一种白假丝酵母菌及其在发酵饲料中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种白假丝酵母菌及其在发酵饲料中的应用。该菌株GL1保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.22844。本发明专利技术提供的白假丝酵母菌，是从橄榄果渣中提取的一种白假丝酵母的新型菌株，能够应用于发酵饲料中，通过本发明专利技术中白假丝酵母菌发酵后能使橄榄果渣

【技术实现步骤摘要】
一种白假丝酵母菌及其在发酵饲料中的应用


[0001]本专利技术涉及一种微生物
，具体涉及一种白假丝酵母菌及其在发酵饲料中的应用。

技术介绍

[0002]白假丝酵母是属于半知菌纲(Fungi Imperficti)的球壳目(Xylariaceae)假丝酵母属(Candida)的单细胞酵母。白假丝酵母(Candida albicans)，又称白念珠菌或者白色念珠菌，是单细胞真菌。菌体呈圆形或卵圆形，革兰氏染色阳性，着色不均，以芽生方式繁殖。在组织内易形成芽生孢子及假菌丝，芽生孢子多集中在假菌丝的连接部位，假菌丝中间或顶端常有较大、壁薄的圆形或梨形厚膜孢子，是本菌特征之一。
[0003]白假丝酵母在普通的琼脂、血琼脂与沙保培养基上均生长良好，菌落呈类酵母型。在玉米粉培养基上可长出厚膜孢子。白假丝酵母的假菌丝和厚膜孢子有助于鉴定。
[0004]白假丝酵母属条件致病菌，通常存在于人体表与腔道中，当正常菌群失调或抵抗力降低时，白假丝酵母则可侵犯人体许多部位，如皮肤、粘膜、肺、肠、肾和脑，引起皮肤粘膜感染(常见鹅口疮、外阴炎及阴道炎)、内脏感染和中枢神经系统感染等，粘膜感染以鹅口疮最多。
[0005]现有技术中记载的白假丝酵母是条件致病菌，不具有饲料发酵的应用价值；目前尚没有将白假丝酵母用于制备发酵饲料的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种白假丝酵母菌及其在发酵饲料中的应用。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0008]专利技术提供的白假丝酵母菌(Candida albicans)GL1，该菌株GL1保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.22844。
[0009]白假丝酵母菌(Candida albicans)GL1的分离纯化和鉴定，包括下述步骤：
[0010](1)将橄榄果渣样品10倍系列稀释后，吸取适宜稀释度样液涂布于PDA 培养基平板，26
‑
30℃培养70
‑
74h后，挑取具有酵母菌典型菌落特征的菌落进行多次平板划线纯化，得到初筛菌体，转接种至斜面培养基4℃保存备用；
[0011](2)用无菌生理盐水调整步骤(1)初筛菌体浓度为108CFU/mL，以体积百分比4％
‑
6％的接种量接种至PDB培养基中，26
‑
30℃培养70
‑
74h后，以 8000r/min 4℃离心5min，去除上清液，生理盐水清洗菌体沉淀，然后将菌体烘至恒重，检测菌体的蛋白含量，菌体蛋白含量达到41％，编号此菌株为GL1；菌株GL1经过生理生化和分子生物学鉴定为白假丝酵母菌(Candida albicans)，白假丝酵母菌(Candida albicans)GL1菌落呈奶酪状、乳白色，表面光滑，返光，边缘流苏状。
[0012]本专利技术提供的白假丝酵母菌GL1在发酵饲料中的应用。
[0013]本专利技术提供的利用上述的白假丝酵母菌GL1生产发酵饲料的方法，包括下述步骤：
[0014](1)种子液的制备
[0015]将白假丝酵母菌GL1培养后制成酵母菌种子液；
[0016](2)接种发酵
[0017]以橄榄果渣、麸皮和纤维素酶为原料制备出橄榄果渣
‑
麸皮培养基，将步骤 (1)中的酵母菌种子液接种至橄榄果渣
‑
麸皮培养基中，发酵后得到发酵饲料。
[0018]进一步的，所述步骤(1)中，种子液的制备具体包括下述步骤：
[0019]A1、将白假丝酵母菌GL1接种于斜面培养基上，28
‑
32℃静置培养2.0d，然后转接种到PDB培养基中，于28
‑
32℃摇床培养2.5
‑
3.5d；然后按体积百分比以5％
‑
15％的接种量接种到PDB培养基中，于28
‑
32℃摇床培养2.0
‑
3.0d，得到培养菌液；
[0020]A2、将培养菌液离心，收集菌体；将收集的菌体洗涤后重悬，得到酵母菌种子液。
[0021]进一步的，所述步骤A1中，所述斜面培养基中：马铃薯浸出粉的浓度为 4
‑
8g/L，葡萄糖的浓度为15
‑
25g/L，氯霉素的浓度为0.05
‑
0.15g/L；琼脂粉18
‑
22 g/L。
[0022]进一步的，所述步骤A1中，PDB培养基中，马铃薯浸出粉的浓度为4
‑
8g /L，葡萄糖的浓度为15
‑
25g/L，氯霉素的浓度为0.05
‑
0.15g/L。
[0023]进一步的，所述步骤A1中，所述PDB培养基的初始pH为5.4
‑
5.8。
[0024]进一步的，所述步骤A2中，收集菌体是以6000
‑
10000r/min在3
‑
5℃离心培养菌液；洗涤菌体是以3000
‑
7000r/min在3
‑
5℃离心3
‑
7min。
[0025]进一步的，所述步骤(2)中，接种发酵具体包括下述步骤：
[0026]B1、制备橄榄果渣
‑
麸皮培养基：
[0027]以橄榄果渣、麸皮和纤维素酶为原料，所述麸皮的添加量为橄榄果渣重量的7％，所述纤维素酶的添加量为橄榄果渣和麸皮总重量的0.01％
‑
0.03％；其制备是先将橄榄果渣和麸皮混合均匀在121℃灭菌20min，然后加入纤维素酶混合均匀后，于43
‑
47℃静止培养11
‑
13h；最后，添加无菌水保证培养基终水分含量为50％
‑
60％，得到橄榄果渣
‑
麸皮培养基；
[0028]B2、按体积百分比5％
‑
15％的接种量将酵母种子液接种至步骤B1中的橄榄果渣
‑
麸皮培养基中，于25
‑
32℃静置发酵4
‑
10d，得到发酵饲料，采用 GB/T6432
‑
2018检测蛋白含量。
[0029]进一步的，所述B2中，按体积百分比10％的接种量将酵母种子液接种至步骤B1中的橄榄果渣
‑
麸皮培养基。
[0030]基于上述技术方案，本专利技术实施例至少可以产生如下技术效果：
[0031]本专利技术提供的白假丝酵母菌，是从橄榄果渣中提取的一种白假丝酵母的新型菌株，能够应用于发酵饲料中，通过本专利技术中白假丝酵母菌发酵后能使橄榄果渣
‑
麸皮(发酵饲料)中蛋白含量增加78％左右，蛋白含量增加明显，且发酵条件简单，在发酵饲料的应用中具有明显的优势，当然也可以将其应用于苹果渣等水果渣中进行发酵。
附图说明
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.白假丝酵母菌（Candida albicans）GL1，该菌株GL1保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.22844。2.权利要求1所述的白假丝酵母菌GL1在发酵饲料中的应用。3.一种利用如权利要求1所述的白假丝酵母菌GL1生产发酵饲料的方法，其特征在于，包括下述步骤：（1）种子液的制备将白假丝酵母菌GL1培养后制成酵母菌种子液；（2）接种发酵以橄榄果渣、麸皮和纤维素酶为原料制备出橄榄果渣
‑
麸皮培养基，将步骤（1）中的酵母菌种子液接种至橄榄果渣
‑
麸皮培养基中，发酵后得到发酵饲料。4.根据权利要求3所述的生产发酵饲料的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，种子液的制备具体包括下述步骤：A1、将白假丝酵母菌GL1接种于斜面培养基上，28
‑
32℃静置培养2.0 d，然后转接种到PDB培养基中，于28
‑
32℃摇床培养2.5
‑
3.5d；然后按体积百分比以5%
‑
15%的接种量接种到PDB培养基中，于28
‑
32℃摇床培养2.0
‑
3.0d，得到培养菌液；A2、将培养菌液离心，收集菌体；将收集的菌体洗涤后重悬，得到酵母菌种子液。5.根据权利要求4所述的生产发酵饲料的方法，其特征在于，所述步骤A1中，所述斜面培养基中：马铃薯浸出粉的浓度为4
‑
8g /L，葡萄糖的浓度为15
‑
25g /L，氯霉素的浓度为0.05
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0.15 g /L；琼脂粉18
‑
22 g /L。6.根据权利要求4所述的生产发酵饲料的方法，其特征在于，所述步骤A1中， PDB培养基中，马铃薯浸出粉的浓度为4
‑
8g /L，葡萄糖的浓度为15...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾黎黎，何世勤，刘书亮，李建龙，周巧，
申请(专利权)人：四川天源油橄榄有限公司，
类型：发明
国别省市：