本发明专利技术公开了一种用于培养蛭弧菌的弧菌饵料,由经过增透培养基培育的副溶血弧菌组成。由本发明专利技术特定方法所得到的弧菌饵料容易被蛭弧菌侵染,可以显著增大蛭弧菌的产率。可以显著增大蛭弧菌的产率。
【技术实现步骤摘要】
用于培养蛭弧菌的弧菌饵料
[0001]本专利技术涉及蛭弧菌培养
,具体涉及一种用于培养蛭弧菌的弧菌饵料。
技术介绍
[0002]水产养殖业在近几十年例随着人们生活水平提高而日益发展,取得了长足的进步。但随着养殖规模的不断扩大,养殖环境也逐步恶化,养殖病害越发严重,给水产养殖业带来了巨量的经济损失。当中,细菌性疾病是制约水产养殖业的一个重要原因。抗生素等药物虽然是防治疾病较为有效的手段但是细菌容易产生耐药性,并且会对人体健康产生影响,这迫使人们寻找能够解决防病治病的新途径,生物防治成为人们的关注热点。蛭弧菌不光在水产养殖具有重要作用,在家禽养殖、食品保藏、医学治疗等领域也有非常好的应用前景。
[0003]蛭弧菌具有一般细菌的特性,革兰氏染色呈阴性,短杆或弧状。也有螺旋状,个体一般小于普通细菌,能通过过滤器;体型宽0.25~0.4μm,长0.8~1.2μm,细胞的一端有极长的鞭毛,鞭毛常带有鞘,是细胞壁的衍生物,同时包有丝状体。蛭弧菌进入宿主菌体中,形成蛭质体,随后蛭质体自身的外膜逐渐破裂,而蛭弧菌本身的细胞核由紧密状态向四周扩大,随着自身外膜的彻底破裂,开始进行延伸生长阶段。蛭弧菌常侵染的宿主菌包括杀对虾弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌等。
[0004]副溶血性弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性菌,最适宜生长在含盐量为2%~4%的环境中,因此主要存在于江河湖海、海底沉积物、各类海产品及盐渍食品中。该菌在天然水产品中有很高的携带率,在温暖的季节尤其是夏季检出率可以高达90%。
[0005]近年来,植物源活性物质因具有天然、安全和营养等优点而受到广泛关注,越来越多的研究者将目光投向天然的植物源活性物质,研究其抑制食源性致病菌的功效。
技术实现思路
[0006]针对上述现有技术中存在的不足,本专利技术提供了一种用于培养蛭弧菌的弧菌饵料。
[0007]为解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案是:
[0008]一种用于培养蛭弧菌的弧菌饵料,由经过增透培养基培育的副溶血弧菌组成。
[0009]所述培育过程为:将副溶血弧菌接种到所述增透培养基上并将所述增透培养基置于摇床中。
[0010]优选的,所述培育过程为:在36℃将副溶血弧菌接种到所述增透培养基上并将所述增透培养基置于转速为40
‑
80rpm的摇床中;接种量为108CFU/mL;所述增透培养基的溶氧量为20%;所述增透培养基的pH为8.3
‑
8.7;在恒温36℃下培养;当副溶血弧菌的浓度达到109‑
10
10
CFU/mL时完成培育。
[0011]最优选的,所述培育过程为:在36℃将副溶血弧菌接种到所述增透培养基上并将所述增透培养基置于转速为60rpm的摇床中;接种量为108CFU/mL;所述增透培养基的溶氧
量为20%;所述增透培养基的pH为8.6;在恒温36℃下培养;当副溶血弧菌的浓度达到10
10
CFU/mL时完成培育。
[0012]所述增透培养基由混合蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、酵母浸膏、蒸馏水、芳香植物提取物混合均匀得到。
[0013]优选的,所述增透培养基由8
‑
12重量份混合蛋白胨、27
‑
35重量份氯化钠、0.1
‑
4重量份磷酸氢二钾、0.1
‑
3.8重量份磷酸二氢钾、1
‑
5重量份酵母浸膏、900
‑
1100重量份蒸馏水、0.4
‑
0.55重量份芳香植物提取物混合均匀得到。
[0014]最优选的,所述增透培养基由10重量份混合蛋白胨、30重量份氯化钠、3重量份磷酸氢二钾、1.3重量份磷酸二氢钾、3重量份酵母浸膏、1000重量份蒸馏水、0.5重量份芳香植物提取物混合均匀得到。
[0015]所述混合蛋白胨为鱼蛋白胨、胰蛋白胨中的一种或者两种的混合物。优选的,所述混合蛋白胨为鱼蛋白胨、胰蛋白胨按质量比(0.1
‑
5):(0.1
‑
5)的混合物。最优选的,所述混合蛋白胨为鱼蛋白胨、胰蛋白胨按质量比1:3的混合物。
[0016]所述芳香植物提取物的制备方法为:
[0017]⑴
将芳香植物粉碎后过筛,采用CO2超临界萃取;萃取完毕后得到油状物;
[0018]⑵
将由步骤
⑴
所得油状物、蒸馏水、食用明胶、抗氧化剂混合并搅拌,得到所述芳香植物提取物。
[0019]优选的,所述芳香植物提取物的制备方法为:
[0020]⑴
将芳香植物粉碎后过10
‑
20目筛,采用CO2超临界萃取;萃取压力21
‑
24MPa,萃取温度43
‑
47℃,解析压力6
‑
9MPa,解析温度18
‑
26℃,CO2流量为3
‑
5L/h,萃取时间2
‑
4h;萃取完毕后得到油状物;
[0021]⑵
在12
‑
17℃、氮气氛围保护下,将由步骤
⑴
所得油状物、蒸馏水、食用明胶、抗氧化剂混合并以60
‑
180rpm的转速搅拌10
‑
30min,得到所述芳香植物提取物;所述油状物、蒸馏水、食用明胶、抗氧化剂的质量比为(80
‑
120):(20
‑
40):(5
‑
20):(1
‑
5)。
[0022]最优选的,所述芳香植物提取物的制备方法为:
[0023]⑴
将芳香植物粉碎后过10目筛,采用CO2超临界萃取;萃取压力22MPa,萃取温度45℃,解析压力7MPa,解析温度20℃,CO2流量为4L/h,萃取时间3h;萃取完毕后得到油状物;
[0024]⑵
在15℃、氮气氛围保护下,将由步骤
⑴
所得油状物、蒸馏水、食用明胶、抗氧化剂混合并以120rpm的转速搅拌15min,得到所述芳香植物提取物;所述油状物、蒸馏水、食用明胶、抗氧化剂的质量比为100:30:15:3。
[0025]所述芳香植物为罗勒、苦橙、青柠、佛手柑、欧芹中的一种或者多种的混合物。优选的,所述芳香植物为罗勒、苦橙、青柠、佛手柑、欧芹按质量比(1
‑
10):(1
‑
10):(1
‑
10):(1
‑
10):(1
‑
10)的混合物。最优选的,所述芳香植物为罗勒、苦橙、青柠、佛手柑、欧芹按质量比1:1:1:1:1的混合物。
[0026]所述抗氧化剂为异芒果苷、虎杖甙中的一种或者两种的混合物。优选的,所述抗氧化剂为异芒果苷、虎杖甙按质量比(0.1
‑
5):(0.1
‑
5)的混本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于培养蛭弧菌的弧菌饵料,其特征在于:由经过增透培养基培育的副溶血弧菌组成。2.如权利要求1所述用于培育蛭弧菌的弧菌饵料,其特征在于,所述培育过程为:将副溶血弧菌接种到所述增透培养基上并将所述增透培养基置于摇床中。3.如权利要求2所述用于培育蛭弧菌的弧菌饵料,其特征在于:所述培育过程中的接种量为108CFU/mL;当副溶血弧菌的浓度达到109‑
10
10
CFU/mL时完成培育。4.如权利要求1
‑
3任一项所述用于培育蛭弧菌的弧菌饵料,其特征在于:所述增透培养基由混合蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、酵母浸膏、蒸馏水、芳香植物提取物混合均匀得到。5.如权利要求4所述用于培育蛭弧菌的...
【专利技术属性】
技术研发人员:林江一,
申请(专利权)人:上海乾界生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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