一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物的方法，包括以总黄酮苷提取物的样品溶液为原料，采用工业色谱技术动态轴向压缩柱系统纯化，双波长紫外在线检测器检测分离情况；根据柚皮芸香苷成分的出峰时间及色谱峰高度，收集所制二氢黄酮苷类化合物的洗脱液，收集起止时间为155-235min，并将洗脱液浓缩、干燥。制备的二氢黄酮苷类化合物纯度较高；且工艺重现性好、操作简单、制备时间短、有机溶剂用量少、经济环保、可大批量工业化生产等特点。等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物的方法


[0001]本专利技术属于中药活性成分分离纯化
，特别涉及一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物的方法。

技术介绍

[0002]柚皮芸香苷是一种二氢黄酮苷类化合物，文献报道广泛存在于枳壳、枳实、常山胡柚、化州柚、化橘红等中药材中，且在奥兰替胃康片、沉香化气片、陈香露白露片、小儿扶脾颗粒、胃苏颗粒、枳实消痞丸、藿香正气口服液等几十个中药品种中作为活性成分或代表性成分进行质量控制。但对于柚皮芸香苷等低含量成分研究还不充分，且由于该成分的含量低、分离过程繁琐复杂等问题，导致目前柚皮芸香苷成分无法大量制备，这严重限制了含柚皮芸香苷成分的药材及其相关产品质量控制。因而开发一种简单、快速分离纯化高纯度柚皮芸香苷成分的方法是当前研究的重点。
[0003]陈建维等报道了枳实中含柚皮芸香苷(一测多评法测定枳实中4种总黄酮类成分.中草药,2015,46(9):1374-1377)；杨丽丽等也报道了枳实中含柚皮芸香苷(枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的应用但未见报道该成分的制备方法，中国中医药信息杂志，2019,26(9):73-79)；CN101062165A公开了从中药枳实中提取得到的总黄酮提取物及其制备方法，但未发现有制备柚皮芸香苷单体化合物的现有技术。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，该方法有机溶剂用量少、制备过程简单、生产周期短、易于工业化。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现:
[0006]一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，包括以下步骤：
[0007]取总黄酮苷提取物，加入溶剂1将其溶解并配成一定浓度的溶液，过滤，得样品溶液；将样品溶液按一定进样量注入动态轴向压缩柱系统中，溶剂2洗脱，用双波长紫外在线检测器检测分离情况，根据柚皮芸香苷成分的出峰时间及色谱峰高度，收集所制柚皮芸香苷化合物的洗脱液，收集起止时间为155-235min，并将洗脱液浓缩、干燥。
[0008]优选的，所述总黄酮苷提取物为枳实和/或枳壳的总黄酮苷提取物；和/或，总黄酮苷提取物中柚皮芸香苷含量为2.0％-5.0％(W/W)，优选2.5％-3.5％(W/W)。
[0009]优选的，所述溶剂1为1.0-5.0％(V/V)乙腈水溶液或水，优选3.0％-3.5％(V/V)乙腈水溶液。
[0010]优选的，所述样品溶液浓度为85-125mg/mL；优选95-110mg/mL。
[0011]优选的，所述动态轴向压缩柱系统填料为反相聚合物填料，优选UniPS 40-300、UniPSN40-300或CG161M。
[0012]优选的，所述溶剂2为乙腈、水、磷酸的一种或多种；优选乙腈、水、磷酸的混合溶液。
[0013]优选的，所述混合溶液中乙腈-水-磷酸体积比为15-25:85-75:0.1；如：15:85:0.1、25:75:0.1、18:82:0.1。
[0014]优选的，所述洗脱流速为1250-2000mL/min；优选1500-1750mL/min；和/或，进样量为90-115L。
[0015]优选的，所述紫外在线检测器的检测波长283nm，参比波长为210nm。
[0016]优选的，所述浓缩为减压浓缩；和/或，浓缩的温度为40-50℃，优选45℃。
[0017]优选的，所述干燥为冷冻真空干燥；和/或，干燥温度为-25～-45℃，优选-35℃。
[0018]本专利技术的有益技术效果：
[0019]1、本专利技术采用工业色谱技术从总黄酮提取物中分离纯化制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷，如将枳实或枳壳总黄酮苷提取物直接通过动态轴向压缩柱系统进行分离纯化，得到柚皮芸香苷，其纯度可达99.0％以上，可解决柚皮芸香苷对照物质缺少的问题。
[0020]2、通过冷冻真空干燥，可很好的解决样品稳定性问题，确保样品的高纯度。
[0021]3、本专利技术利用工业色谱技术动态轴向压缩柱系统制备柚皮芸香苷，其可实现分离过程实时在线监测，具有重复性好、操作简单、制备时间短，有机溶剂用量少、分离出柚皮芸香苷纯度高等优点，且可以大批量工业化生产。
附图说明
[0022]图1：利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的工艺流程图；
[0023]图2：枳实总黄酮苷提取物HPLC色谱图；
[0024]图3：柚皮芸香苷HPLC色谱图。
具体实施方式
[0025]为了更好地理解本专利技术，通过以下实施例对本专利技术的技术方案进行进一步描述和说明。
[0026]实施例1
[0027]一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，工艺流程图如图1所示，具体步骤如下：
[0028]取枳实总黄酮苷提取物(其HPLC色谱图见图2)，其中柚皮芸香苷含量约为3.5％(W/W)，加入4.0％(V/V)乙腈水溶液将其溶解并配制成125mg/ml的溶液，过滤，备用，得样品溶液；将样品溶液90L，注入动态轴向压缩柱系统中，工业色谱填料为UniPSN 40-300(反相聚合物填料)，乙腈:水:磷酸溶液(15:85:0.1,V/V/V)为洗脱剂，洗脱流速为2000mL/min，紫外检测波长283nn，参比波长为210nm。根据柚皮芸香苷成分出峰时间及色谱峰的高度，收集所制柚皮芸香苷的洗脱液，收集起止时间为185-235min，并将含柚皮芸香苷纯度高的洗脱液在45℃减压浓缩后，-35℃条件下冷冻真空干燥12h，得到纯度99.41％的柚皮芸香苷354.38g(其HPLC色谱图见图3)。
[0029]实施例2
[0030]一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，工艺流程图
如图1所示，具体步骤如下：
[0031]取枳实总黄酮苷提取物，其中柚皮芸香苷含量约为2.5％(W/W)，加入3.0％(V/V)乙腈水溶液将其溶解并配制成85mg/ml的溶液，过滤，得样品溶液；将样品溶液115L，注入动态轴向压缩柱系统中，工业色谱填料为UniPS 40-300(反相聚合物填料)，乙腈:水:磷酸溶液(25:75:0.1,V/V/V)为洗脱剂，洗脱流速为1500mL/min，紫外检测波长283nn，参比波长为210nm。根据柚皮芸香苷成分出峰时间及色谱峰的高度，收集所制柚皮芸香苷的洗脱液，收集起止时间为155-205min，并将含柚皮芸香苷纯度高的洗脱液在45℃减压浓缩后，-35℃条件下冷冻真空干燥12h，得到纯度99.63％的柚皮芸香苷232.13g。
[0032]实施例3
[0033]一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，工艺流程图如图1所示，具体步骤如下：
[0034]取枳壳总黄酮苷提取物，其中柚皮芸香苷含量约为2.0％(W/W)，加入水将其溶解并配制成100m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用工业色谱技术制备二氢黄酮苷类化合物柚皮芸香苷的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：取总黄酮苷提取物，加入溶剂1将其溶解并配成一定浓度的溶液，过滤，得样品溶液；将样品溶液按一定进样量注入动态轴向压缩柱系统中，溶剂2洗脱，用双波长紫外在线检测器检测分离情况，根据柚皮芸香苷成分的出峰时间及色谱峰高度，收集所制柚皮芸香苷化合物的洗脱液，收集起止时间为155-235min，并将洗脱液浓缩、干燥。2.根据权利要求1所述的方法，所述总黄酮苷提取物为枳实和/或枳壳的总黄酮苷提取物；和/或，总黄酮苷提取物中柚皮芸香苷含量为2.0％-5.0％(W/W)；优选2.5％-3.5％(W/W)。3.根据权利要求1所述的方法，所述溶剂1为1.0-5.0％(V/V)乙腈水溶液或水；优选3.0％-3.5％(V/V)乙腈水溶液。4.根据权利要求1所述的方法，所述样品溶液浓度为85-125mg/mL；优选95-110mg/mL。5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘尧奇，王章伟，刘地发，黄冰峰，张功俊，刘玉华，古福生，刘芳芳，张九月，谢华萍，
申请(专利权)人：江西青峰药业有限公司，
类型：发明
国别省市：