用于检测大熊猫轮状病毒CH-1株抗原的试剂条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了用于检测大熊猫轮状病毒CH

【技术实现步骤摘要】
用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条及其制备方法


[0001]本专利技术涉及体外免疫诊断检测工具
，具体属于一种用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条及其制备方法。

技术介绍

[0002]轮状病毒(Rotavirus，RV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)轮状病毒属(Rotavirus)，是引起儿童及幼畜严重腹泻甚至死亡的重要病原之一。轮状病毒为双链RNA病毒，基因组由11个双链RNA节段组成，每个基因节段编码一种蛋白。VP7蛋白作为病毒外膜的主要糖蛋白和主要中和抗原，与病毒的毒力及免疫保护性相关，是病毒中和反应的主要目标之一；VP7可吸附到宿主细胞，用单克隆抗体能中和VP7 的抗原决定簇。RV是人兽共患病毒，除了能够感染人外，还能感染牛、猪、马、羊、兔、禽、猫类等动物外，引起病毒性腹泻。在我国， 2009年首次从大熊猫腹泻粪便中检测出轮状病毒，将其命名为大熊猫轮状病毒(GiantPandaRotavirus,GPRV)CH
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1毒株。CH
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条，包括PVC底板，其特征在于：还包括依次粘贴在PVC底板上的吸水垫、硝酸纤维素膜、标记垫和样品垫；所述样品垫设置在所述PVC底板的一端上；所述样品垫设有样品滴入区；所述样品垫的一端搭设在所述标记垫上，所述标记垫上喷有RV抗体
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胶体金复合物，远离所述样品垫的所述标记垫一端搭设在硝酸纤维素膜上；所述硝酸纤维素膜固定连接在PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上包被有质控线C、检测线T，所述质控线C和检测线T均垂直于试剂条延长方向设置；所述质控线C包被有RV VP7重组蛋白；所述检测线T包被有RV CH
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1株单克隆抗体；远离所述样品垫的所述硝酸纤维素膜一端搭设在吸水纸下。2.根据权利要求1所述的用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条，其特性在于：所述标记垫上的CH
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1株抗体
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胶体金复合物喷量为2～4μl/cm，胶体金标记RV CH
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1株抗体的比例为每毫升标记量为5～10μg，RV CH
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1株抗体
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胶体金复合物浓缩倍数为20～30倍，即每20～30ml胶体金浓缩至1ml，喷量为2～4μl/cm。3.根据权利要求1所述的用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条，其特性在于：所述硝酸纤维素膜上的检测线T包被的RV CH
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1株单克隆抗体的浓度为0.5～1.0mg/ml，划线量为1.0～2.0μl/cm；所述的质控线C包被的VP7蛋白浓度为1.0～2.0mg/ml，划线量为1.0～2.0μl/cm。4.根据权利要求1所述的用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条，其特性在于：所述胶体金粒径为20
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50nm。5.权利要求1
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4任一项所述的用于检测大熊猫轮状病毒CH
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1株抗原的试剂条的制备方法，其特性在于：包括下列步骤：(1)胶体金溶液的制备；(2)标记垫的制备，包括S1、RV CH
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1株抗体
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胶体金复合物的制备，取1ml的胶体金溶液，加入2～10μl的0.1mol/l K2CO3溶液混匀，加入5～10μg RV CH
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1株抗体混匀15min，再加入50～100μl的10％BSA溶液进行封闭10min，置于冷冻离心机内4℃，10000rpm离心30min，弃上清液，沉淀用胶体金复溶液复溶至30～50μl，2～8℃储存备用；(3)包被质控线C、检测线T；(4)样品垫的预处理；(5)切割与组装；得到成品。6.根据权利要求5所述的用于检测大熊猫轮状病毒CH
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【专利技术属性】
技术研发人员：昝洁，陈翠翠，梁焕坤，钟树海，赖宏锐，郭桂铃，李来庆，宁波，
申请(专利权)人：广州优迪生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：