一种胶原材料及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及生物材料领域，具体涉及一种取自基因编辑动物的胶原材料及其制备方法和用途。利用本发明专利技术加工制备的胶原材料，通过基因编辑技术从原材料源头降低其免疫原性，使用优化的脱细胞处理技术和交联技术进一步降低其免疫原性。本发明专利技术的胶原材料免疫原性低、生物活性好，用于临床不同组织/器官的修复再生。用于临床不同组织/器官的修复再生。

【技术实现步骤摘要】
一种胶原材料及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及生物材料领域，特别涉及一种胶原材料及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]胶原蛋白简称胶原，是细胞外基质的主要成分，占动物体内蛋白质总量的20-30％，广泛存在于动物的结缔组织(骨、软骨、皮肤、腱、韧带等)中，对机体和脏器起着支持、保护、结合以及形成界隔等作用。在一般外科、皮肤、骨科、口腔外科、神经外科、心脏血管外科、美容整形、药物运输等医疗卫生领域广泛应用。
[0003]虽然胶原本身的免疫原性很低，但在实际提取过程中由于无法彻底清除杂蛋白和多糖等，可能引起免疫排斥反应。针对这一潜在问题，本专利技术通过基因编辑技术彻底敲除动物源性胶原材料中的某些特定抗原(如a-Gal抗原)，从原材料源头降低其免疫原性，使用优化的脱细胞处理技术和交联技术进一步降低其免疫原性。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种胶原材料及其制备方法和用途。利用本专利技术加工制备的胶原材料，通过基因编辑技术从原材料源头降低其免疫原性，使用优化的脱细胞处理技术和交联技术进一步降低其免疫原性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胶原材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、繁育基因编辑动物；步骤2、采集步骤1动物的胶原原材料作为原料；步骤3、取步骤2制得的所述原料脱细胞；所述脱细胞的次数至少为2次；步骤4、取步骤3制得的材料分解；所述分解的次数至少为2次；步骤5、取步骤4分解得到的材料通过超滤提纯胶原材料；步骤6、取步骤5得到的材料冻干提纯；其中，步骤3中所述脱细胞的方法包括物理方法、化学方法和/或生物方法；所述物理方法包括反复冻融、超声处理；所述化学方法包括十二烷基硫酸钠(SDS)处理；所述生物方法包括中性蛋白酶酶解；所述物理方法、化学方法或生物方法的处理次数分别为0～10次，且所述脱细胞的方法中至少有两种的处理次数不同时为0；所述反复冻融的冷冻温度为-20～-196℃(液氮)，冷冻时间为5min～24h，解冻温度为4～40℃，解冻时间为0.5～6h；所述超声处理的低频频率为10～40KHz，低频处理时间为5min～24h；高频频率为60～120KHz，高频处理时间为5min～24h；超声功率为100W～10KW，超声温度为0～40℃；所述中性蛋白酶的浓度范围为0.001～5wt.％，酶活为500～130000U/g，工作浓度范围为0.6～2.4U/ml，处理温度为0～40℃，振荡频率为50～3000rpm，处理时间为0.5～24h；所述SDS的浓度范围为0.001～5wt.％，振荡频率为100～3000rpm，处理温度为0～40℃，处理时间为0.5～24h；其中，步骤4中所述分解包括胃蛋白酶酶解、乙酸溶解或超声处理中的至少一种；所述超声处理的低频频率范围为10～40KHz，低频处理时间为1～24h，高频频率范围为60～120KHz，高频处理时间为1～24h，超声功率为1～10KW，超声温度为0～40℃；所述胃蛋白酶酶解中，胃蛋白酶的酶活为800～100000U/g；浓度范围为0.001～10wt.％，振荡频率为100～3000rpm，处理温度为0～40℃，处理时间为0.5～48h；所述乙酸溶解中乙酸浓度为0.001～20wt.％；所述胃蛋白酶酶解、乙酸溶解或超声处理的处理次数分别为0～10次，且所述分解中至少有两种的处理次数不同时为0。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3具体为：浸没于0.08wt.％中性蛋白酶溶液中，酶活为1000U/g，温度为25℃，振荡频率为100rpm，处理时间为8h；超声波清洗，110KHz处理30min，功率1KW，温度为10℃；浸没于0.1wt.％SDS溶液中12h，振荡频率为1000rpm，温度为30℃；超声波清洗，20KHz处理200min，功率5KW，温度为30℃；或浸没于1wt.％SDS溶液中6h，振荡频率为500rpm，温度为20℃；浸没于0.2wt.％中性蛋白酶溶液中，酶活为800U/g，温度为10℃，振荡频率为3000rpm，处理时间为12h；浸没于0.05wt.％SDS溶液中3h，振荡频率为400r...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜明春，潘登科，
申请(专利权)人：成都中科奥格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：