一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途技术

本说明书一个或多个实施例提供一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途，将白扁豆花除杂洗净干燥后粉碎，提取及初富集，AB

【技术实现步骤摘要】
一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途


[0001]本说明书一个或多个实施例涉及白扁豆花黄酮的分离提纯
，尤其涉及一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途。

技术介绍

[0002]白扁豆为药食两用植物，又名扁豆，沿篱豆，蛾眉豆，系豆科植物扁豆Dolichos lablab L成熟种子。在我国大部分地区都有栽培。白扁豆花为扁豆属植物的干燥花。现代药理研究表明，白扁豆花具有消暑，化湿之功效。
[0003]体内自由基过多，可导致细胞和组织器官损伤、诱发各种疾病、加速机体衰老等。黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要的生物活性物质，现代医学研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、清除自由基、抗病毒、抗肿瘤、抑菌、保护心脑血管、调节免疫等方面的作用。随着人们生活水平的提高，工作节奏的加快，饮食结构的改变，我国患有糖尿病和高血脂症者日渐增多。长期服用治疗药物，多会产生各种不同程度的副作用。因此，从天然产物中寻找抗氧化、降血糖活性成分，或将其主结构作为先导化合物进而研发新药，或开发功能性食品，具有毒性小、研发费用低、周期短和全民保健的优势。
[0004]专利技术人在研究植物成分的提取过程中发现白扁豆花黄酮成分具有不同于其他植物黄酮成分的性质，在提取过程中现有的植物成分的提取、纯化的方法，无法适用于白扁豆花黄酮成分的提取、纯化，采用现有的提取方法，获取的白扁豆花黄酮成分的生物活性很低，导致无法进行白扁豆花黄酮成分的生物活性的研究。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本说明书一个或多个实施例的目的在于提出一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途，以解决现有技术中白扁豆花黄酮类化合物分离提纯存在的技术壁垒问题。
[0006]基于上述目的，本说明书一个或多个实施例提供了一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，包括如下步骤：
[0007]粉碎：将白扁豆花进行烘干，然后用粉碎机粉粹，过筛，得白扁豆花粉；
[0008]提取及初富集：用乙醇对白扁豆花粉进行回流萃取，然后用石油醚洗涤萃取液并收集下层水相，石油醚洗涤萃取液具有除去鞣制、皂苷类杂质，然后对收集的水相进行旋转蒸发，并用正丁醇萃取富集黄酮类化合物，对提取的黄酮类化合物减压旋转蒸发至浸膏；
[0009]分离：将浸膏复溶于水中，用不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，依次对洗脱液进行减压旋蒸发、冷冻干燥，得白扁豆花黄酮类化合物组分Fr.Ⅰ、Fr.Ⅱ、Fr.Ⅲ和Fr.Ⅳ；
[0010]纯化：取组分Fr.Ⅱ，用甲醇溶解，采用半制备高效液相色谱法进行白扁豆花黄酮类化合物提纯，得纯白扁豆花黄酮类化合物。
[0011]可选的，所述半制备高效液相色谱法包含如下工艺参数：
[0012]色谱柱：Sunfire C18柱，规格为：150mm
×
10mm I.D.，粒径为：5μm；流动相：乙腈(A)和0.5％的乙酸
‑
水(B)，柱温30℃，双通道波长为280nm和360nm。
[0013]可选的，所述半制备高效液相色谱法包含如下操作步骤：
[0014]梯度洗脱：0～5min采用10～17％乙腈溶液进行洗脱，5～10min采用17～19％乙腈溶液进行洗脱，10～25min采用19～26％乙腈溶液进行洗脱，25～26min采用26～10％乙腈溶液进行洗脱，26～28min采用10～10％乙腈溶液进行洗涤；
[0015]添加0.5％的乙酸水溶液至流动相中，检测并收集各流出物洗脱峰，得到保留时间Rt为11.732min、12.117min、13.345min、13.991min、15.361min、16.187min和16.531min 7个洗脱峰，然后减压旋转蒸发冻干，得到7个纯化白扁豆花黄酮化合物。
[0016]可选的，所述提取及初富集中乙醇的浓度为70％，温度为35℃。
[0017]可选的，所述分离中梯度洗脱的材料为AB
‑
8大孔树脂柱，乙醇水溶液的浓度依次为20％、30％、50％和70％。
[0018]可选的，所述分离中乙醇水溶液的用量为10BV，流速为5mL/min。
[0019]一种白扁豆花黄酮类化合物，采用权利要求所述的制备方法制备而成。
[0020]可选的，所述白扁豆花黄酮类化合物具有清除ABTS
+
·
、DPPH
·
DPPH
·
和对α
‑
葡萄糖苷酶体外抑制活性的作用。
[0021]可选的，所述白扁豆花黄酮类化合物应用在功能性食品中。
[0022]可选的，所述白扁豆花黄酮类化合物具有抗氧化、降血糖作用。
[0023]从上面所述可以看出，本说明书一个或多个实施例提供的一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，首先将白扁豆花进行粉碎，然后采用不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱得到白扁豆花黄酮类化合物4种成分，然后采用半制备高效液相色谱法对4种组分中的Fr.Ⅱ进行提纯，最终制备出的纯白扁豆花黄酮类化合物具有抗氧化、降血糖活性。同时，纯白扁豆花既是食品又是药品的花类植物，易栽培，开发其抗氧化、降血糖活性具备显著的经济和社会效益。
[0024]本申请提供的分离提纯的方法，通过不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱和半制备高效液相色谱法对提出的组分进行提纯的方法相互协作，分离提取的白扁豆花黄酮类化合物不仅更具有专一性，同时提高了提取的白扁豆花黄酮类化合物的生物活性，有利于进行白扁豆花黄酮成分的生物活性的研究。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本说明书一个或多个实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本说明书一个或多个实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0026]图1为本说明书一个或多个实施例白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法工艺流程图；
[0027]图2为本说明书一个或多个实施例获得7个白扁豆花黄酮类化合物的洗脱峰图；
[0028]图3为本说明书一个或多个实施例制备的白扁豆花黄酮类化合物在不同浓度条件下对α
‑
葡萄糖苷酶活性的抑制作用图。
具体实施方式
[0029]为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本公开进一步详细说明。
[0030]从植物中筛选提取有效清除自由基的能力的黄酮化合物，具有安全好、无致畸性和无致癌性等优点[鲁晓翔.黄酮类化合物抗氧化作用机制研究进展[J].食品研究与开发,2012,33(03):220
‑
224.]。α
‑
葡萄糖苷酶是机体内碳水化合物消化的一种关键酶，α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂是一类以延缓肠道碳水化合物吸收而达到治疗糖尿病的化合物，α
‑
葡萄糖苷酶抑制剂被认为是控制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，包括如下步骤：粉碎：将白扁豆花进行烘干，然后用粉碎机粉粹，过筛，得白扁豆花粉；提取及初富集：用乙醇对白扁豆花粉进行回流萃取，然后用石油醚洗涤萃取液并收集下层水相，然后对收集的水相进行旋转蒸发，并用正丁醇萃取富集黄酮类化合物，对提取的黄酮类化合物减压旋转蒸发至浸膏；分离：将浸膏复溶于水中，用不同梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，依次对洗脱液进行减压旋蒸发、冷冻干燥，得白扁豆花黄酮类化合物组分Fr.Ⅰ、Fr.Ⅱ、Fr.Ⅲ和Fr.Ⅳ；纯化：取组分Fr.Ⅱ，用甲醇溶解，采用半制备高效液相色谱法进行提纯，得纯白扁豆花黄酮类化合物。2.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述半制备高效液相色谱法包含如下工艺参数：色谱柱：Sunfire C18柱，规格为：150mm
×
10mm I.D.，粒径为：5μm；流动相：乙腈(A)和0.5％的乙酸
‑
水(B)，柱温30℃，双通道波长为280nm和360nm。3.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述半制备高效液相色谱法包含如下操作步骤：梯度洗脱：0～5min采用10～17％乙腈溶液进行洗脱，5～10min采用17～19％乙腈溶液进行洗脱，10～25min采用19～26％乙腈溶液进行洗脱，25～26min采用26～10％乙腈溶液进行洗脱，26～28min采用10～10％乙腈溶液进行洗涤；添加0.5％的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡为荣，岳丹伟，朱樱，李晶晶，汪玉玲，卓允允，王晴晴，
申请(专利权)人：安徽工程大学，
类型：发明
国别省市：