一株产β-石竹烯的霉菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一株产β

【技术实现步骤摘要】
一株产
β
‑
石竹烯的霉菌及其应用


[0001]本专利技术属于酿酒微生物领域，具体涉及一株产β
‑
石竹烯的霉菌及其应用。

技术介绍

[0002]β
‑
石竹烯是一种常见的半萜烯化合物，一般来源于植物和真菌的代谢过程。目前在多个领域都在研究其功能，在能源领域β
‑
石竹烯正在被研究作为生产高密度燃料的前体，因此它被认为是下一代飞机燃料的一种重要成分。在医药领域β
‑
石竹烯及其氧化物具有抗菌、降血脂、抗炎、抗肿瘤和杀菌活性，石竹烯也具有防龋、解痉和镇静活性，此外其衍生物还能够为一些植物提供防御而防止被昆虫所捕食。目前大规模生产β
‑
石竹烯的方法主要有以下两种一种是从植物中提取；另一种则是通过化学合成的手段获取。然而，这两种方法都有明显的缺点，例如，植物中的β
‑
石竹烯含量是有限的，因此低浓度和低回收率使得从植物中分离提取β
‑
石竹烯不可行且经济效益低下，同时化学合成法又面临着复杂的工艺过程和高昂的生产成本，所以在工艺的复杂性和高成本的缺点下，化学合成的使用也受到了限制。微生物发酵合成β
‑
石竹烯主要通过具有生长迅速，生产成本低，经济效益高的优点，因此微生物发酵生产的β
‑
石竹烯有望成为传统方法的良好替代品。
[0003]在中国白酒领域β
‑
石竹烯也存在于酱香、浓香和清香型成品白酒、原酒、酒醅、大曲中，特别地在药香型白酒中β
‑
石竹烯的含量更高，近年来关于中国白酒中β
‑
石竹烯等烯萜类化合物的研究也越来越多。霉菌是酿制中国白酒的重要微生物之一，但目前未有相关报道或专利提到产β
‑
石竹烯的霉菌。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一株产β
‑
石竹烯的霉菌及其应用，该菌株具有耐乙醇，产β
‑
石竹烯，高产蛋白酶特性。
[0005]本专利技术的技术方案是，一株产β
‑
石竹烯的霉菌，该菌株为横梗霉属，Lichtheimiaramosa K2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC M 2021424。
[0006]进一步地，该菌株的DNA拼接序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]本专利技术还涉及一种强化麸曲，该麸曲中含有权利要求1或2中的霉菌。
[0008]进一步地，强化麸曲中霉菌的含量为105‑
107CFU/g；该强化麸曲采用霉菌和麸皮为原料，或者采用霉菌、麸皮及普通的麸曲为原料制备。
[0009]进一步地，该强化麸曲制备时，先将麸皮加去离子水拌匀，然后进行蒸汽灭菌，冷却至室温即为麸曲培养基；将产β
‑
石竹烯的霉菌用无菌蒸馏水进行稀释制备成孢子悬浮液，使孢子数保持在107～108之间，取孢子悬浮液加入麸曲培养基，添加量为每100g培养基加9
‑
12.5mL孢子悬浮液，25～30℃恒温箱中培养4d
‑
6d，后干燥至恒重，得到强化麸曲。
[0010]本专利技术还涉及所述强化麸曲在酿酒中的应用。
[0011]本专利技术还涉及所述产β
‑
石竹烯的霉菌在酿酒中的应用。
[0012]进一步地，所述酿酒为白酒酿造或黄酒酿造。
[0013]进一步地，该霉菌在制曲过程中与制曲原料混合，或与经过糖化、糊化的酿酒原料混合，或在发酵中后期与酿酒酒醅混合。
[0014]本专利技术还涉及所述的应用生产得到的白酒或黄酒，该白酒或黄酒中含有β
‑
石竹烯。
[0015]本专利技术具备以下有益效果：
[0016]采用本专利技术提供的霉菌具有独特的产β
‑
石竹烯的能力，利用该菌株进行酿酒，霉菌与酒曲混合,能够提高原酒中β
‑
石竹烯的含量,增进香味、增强酒质，以丰富白酒的功能性和优品率。
[0017]本专利技术还提供一种强化麸曲，该强化麸曲中含产β
‑
石竹烯的霉菌，采用此酒曲生产的酒中含有降血脂、抗炎、抗肿瘤作用的β
‑
石竹烯，特别地对于用此曲酿造的白酒，具有醇净、甘甜、不上头的优点，用此曲酿造的黄酒中氨基酸态氮含量在0.291g/L
‑ꢀ
0.396g/L。
附图说明
[0018]图1为本专利技术提供菌株在马铃薯葡萄琼脂培养基(Potato Dextrose AgarMedium)上的菌落形态图。
[0019]图2为本专利技术提供菌株在600倍显微镜下菌体形态图。
[0020]图3为本专利技术提供菌株的遗传发育树图。
[0021]图4为本专利技术提供菌株在发酵产物中石竹烯定性分析色谱图。
具体实施方式
[0022]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。
[0023]实施例1菌株的筛选
[0024]本专利技术涉及的一株产β
‑
石竹烯的霉菌)是从湖北某酒厂的优质酒醅中分离得到的，具体实施方式如下：
[0025]准确称取优质酒醅样品25g放入含有玻璃珠的225mL无菌生理盐水中，在30℃、 180r/min下震荡分散30min，从10
‑1梯度稀释至10
‑4,实际操作时取10
‑2～10
‑43个梯度,取 100μL涂布至马铃薯葡萄琼脂培养基(PDA)平板各2个,30℃培养1d,之后每天挑取单菌落划线纯化培养，稳定传代6次后保藏于马铃薯葡萄琼脂培养基(PAD)斜面及甘油管中。本实施例中马铃薯葡萄琼脂培养基(PDA)组成为：马铃薯20
‑
25份、葡萄糖15
‑
25份、琼脂粉15
‑
20份、水1000份、自然pH。
[0026]该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC M 2021424，保藏日期2021
‑4‑
21。经过鉴定，该菌株为横梗霉Lichtheimia ramosa K2。
[0027]微生物学形态特性：取培养好的斜面，用无菌生理盐水洗下孢子制成孢子悬液，将孢子悬液按照10倍梯度稀释，并取100μL涂布于马铃薯葡萄琼脂培养基，倒置平板，放入30℃培养箱中培养48h，观察菌落及菌丝形态特征：在PDA平板中明显能观察到该菌呈聚集生长、菌丝呈白色缠绕一起形成团，形态较大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或松或紧的形状，具体如图1所示。
[0028]于600倍显微镜观察菌株的菌体、菌丝形态，菌体形态特征为：顶囊为不规则大球形，其分生孢子为椭圆形，呈现为褐色，具体见图2。
[0029]实施例2：产β
‑
石竹烯能力验证
[0030本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株产β
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石竹烯的霉菌，其特征在于，该菌株为横梗霉属，Lichtheimia ramosa K2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC M 2021424。2.根据权利要求1所述的产β
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石竹烯的霉菌，其特征在于：该菌株的DNA拼接序列如SEQ ID NO.1所示。3.一种强化麸曲，其特征在于：该麸曲中含有权利要求1或2中的霉菌。4.根据权利要求3所述的强化麸曲，其特征在于：强化麸曲中霉菌的含量为105‑
10
7 CFU/g；该强化麸曲采用霉菌和麸皮为原料，或者采用霉菌、麸皮及普通的麸曲为原料制备。5.根据权利要求3所述的强化麸曲，其特征在于：该强化麸曲制备时，先将麸皮加去离子水拌匀，然后进行蒸汽灭菌，冷却至室温即为麸曲培养基；将产β
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：蔡开云，陈萍，冯向东，毛豪，陈小林，万小丰，明聃，郭婷婷，郑裴，
申请(专利权)人：湖北稻花香酒业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：