【技术实现步骤摘要】
一种胎盘干细胞的制备培养方法
[0001]本专利技术属于干细胞的分离制备
,具体是指一种胎盘干细胞的制备培养方法。
技术介绍
[0002]干细胞治疗技术是近年来生命科学领域的新兴技术,已经被应用到了多种难治性疾病的治疗研究中,并取得了积极的进展。目前,全球干细胞治疗市场可分为地中海贫血、脑瘫、糖尿病、白血病、自闭症等等。随着糖尿病等许多疾病发病率的逐年攀升,增加了对干细胞的临床需求,从而推动了干细胞治疗市场的发展。
[0003]胎盘是胎儿与母体之间进行物质交换的器官,起源于胚胎发育期胚外中胚层,是由间质、血管及滋养细胞组成,含有大量的间充质成分。从胎盘中提取出来的干细胞的细胞形态、增殖能力、表面抗原标志、基因表达等与骨髓间充质干细胞高度相似,而且也具有多向分化的潜能。
[0004]胎盘来源干细胞因取自生产后的胎盘组织,其收取过程对母体和新生儿不造成任何损伤,来源不受伦理学和临床医学的限制,是理想的干细胞资源。
技术实现思路
[0005]为了解决上述难题,本专利技术提供了一种可以提高干细胞的安全性,简化操作步骤的胎盘干细胞的制备培养方法。
[0006]为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案如下:一种胎盘干细胞的制备培养方法,包括如下步骤:
[0007]1)产妇筛查;
[0008]2)样本采集;
[0009]3)样本运输;
[0010]4)样本交接;
[0011]5)样本检测;
[0012]6)样本预处理;
[0013 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,包括如下步骤:1)产妇筛查;2)样本采集;3)样本运输;4)样本交接并编码;5)样本检测;6)样本预处理;7)细胞分离制备;8)原代培养;9)传代培养;10)细胞检测;11)建立可供检索的细胞信息档案;12)上传细胞信息档案。2.根据权利要求1所述的一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,所述步骤1)中产妇筛查后取5ml产妇外周血进行病原微生物检测。3.根据权利要求1所述的一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,所述步骤2)中样本采集,包括如下步骤:1)待胎儿娩出断脐后,采集5ml脐血用于病原微生物等检测;2)胎盘娩出后,用生理盐水冲洗掉胎盘表面的血渍;3)将胎盘置于装有400
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600ml储存液的采集盒中。4.根据权利要求1所述的一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,所述步骤6)中样本预处理,包括如下步骤:1)样本检测合格后,从采集盒中取出胎盘;2)用生理盐水中充分洗涤胎盘以洗净残血;3)用75%医用酒精消毒浸泡;4)再用生理盐水漂洗2
‑
3次。5.根据权利要求1所述的一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,所述步骤7)中的细胞分离制备,包括如下步骤:1)将预处理后的胎盘转移至工作台内,胎盘胎儿光滑面朝上,以脐带根部为中心划十字切口轻轻剥离羊膜;2)用眼科弯剪小心分离胎盘小叶,将剥离的胎盘小叶再次用生理盐水清洗干净,沥干水分;3)用眼科弯剪挑剪组织块,直至组织块呈肉糜状为止,将剪好的组织块转移至50ml离心管内,加入含有5
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20倍体积的0.05%
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0.25%的酶消化10
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120min后,加入5
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10倍体积的生理盐水终止消化,吹打混匀,按照1:(1
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3)的比例缓慢加入到分装好的淋巴细胞分离液中,离心机升1降1,1000
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2000rpm,4℃离心20分钟,取中间白膜层及白膜层上方细胞,再用生理盐水离心洗涤两次,离心机升9降9,1000
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2500rpm,4℃离心3
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10min。6.根据权利要求1所述的一种胎盘干细胞的制备培养方法,其特征在于,所述步骤8)中原代...
【专利技术属性】
技术研发人员:王晓宇,李崴,郭康合,林冠妃,王岱桑,李秋宛,吴清毅,
申请(专利权)人:海南优尼科尔生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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