菌株M
‑
1的对照组中，2,6
‑
二硝基酚浓度没有明显变化。菌株M
‑
1降解2,6
‑
二硝基酚的过程中，检测到亚硝酸根的生成，说明该菌株是通过氧化脱硝基降解2,6
‑
二硝基酚；此外，检测到生成的亚硝酸根是2,6
‑
二硝基酚的2倍，说明菌株M
‑
1能够氧化脱去2,6
‑
二硝基酚的2个硝基。
[0012]使用时将所述菌株M
‑
1与硝基苯酚类化合物在条件适宜的培养基中混合培养，获得降解液；将所述降解液投入到含有硝基苯酚类化合物的土壤或水体中进行降解。
[0013]具体地，先将具有活性的所述菌株M
‑
1接种在体积比为4：1的无机盐和LB液体培养基（培养基包括作为唯一碳氮源的硝基苯酚类化合物）中振荡培养，将菌体离心后经清洗和重悬后获得降解液，并将该降解液加入包括待降解的硝基苯酚类化合物的无机盐培养基中振荡培养并进行降解反应。
[0014]在一些可能的实现方式中，所述硝基苯酚类化合物被配置为2,6
‑
二硝基酚。
[0015]在一些可能的实现方式中，所述菌株M
‑
1降解2,6
‑
二硝基酚的条件为温度25～30℃。
[0016]在一些可能的实现方式中，所述菌株M
‑
1降解2,6
‑
二硝基酚的条件为pH范围为6～8。
[0017]在一些可能的实现方式中，还包括在所述培养基中加入乳酸、葡萄糖或琥珀酸中的一种或多种。
[0018]在一些可能的实现方式中，所述培养基中2,6
‑
二硝基酚的浓度范围为0.1～1.0mM。
[0019]本专利技术具有以下优势：1.本专利技术提供的菌株M
‑
1是已报道的伯克霍尔德氏菌属中第一株能够利用2,6
‑
二硝基酚作为唯一碳氮源和能源生长的细菌，可以快速有效的将2,6
‑
二硝基酚降解为二氧化碳和水，在去除环境中2,6
‑
二硝基酚污染时能够达到完全脱毒；2.本专利技术提供的菌株M
‑
1对于2,6
‑
二硝基酚底物浓度的耐受上限值较高，最高能够降解0.9 mM的污染物，证明本专利技术菌株可以有效地修复污染较为严重的环境；3.本专利技术对提供的菌株M
‑
1的生长及2,6
‑
二硝基酚降解情况进行了优化，可以更有效、充分地对环境中的2,6
‑
二硝基酚进行降解，解决污染问题；4.本专利技术采用微生物方法降解环境中的污染物，具有高效、无二次污染、成本低的优点，尤其在对含有2,6
‑
二硝基酚污染物的治理上具有良好的应用前景。
附图说明
[0020]图1为菌株M
‑
1降解特性的检测结果；图2为菌株M
‑
1降解优化条件的检测结果；图3为菌株M
‑
1的耐受力检测结果。
具体实施方式
[0021]下面将结合附图，对本专利技术实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本专利技术一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本专利技术中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，
都属于本专利技术保护的范围。
[0022]目前，国内外关于降解2,6
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二硝基酚菌种的研究极少，目前只有2株细菌被报道能够降解该污染物。Cupriavidus necator JMP134能够利用2,6
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二硝基酚为唯一碳源、氮源本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种伯克霍尔德氏菌株，已于2020年8月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为CCTCC NO：M 2020410，分类命名为Burkholderia sp.M
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1。2.权利要求1所述菌株用于降解硝基苯酚类化合物的用途。3.权利要求1所述菌株用于降解2,6
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二硝基酚的用途。4.权利要求1所述菌株的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
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将含有硝基苯酚类化合物的土壤或水体在条件适宜的培养基中培养，获得菌落，所述菌落中包含多种菌株；
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将所述多种菌株分别培养，通过测定培养基中硝基苯酚类化合物的含量筛选出所述菌株；其中，所述培养基被配置为以硝基苯酚类化合物为唯一碳源的培养基。5.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于，所述硝基苯酚类化合物被配置为2,6
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：方素云，闵军，彭健，胡晓珂，吕鑫，
申请(专利权)人：中科海洋微生物产业技术研究院山东有限公司，
类型：发明
国别省市：