一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法技术

技术编号:29955808 阅读:31 留言:0更新日期:2021-09-08 08:56
本发明专利技术公开了一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,包括如下步骤:确定待检测的STR基因座,并规划STR基因座中各个荧光颜色通道的排布;设计多色荧光内标;在每一次DNA片段检测分析时,识别前期嵌入的多色荧光内标,动态构建相应的光谱校正矩阵,进行DNA荧光光谱的校正。利用本发明专利技术,不需要专门配备光谱校正试剂和独立设置的光谱校正环节,DNA检测技术人员无需关注光谱校正矩阵和试剂盒的对应,也不需要关注何时光谱校正失真需要重做等繁琐问题,显著降低了STR检测技术的应用复杂度,也无疑可以降低检测成本,具有良好的潜在经济效益和重要的应用价值。在经济效益和重要的应用价值。在经济效益和重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法


[0001]本专利技术涉及一种校正DNA荧光光谱的方法,尤其涉及一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,属于遗传物质检测


技术介绍

[0002]第一代DNA测序技术包括1975年由Frederick Sanger提出的链终止法以及1977年由Walter Gibert所专利技术的链降解法。其中,链终止法也称为Sanger法,其核心原理是:利用ddNTP的2

和3

基团都不含羟基,其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键,因此可以用来中断DNA合成反应。在4个DNA合成反应体系中,分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP(分别为:ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP),通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列。该方法的检测结果准确性高达99.999%,在行业内被认为是“金标准”;在司法鉴定、刑侦判定和遗传物质鉴定(基因诊断)等工作中发挥了重要作用。
[0003]STR(Short T本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)确定待检测的STR基因座,并规划所述STR基因座中各个荧光颜色通道的排布;(2)设计多色荧光内标;(3)在每一次DNA片段检测分析时,识别前期嵌入的所述多色荧光内标,动态构建相应的光谱校正矩阵,进行DNA荧光光谱的校正。2.如权利要求1所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,在预定间距的内标片段序列标记上不同颜色的荧光染料,得到所述多色荧光内标。3.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:所述预定间距为彼此相等的间距。4.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:所述多色荧光内标中,不同颜色标记的内标片段避免和待检测的STR基因座的bp段相近或重叠。5.如权利要求4所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:不同颜色标记的内标片段与待检测的STR基因座的bp段相距在10bp以上。6.如权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:张涛贾二惠郭甜利荣海博金川
申请(专利权)人:北京中盾安民分析技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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