一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，为采用高效液相色谱仪检测样本中乙二胺四乙酸二钠含量；包括以下步骤：（1）样品预处理：将需要检测的甲硝唑凝胶与磷酸水溶液混合，过滤，收集滤液，作为供试品溶液；（2）洗脱：将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，利用紫外检测器，泵入洗脱液采用梯度洗脱程序进行洗脱；（3）检测：记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。本发明专利技术的检测方法专属性好，灵敏度高，线性范围、准确度均能满足测定要求，且耐用性良好。且耐用性良好。且耐用性良好。

【技术实现步骤摘要】
一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法


[0001]本专利技术涉及分析检测
，特别涉及一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法。

技术介绍

[0002]甲硝唑凝胶是一种临床中常用的外用药物，外形为淡黄色的透明凝胶，当中含有的有效成分甲硝唑可以杀灭很多厌氧菌及螨虫，因此是治疗面部酒糟鼻、丘疹性痤疮以及脓包等皮肤病的常用药物。
[0003]甲硝唑，英文名称为Metronidazole，化学名为2
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甲基
‑5‑
硝基咪唑
‑1‑
乙醇，分子式为C6H9N3O3，分子量为171.16，CAS号为443
‑
48
‑
1，化学结构式如下：目前国内批准的甲硝唑凝胶一共有5家，规格为0.75%。原研尚未进口到国内。同时《中国药典》中也没有有关物质及组分检查项，缺少全面控制甲硝唑凝胶质量的关键一环。
[0004]因此，目前急需一种分析过程简单且能有效控制甲硝唑凝胶质量的分析方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。
[0006]本专利技术提供的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，为采用高效液相色谱仪检测样本中乙二胺四乙酸二钠含量。
[0007]在某些实施方案中，一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，包括以下步骤：（1）样品预处理：将需要检测的甲硝唑凝胶与磷酸水溶液混合，过滤，收集滤液，作为供试品溶液；（2）洗脱：将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，利用紫外检测器，泵入洗脱液采用梯度洗脱程序进行洗脱；（3）检测：记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。
[0008]在某些实施方案中，步骤（3）具体为：利用高效液相色谱仪分别测定各不同浓度的标准对照品溶液和供试品溶液，分别记录标准对照品溶液的浓度和对应的峰面积和供试品的峰面积，对照品储备液溶液的各质量浓度及色谱图峰面积进行线性回归分析，得回归方程和相关系数，做出标准曲线；
利用外标法从供试品溶液的峰面积求得其对应的甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。
[0009]在某些实施方案中，高效液相色谱仪测定时采用梯度洗脱。
[0010]在某些实施方案中，以磷酸盐缓冲液为流动相A：浓度为0.049mol/L~0.051mol/L，优选为0.05mol/L，pH值为1.5；流动相B为乙腈；其中：所述磷酸缓冲液的制备步骤为：取二水合磷酸二氢钠7.8g，加水1000mL，用磷酸调节pH至1.5。
[0011]在某些实施方案中，梯度洗脱程序如下表所列：。
[0012]在某些实施方案中，对照品溶液的制备方法为：取乙二胺四乙酸二钠对照品20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液使溶解并稀释定容至刻度，摇匀，精密移取该溶液2ml置20ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，平行配制两份。
[0013]在某些实施方案中，供试品溶液的制备方法为：取甲硝唑凝胶2g，精密称定，置50ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液，超声使溶解，用0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液；其中：供试品溶液的浓度为38~40mg/mL，优选为40mg/mL。
[0014]在某些实施方案中，杂质的检测限度为乙二胺四乙酸二钠的峰面积不得大于对照溶液主峰面积。
[0015]在某些实施方案中，高效液相色谱仪的检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，设置柱温为40℃；检测波长为210nm；进样体积为20μL；流速为0.8~1.2mL/min，优选为1.0mL/min。
[0016]有益效果：本专利技术通过对高效液相色谱仪分析中色谱柱、流动相等条件进行筛选，选用合适的流动相体系。在流动相的比例调节上，保证稀释剂和辅料不干扰样品中乙二胺四乙酸二钠的检测，保证甲硝唑、乙二胺四乙酸二钠的色谱峰之间的分离度符合要求，最终建立了梯度洗脱的HPLC分析方法，实现了对甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测与控制。本专利技术的检测方法对严格控制药品质量以及保证药品的安全性和有效性具有积极的作用。
附图说明
[0017]图1是实施例1检测甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠含量的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0018]下面通过实施方式对本专利技术进行进一步详细的说明。
[0019]实施例1 检测甲硝唑凝胶中的乙二胺四乙酸二钠依照高效液相色谱法测定（中国药典2020年版通则0512）。
[0020]色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Atlantis T3，250*4.6mm，5μm）；以0.05mol/l磷酸盐缓冲液（取二水合磷酸二氢钠7.8g，加水1000ml使溶解，用磷酸调节pH至1.5）为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温为40℃；检测波长为210nm；流速为1.0ml/min；其中：梯度洗脱程序如下表所列：。
[0021]测定法：取乙二胺四乙酸二钠约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液使溶解并稀释定容至刻度，摇匀，精密移取该溶液2ml置20ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。平行配制两份。取甲硝唑凝胶约2g，精密称定，置50ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液，超声使溶解，用0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。
[0022]1、乙二胺四乙酸二钠的检测限和定量限试验取乙二胺四乙酸二钠对照品适量，分别用0.1%磷酸水溶液溶解并进行逐步稀释，取信噪比3:1为检测限，取信噪比10:1为定量限，试验结果如下。
[0023]。
[0024]2、乙二胺四乙酸二钠的线性回归取乙二胺四乙酸二钠对照品适量，用0.1%磷酸水溶液溶解并稀释制成一系列梯度浓度的溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，以峰面积A为纵坐标，对应浓度C为横坐标，绘制标准曲线，计算线性回归方程，试验结果如下。
[0025]。
[0026]试验结果表明，乙二胺四乙酸二钠在0.995μg/mL~39.780μg/mL范围内溶液浓度（μg/mL）与其峰面积呈良好的线性关系，线性方程为Y=2.514X
‑
0.725，线性相关系数R=0.999。
[0027]3、重复性取乙二胺四乙酸二钠对照品约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液使溶解并稀释定容至刻度，摇匀，精密移取该溶液2ml置20ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。平行配制两份。取甲硝唑凝胶约2g，精密称定，置50ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液，超声使溶解，用0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。平行配制6份。精密量取对照品和供试品各20μl，注入液相色谱仪，计算各供试品中乙二胺四乙酸二钠的含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，其特征在于，为采用高效液相色谱仪检测样本中乙二胺四乙酸二钠含量。2.根据权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）样品预处理：将需要检测的甲硝唑凝胶与磷酸水溶液混合，过滤，收集滤液，作为供试品溶液；（2）洗脱：将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，利用紫外检测器，泵入洗脱液采用梯度洗脱程序进行洗脱；（3）检测：记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。3.根据权利要求2所述的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，其特征在于，步骤（3）具体为：利用高效液相色谱仪分别测定各不同浓度的标准对照品溶液和供试品溶液，分别记录标准对照品溶液的浓度和对应的峰面积和供试品的峰面积，对照品储备液溶液的各质量浓度及色谱图峰面积进行线性回归分析，得回归方程和相关系数，做出标准曲线；利用外标法从供试品溶液的峰面积求得其对应的甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。4.根据权利要求2所述的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，其特征在于，高效液相色谱仪测定时采用梯度洗脱。5.根据权利要求4所述的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，其特征在于，以磷酸盐缓冲液为流动相A：浓度为0.049mol/L~0.051mol/L，优选为0.05mol/L，pH值为1.5；流动相B为乙腈；其中：所述磷酸缓冲液的制备步骤为：取二...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永波，蔡蓓蕾，唐小晴，
申请(专利权)人：江苏知原药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：