针对埃博拉病毒糖蛋白的人抗体制造技术

本发明专利技术提供了与埃博拉病毒糖蛋白结合的单克隆抗体或其抗原结合片段，包含所述抗体的药物组合物及其使用方法。本发明专利技术的抗体用于抑制或中和埃博拉病毒活性，从而提供了一种治疗或预防人类埃博拉病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明专利技术提供了一种或多种与埃博拉病毒结合的抗体用于防止病毒附着至和/或进入宿主细胞的用途。本发明专利技术的抗体可以预防性或治疗性地使用，并且可以单独使用或与一种或多种其他抗病毒剂或疫苗联用。抗病毒剂或疫苗联用。抗病毒剂或疫苗联用。

【技术实现步骤摘要】
针对埃博拉病毒糖蛋白的人抗体
[0001]本申请是申请号为201680018389.X、申请日为2016年1月25日、专利技术名称为“针对埃博拉病毒糖蛋白的人抗体”的中国专利技术专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/US2016/014720的PCT国际申请的中国国家阶段申请，该国际申请要求申请日分别为2015年1月26日、2015年5月14日、2015年10月23日，申请号分别为62/107,581、62/161,356、62/245,703的美国临时申请的优先权。
专利

[0002]本专利技术涉及与埃博拉病毒糖蛋白结合的抗体，包含这些抗体的药物组合物及其使用方法。

技术介绍

[0003]埃博拉病毒(EBOV)和相关的丝状病毒在人类和非人灵长类动物中引起严重的病毒性出血热，在人类中爆发时具有高达约90％的死亡率。(Murin,C.D.等，(2014),Proc Natl Acad Sci USA,111(48):17182
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17187)。正在对媒介保护作用(mediate protection)的免疫机制进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的重组抗体或其抗原结合片段，所述分离的重组抗体或其抗原结合片段与埃博拉病毒(EBOV)和/或埃博拉病毒糖蛋白(EBOV
‑
GP)特异性结合，其中所述抗体具有一个或多个下述特征：(a)含有三个重链互补性决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个重链CDR包含在选自下组的任意一个重链可变区(HCVR)序列中：SEQ ID NO：18、66、146、2、34、50、82、98、114、130、162、178、194、210、226、242、258、274、290和306；所述三个轻链CDR包含在选自下组的任意一个轻链可变区(LCVR)序列中：SEQ ID NO：26、74、154、10、42、58、90、106、122、138、170、186、202、218、234、250、266、282和298；(b)是全人单克隆抗体；(c)根据在表面等离子体共振测定中进行的检测，以小于10
‑7M的解离常数(K
D
)与EBOV或表达EBOV
‑
GP的病毒样颗粒(VLP)结合；(d)在pH 5或pH 6时表现出的解离半衰期(t1/2)与pH 7.4时相比至少增加3倍；(e)表现出以从约10
‑
11
M至约10
‑9M的IC
50
中和扎伊尔埃博拉病毒；(f)表现出与表达EBOV
‑
GP的细胞结合触发抗体依赖性细胞毒性；(g)与选自下组的一个或多个EBOV毒株交叉反应：扎伊尔2014、扎伊尔1995、苏丹、本迪布焦和科特迪瓦；(h)与可溶性GP(sGP)结合；(i)与对照抗体交叉竞争，其中所述对照抗体包含重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列，所述重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列选自由表1中的任意HCVR和LCVR氨基酸序列组成的组。2.一种分离的重组抗体或其抗原结合片段，所述分离的重组抗体或其抗原结合片段与埃博拉病毒(EBOV)和/或埃博拉病毒糖蛋白(EBOV
‑
GP)特异性结合，其中所述抗体具有两个或多个下述特征：(a)是全人单克隆抗体；(b)根据在表面等离子体共振测定中进行的检测，以小于10
‑7M的解离常数(K
D
)与EBOV或表达EBOV
‑
GP的病毒样颗粒(VLP)结合；(c)在pH 5或pH 6时表现出的解离半衰期(t1/2)与pH 7.4时相比至少增加3倍；(d)表现出以从约10
‑
11
M至约10
‑9M的IC
50
中和扎伊尔埃博拉病毒；(e)表现出与表达EBOV
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GP的细胞结合触发抗体依赖性细胞毒性；(f)与选自下组的一个或多个EBOV毒株交叉反应：扎伊尔2014、扎伊尔1995、苏丹、本迪布焦和科特迪瓦；(g)与可溶性GP(sGP)结合；(h)与对照抗体交叉竞争，其中所述对照抗体包含重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列，所述重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列选自由表1中的任意HCVR和LCVR氨基酸序列组成的组。3.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含HCVR，所述HCVR具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：18、66、146、2、34、50、82、98、114、130、162、178、194、210、226、242、258、274、290和306。4.根据权利要求1
‑
3中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗
体或其抗原结合片段包含LCVR，所述LCVR具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：26、74、154、10、42、58、90、106、122、138、170、186、202、218、234、250、266、282和298。5.根据权利要求1
‑
4中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含：(a)HCDR1结构域，所述HCDR1结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：20、68、148、4、36、52、84、100、116、132、164、180、196、212、228、244、260、276、292和308；(b)HCDR2结构域，所述HCDR2结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：22、70、150、6、38、54、86、102、118、134、166、182、198、214、230、246、262、278、294和310；(c)HCDR3结构域，所述HCDR3结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：24、72、152、8、40、56、88、104、120、136、168、184、200、216、232、248、264、280、296和312；(d)LCDR1结构域，所述LCDR1结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：28、76、156、12、44、60、92、108、124、140、172、188、204、220、236、252、268、284和300；(e)LCDR2结构域，所述LCDR2结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：30、78、158、14、46、62、94、110、126、142、174、190、206、222、238、254、270、286和302；(f)LCDR3结构域，所述LCDR3结构域具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：32、80、160、16、48、64、96、112、128、144、176、192、208、224、240、256、272、288和304。6.根据权利要求1
‑
5中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含选自下组的HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQ ID NO：18/26、66/74、146/154、2/10、34/42、50/58、82/90、98/106、114/122、130/138、162/170、178/186、194/202、210/218、226/234、242/250、258/266、274/282、290/298和306/282。7.根据权利要求1
‑
6中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:20所示的HCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:22所示的HCDR2氨基酸序列；SEQ ID NO:24所示的HCDR3氨基酸序列；SEQ ID NO:28所示的LCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:30所示的LCDR2氨基酸序列以及SEQ ID NO:32所示的LCDR3氨基酸序列。8.根据权利要求1
‑
6中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:68所示的HCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:70所示的HCDR2氨基酸序列；SEQ ID NO:72所示的HCDR3氨基酸序列；SEQ ID NO:76所示的LCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:78所示的LCDR2氨基酸序列以及SEQ ID NO:80所示的LCDR3氨基酸序列。9.根据权利要求1
‑
6中任意一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148所示的HCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:150所示的HCDR2氨基酸序列；SEQ ID NO:152所示的HCDR3氨基酸序列；SEQ ID NO:156所示的LCDR1氨基酸序列；SEQ ID NO:158所示的LCDR2氨基酸序列以及SEQ ID NO:160所示的LCDR3氨基酸序列。10.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述分离的单克隆抗体或其抗原结合片段与包含HCVR中的多个CDR以及LCVR中的多个CDR的对照抗体或抗原结合片段竞争与EBOV和/或EBOV GP的结合，其中所述HCVR具有的氨基酸序列选自由表1中列出的HCVR序列组成的组，并且所述LCVR具有的氨基酸序列选自由表1中列出的LCVR序列组成的组。
11.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述分离的单克隆抗体或其抗原结合片段与包含HCVR中的多个CDR以及LCVR中的多个CDR的对照抗体或抗原结合至EBOV和/或EBOV GP上的相同表位，其中所述HCVR包含的氨基酸序列选自由表1中列出的HCVR序列组成的组，并且所述LCVR包含的氨基酸序列选自由表1中列出的LCVR序列组成的组。12.根据权利要求1
‑
11中任意一项所述的分离的抗体，其中所述抗体防止埃博拉病毒附着至和/或进入宿主细胞。13.一种中和感染性EBOV的方法，所述方法包括将被EBOV感染的细胞暴露于组合物，所述组合物包含一种或多种根据权利要求1
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12中任意一项所述的抗
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EBOV抗体或其抗原结合片段，其中所述暴露导致所述细胞对病毒感染或细胞死亡具有增强的保护作用。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述感染性EBOV在体外或体内被中和。15.根据权利要求13所述的方法，其中当将所述抗体单独使用，或者当将其与一种或多种其他治疗剂或抗
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EBOV治疗方式联用时，观察到所述增强的保护作用。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种其他治疗剂选自下组：抗病毒药、抗炎药(例如皮质类固醇和非甾体抗炎药)、EBOV的不同抗体、针对EBOV的疫苗、TKM埃博拉(靶向病毒RNA聚合酶的小干扰RNA)、布林西多福韦(CMX
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001)、法匹拉韦(T
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705)、BCX
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4430、AVI
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7537(靶向EBOV VP24基因的反义磷酰二胺吗啉代寡聚物)和干扰素。17.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种其他治疗剂包括一种或多种抗
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EBOV抗体。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述一种或多种抗
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EBOV抗体包含重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列，所述重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列选自由表1中的任意HCVR和LCVR氨基酸序列组成的组。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述一种或多种抗
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【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：