一种青藤碱衍生物代谢产物及其制备方法、药物组合物和用途技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体公开了一种如式(Ⅰ)的青藤碱衍生物代谢产物sino-wcj-43-M1和制备方法，及其在制备预防或治疗再生障碍性贫血药物中的应用。药代动力学研究发现，sino-wcj-43-M1是sino-wcj-43在体内的主要存在形式。利用酯酶对sino-wcj-43进行水解，经分离纯化可得到新化合物sino-wcj-43-M1，或以盐酸青藤碱为原料，采用化学合成方法合成sino-wcj-43-M1。该化合物具有与sino-wcj-43类似的明显的治疗再生障碍性贫血的作用，可以单体或药用组合物形式在再生障碍性贫血的临床治疗中应用。中应用。中应用。

【技术实现步骤摘要】
一种青藤碱衍生物代谢产物及其制备方法、药物组合物和用途


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种青藤碱衍生物代谢产物—新化合物sino-wcj-43-M1或其药学上可接受的盐及其制备方法，及含有该衍生物代谢产物或其药学上可接受的盐的药物组合物及其在制备预防或治疗再生障碍性贫血中的应用。

技术介绍

[0002]再生障碍性贫血，简称再障(aplastic anemia，AA)，是一种较为严重的血液系统疾病，是由物理、化学、生物或其它原因所致的骨髓造血功能衰竭性疾病，临床主要表现为全血细胞减少所致的贫血、出血和感染，严重时可危及生命。造血干细胞移植是目前唯一能够治愈再障的治疗方案，但由于移植配型难，治疗风险大，大部分患者只能采取药物进行免疫抑制治疗。目前认为，免疫功能紊乱在再障的发生发展过程中发挥关键性作用。临床常用的免疫抑制剂包括ATG/ALG、环孢素A(cyclosporin A，CsA)、环磷酰胺等。然而，免疫抑制剂对免疫系统的整体抑制会给患者带来严重的不良反应，且价格昂贵、复发率高，治疗效果不尽人意。因此寻找更为有效的治疗途径和药物是再障治疗的迫切需求。
[0003]青藤碱衍生物sino-wcj-43是我所自主研发的新型小分子抗再生障碍性贫血化合物，关于sino-wcj-43的合成及抗炎、治疗再生障碍性贫血的药理作用已于2017年申请国家专利技术专利，申请号为CN201710472411.4。sino-wcj-43具有合成工艺简单稳定、生物利用度高、毒性小、疗效确切的特点，具有实际开发价值。r/>
技术实现思路

[0004]本专利技术解决的技术问题是提供一种具有新的化学结构特征的青藤碱衍生物代谢产物sino-wcj-43-M1及其药学上可接受的盐，其制备方法、药物组合物和用途。
[0005]为解决本专利技术的技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]本专利技术技术方案的第一方面是提供了一种具有新的化学结构特征的青藤碱衍生物代谢产物sino-wcj-43-M1及其药学上可接受的盐，其结构如式(Ⅰ)所示：
[0007][0008]本专利技术技术方案的第二方面提供了所述式(Ⅰ)化合物的生物合成制备方法：利用酯酶水解sino-wcj-43 1位羟甲基酯键，获得青藤碱衍生物代谢产物，
[0009][0010]本专利技术青藤碱衍生物代谢产物sino-wcj-43-M1，结构新颖，分子式为C29H31NO6，命名为1-hydroxymethylene-4-cinnamyloxy-7,8-didehydro-3,7-dimethoxy-17-methyl-morphinan-6-one，1-羟基亚甲基-4-桂皮酰氧基-7,8-二去氢-3,7-二甲氧基-17-甲基-吗啡喃-6-酮。生物学合成步骤如下：
[0011]1)采用酯酶催化sino-wcj-43水解为sino-wcj-43-M1。反应体系为PBS缓冲液(pH＝7.4)、猪肝酯酶25U/mL、sino-wcj-43 0.5mg/mL，37℃水浴反应2h。
[0012]2)反应液中加入等体积乙腈沉淀蛋白，乙酸乙酯萃取，制备液相分离纯化，浓缩干燥，得白色固体sino-wcj-43-M1。
[0013]本专利技术技术方案的第三方面提供了所述式(Ⅰ)化合物的化学合成制备方法：以盐酸青藤碱sino为原料，与多聚甲醛加热回流反应生成式1所示1-羟基亚甲基青藤碱；1-羟基亚甲基青藤碱与叔丁基二甲基氯硅烷，咪唑和4-二甲氨基吡啶反应得到分离得中间体2；
[0014]化合物2与肉桂酸,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶反应得到中间体3；化合物3与氟化氢和吡啶反应得到目标化合物sino-wcj-43-M1。
[0015][0016]具体化学合成步骤如下：
[0017]1)称取盐酸青藤碱10.0g，溶于200ml水中，搅拌下加入20.0g多聚甲醛(质量2-3倍于盐酸青藤碱)，加热回流反应4h-12h，TLC监测反应过程。反应结束后，用CHCl3萃取(100mL
×
3或者萃取次数可增加)，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，蒸除溶剂，得白色固体，得到1-羟基亚甲基青藤碱。
[0018]2)称取1-羟基亚甲基青藤碱250mg(1eq)，溶于10ml四氢呋喃中，搅拌下加入叔丁
基二甲基氯硅烷840mg(8eq)，咪唑380mg(8eq)，4-二甲氨基吡啶170mg(0.2eq)，室温下搅拌，TLC监测反应。约4小时后，薄层色谱显示原料化合物1基本消失，向反应液中加入10ml水停止反应，将液体转移至分液漏斗中，加入(20ml
×
3次)乙酸乙酯萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝50/1)分离得到白色发泡状固体化合物2。
[0019]3)称取化合物2约150mg(1eq)溶于10ml二氯甲烷中，搅拌下加入肉桂酸178mg(3.8eq),1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐200mg(3.3eq)，4-二甲氨基吡啶116mg(0.3eq)，室温下搅拌，TLC监测反应。约1.5小时后，薄层色谱显示原料化合物2基本消失，向反应液中加入10ml水停止反应，将液体转移至分液漏斗中，加入(20ml
×
3次)二氯甲烷萃取，合并有机层后用饱和氯化铵溶液3
×
30ml洗涤，氯化铵水层合并后用20ml二氯甲烷萃取一次。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝100/1)分离得到淡黄色油状液体化合物3。
[0020]4)称取化合物3约30mg(1eq)溶于2ml乙腈中，将氟化氢0.25ml(60eq)和吡啶1.0ml(60eq)混匀冷却至室温后，加入到反应液中，室温下搅拌，TLC监测反应。约2小时后，薄层色谱显示原料化合物3基本消失，向反应液中加入乙酸乙酯5ml稀释反应液，将反应液转移至分液漏斗中，加入(5ml
×
3次)饱和碳酸氢钠溶液洗涤，合并水相，水相用乙酸乙酯(15ml
×
3次)萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(二氯甲烷/甲醇＝25/1)分离得到淡黄色发泡状固体，然后将淡黄色发泡状固体加入至5ml乙酸乙酯中搅拌混匀，得白色悬浊液，搅拌20分钟，滤出固体，用乙酸乙酯和石油醚洗后，干燥得白色粉末状固体化合物sino-wcj-43-M1(路线图中的结构式M1即为本专利技术中的结构式(I))。
[0021]本专利技术技术方案的第四方面是提供了一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的式(Ⅰ)的青藤碱衍生物代谢产物sino-wcj-43-M1及其药学上可接受的盐及药用载体。
[0022]本专利技术还涉及一种含有药物有效剂量所述的化合物和药效学上可接受的载体的药物组合物。用于此目的时，如果需要，可与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药使用的适当施用形式或剂量形式。
[0023]根据本专利技术，本专利技术化合物可以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种青藤碱衍生物代谢产物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的结构如式(Ⅰ)所示，2.制备权利要求1所述的青藤碱衍生物代谢产物的生物合成方法，其特征在于，包括以下步骤：利用酯酶水解青藤碱衍生物sino-wcj-43 1位羟甲基酯键，获得青藤碱衍生物代谢产物；3.制备权利要求1所述的青藤碱衍生物代谢产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以盐酸青藤碱sinomenine为原料，与多聚甲醛加热回流反应生成式1所示1-羟基亚甲基青藤碱；(2)1-羟基亚甲基青藤碱与叔丁基二甲基氯硅烷，咪唑和4-二甲氨基吡啶反应得到分离得中间体2；(3)化合物2与肉桂酸,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶反应得到中间体3...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉腾飞，林明宝，张梓倩，侯琦，白金叶，马培，李旭昱，王洪建，
申请(专利权)人：中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：