一种青蒿素衍生物核酸适体药物偶联物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及药物领域，特别是涉及一种青蒿素衍生物核酸适体药物偶联物及其制备方法和用途。本发明专利技术提供一种核酸适体药物偶联物，包括青蒿琥酯基团和核酸适体片段，所述核酸适体片段的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO.1所示的序列。本发明专利技术所提供的核酸适体药物偶联物不仅药物整体上具有良好的水溶性和靶向性，并且在细胞实验中表现出优越的细胞毒性，可以特异性地高效杀伤PTK7高表达的细胞，具有靶向PTK7高表达的肿瘤细胞的能力，从而可以实现高效的肿瘤靶向治疗，具有良好的产业化前景。具有良好的产业化前景。

【技术实现步骤摘要】
一种青蒿素衍生物核酸适体药物偶联物及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及药物领域，特别是涉及一种青蒿素衍生物核酸适体药物偶联物及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]1973年，中国科学家屠呦呦首次从黄花蒿中分离提取得到了一种治疗疟疾的有效成分，并将其命名为“青蒿素”。在疟疾的治疗中，青蒿素价格低廉，高效且低毒，挽救了成千上万患者的生命。但是，青蒿素水溶性差、生物利用度低，目前已开发了多种青蒿素衍生物，比如双氢青蒿素(DHA)、蒿乙醚(ARE)、蒿甲醚(ARM)和青蒿琥酯(ART)等。青蒿素及其衍生物都属于新型倍半萜内酯化合物，结构中均含有过氧桥结构，化学结构式具体如下：
[0003][0004]近年来，科学研究表明青蒿素具有抗肿瘤、抗真菌和免疫调节等功能。青蒿素的抗癌活性吸引了科学家的广泛关注。青蒿素对肝癌细胞、乳腺癌细胞、宫颈癌细胞等多种肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用。经研究表明，青蒿素及其衍生物的抗疟性和抗肿瘤的作用机制相同，即通过青蒿素分子结构中的过氧桥断裂产生的自由基来实现抗癌和抗疟。它还可以通过阻滞细胞周期、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤新生血管形成、调节肿瘤相关基因的表达以及损伤细胞线粒体等作用机制而实现抗肿瘤作用。
[0005]由于青蒿素及其单体类似物对癌细胞的毒性相对较低、半衰期较短，一般不足以保证杀死癌细胞。为了提高青蒿素及其衍生物的毒性，科学家做出了许多尝试，比如合成青蒿素二聚体或三聚体，把青蒿素串联到癌细胞靶向小分子中等措施。到目前为止，各种青蒿素及其衍生物对癌细胞的IC50仍旧停留在uM级别，远未达临床使用的抗癌药物的nM级别。

技术实现思路

[0006]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种青蒿素衍生物核酸适体药物偶联物及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。
[0007]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术一方面提供一种核酸适体药物偶联物，包括青蒿琥酯基团和核酸适体片段，所述核酸适体片段的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO.1所示的序列。
[0008]在本专利技术一些实施方式中，所述青蒿琥酯基团的化学结构式如下所示：
[0009][0010]在本专利技术一些实施方式中，所述核酸适体片段由5
’
端被-NH2修饰的核酸片段形成。
[0011]在本专利技术一些实施方式中，所述青蒿琥酯基团和核酸适体片段5
’
端之间通过酰胺键连接。
[0012]在本专利技术一些实施方式中，所述核酸适配体片段的化学结构式如下所示：
[0013][0014]在本专利技术一些实施方式中，所述核酸适体药物偶联物的化学结构式如下所示：
[0015][0016]本专利技术另一方面提供上述的核酸适体药物偶联物的制备方法，包括：将青蒿琥酯分子与核酸片段连接，以提供所述的核酸适体药物偶联物。
[0017]在本专利技术一些实施方式中，所述制备方法具体包括：将青蒿琥酯分子与5
’
端-NH2修饰的核酸片段反应，以提供所述的核酸适体药物偶联物。
[0018]本专利技术另一方面提供上述的核酸适体药物偶联物在制备药物中的用途。
[0019]在本专利技术一些实施方式中，所述药物选自用于治疗PTK7高表达的相关疾病的药物。
附图说明
[0020]图1显示为本专利技术实施例2、实施例3、实施例4、实施例5中核酸适体连接示意图。
[0021]图2显示为本专利技术实施例2中青蒿琥酯-核酸适体药物偶联物高效液相色谱色谱纯化示意图。
[0022]图3显示为本专利技术实施例2中青蒿琥酯-核酸适体药物偶联物质谱鉴定图。
[0023]图4显示为本专利技术实验案例3中青蒿琥酯-核酸适体对照序列药物偶联物高效液相色谱色谱纯化示意图。
[0024]图5显示为本专利技术实验案例3中青蒿琥酯-核酸适体对照序列药物偶联物质谱鉴定图。
[0025]图6显示为本专利技术实验案例4中青蒿琥酯-核酸适体(Cy5荧光标记)药物偶联物高效液相色谱色谱纯化示意图。
[0026]图7显示为本专利技术实验案例4中青蒿琥酯-核酸适体(Cy5荧光标记)药物偶联物质谱鉴定图。
[0027]图8显示为本专利技术实验案例5中青蒿琥酯-核酸适体对照序列(Cy5荧光标记)药物偶联物高效液相色谱色谱纯化示意图。
[0028]图9显示为本专利技术实验案例5中青蒿琥酯-核酸适体对照序列(Cy5荧光标记)药物偶联物质谱鉴定图。
[0029]图10显示为本专利技术实施例6中青蒿琥酯-核酸适体药物偶联物肿瘤细胞特异性靶向实验结果示意图。
[0030]图11显示为本专利技术实施例7中青蒿琥酯-核酸适体药物偶联物的小鼠肿瘤靶向性实验结果示意图；其中，(a)为ASC在HCT119模型中的动态成像示意图；(b)为小鼠主要器官解剖成像示意图。
[0031]图12显示为本专利技术实施例8中细胞毒性实验实验结果示意图。
[0032]图13显示为本专利技术实施例9中血清稳定性实验结果示意图。
具体实施方式
[0033]本专利技术专利技术人经过大量实践研究后意外地发现，将青蒿琥酯基团与合适的核酸适体片段进行组合以获得核酸适体药物偶联物，不仅使药物整体上具有良好的水溶性和靶向性，并且在细胞实验中表现出优越的细胞毒性，在此基础上完成了本专利技术。
[0034]本专利技术第一方面提供一种核酸适体药物偶联物，包括青蒿琥酯基团和核酸适体片段，所述核酸适体片段的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO.1所示的序列。通过细胞毒性实验可知，通过青蒿琥酯基团和包括上述序列的核酸适体片段所形成的药物偶联物，相对于未连接核酸适体的青蒿琥酯和通过其他连接片段连接的核酸适体药物偶联物具有更佳的靶向性，且具有更强的肿瘤细胞杀伤能力，其对于肿瘤细胞的IC
50
可以达到nM级别。
[0035]本专利技术所提供的核酸适体药物偶联物，可以包括青蒿琥酯基团，所述青蒿琥酯基团通常可以由其对应的青蒿琥酯分子所形成。所述青蒿琥酯分子通常通过羧基与修饰有氨基的核酸适体连接，所述青蒿琥酯基团的化学结构式具体可以如下所示：
[0036][0037]用于形成青蒿琥酯基团的青蒿琥酯分子的化学结构式具体可以如下所示：
[0038][0039]本专利技术所提供的核酸适体药物偶联物中，可以包括核酸适体片段，所述核酸适体片段通常由合适的核酸片段形成，核酸适体片段的选择决很大程度上决定了所述核酸适体药物偶联物的靶向性，也很大程度上决定了核酸适体药物偶联物整体上的稳定性。所述核酸适体片段的多核苷酸序列可以包括如SEQ ID NO.1所示的序列，从本专利技术的相关实施例中可以发现，本专利技术所提供的核酸适体药物偶联物(ASC)整体上具有很好的稳定性，在培养基和血清中，均可以具有较低的降解速度。所述核酸适体片段通常靶向于其所对应的蛋白，例如，靶标蛋白可以是肿瘤细胞表面高表达的PTK7蛋白。所述核酸适体片段通常可以由5
’
端被-NH2修饰的核酸片段形成，从而可以使青蒿琥酯基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸适体药物偶联物，包括青蒿琥酯基团和核酸适体片段，所述核酸适体片段的多核苷酸序列包括如SEQ ID NO.1所示的序列。2.如权利要求1所述的核酸适体药物偶联物，其特征在于，所述青蒿琥酯基团的化学结构式如下所示：3.如权利要求1所述的核酸适体药物偶联物，其特征在于，所述核酸适体片段由5
’
端被-NH2修饰的核酸片段形成。4.如权利要求1所述的核酸适体药物偶联物，其特征在于，所述青蒿琥酯基团和核酸适体片段5
’
端之间通过酰胺键连接。5.如权利要求1所述的核酸适体药物偶联物，其特征在于，所述核酸适配体片段的化学结构式如下所示：6...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭蔚泓，王雪强，李颖颖，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：