一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒及其制备制造技术

本发明专利技术提供了一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法，其制备方法为：以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂制备得到介孔二氧化硅纳米粒，加入经N‑(3‑二甲基氨基丙基)‑N’‑乙基二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺钠盐活化后的叶酸溶液，反应至完全后分离得到的叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒中加入闹羊花素III溶液，反应至完全后分离获得叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒。本发明专利技术的叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的制备方法简单，且具有良好靶向性和缓释作用。

【技术实现步骤摘要】
一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒及其制备
本专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米及其制备方法。
技术介绍
闹羊花素III(RhodojaponinIII，RJ-III)，是传统中药羊踯躅(RhododendronmolleG.Don)中最具代表性的的二萜类成分，广泛分布于羊踯躅植物的各个药用部位中，包括花、根、果实中均有发现。RJ-III是一种白色针状结晶，化学式为C20H32O6，相对分子质量为368.2，熔点为278～284℃，甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂中溶解性较好，10mg/mL的RJ-III乙醇溶液的比旋度为-50°～-60°。现代药理研究表明闹羊花素III具有广泛的药理活性，如镇痛、抗炎、降血压等。但RJ-III较强的急性毒性与体内的快速消除，限制其的新药开发。闹羊花素III的结构式如下图所示：介孔二氧化硅纳米粒(mesoporoussilicananoparticles，MSN)是一种二氧化硅固体纳米颗粒，粒径通常介于10～600nm、孔径介于2～50nm之间。MSN具有许多独特的性能，包括介孔通道的排列非常规则、比表面积较大、内孔空间大、孔径较狭小且可调、表面易于进行修饰、毒性较低、生物相容性良好等优点。构建载闹羊花素III的介孔二氧化硅纳米粒，对于提高闹羊花素III的安全性具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种叶酸修饰的载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法，以解决闹羊花素III在体内消除快，急性毒性剂量低的技术问题。为了实现上述技术目的，本专利技术采用了以下技术方案：一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒，以叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒为载体，负载闹羊花素III；所述的叶酸修饰的载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的粒径为116～130nm，Zeta电位为21～26mV，包封率为11％～22％，载药量为5％～20％。上述叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，其特征在于，步骤包括：将叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒与闹羊花素III在甲醇溶液混合，避光，旋转混合2-48h后，离心去除游离的闹羊花素III，取沉淀冷冻干燥，得到叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒。优选的，所述闹羊花素III甲醇溶液的浓度为3mg/mL。所述叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒与闹羊花素III的投加质量比例为3～25mg∶3mg。优选的，所述离心条件为：10000～12000r/min离心30～45min。所述的，叶酸修饰介孔二氧化硅纳米粒的制备方法如下：介孔二氧化硅纳米粒分散于无水乙醇溶液中，加入活化的叶酸，避光，室温下混合2h，洗涤，离心，得到叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒。优选的，叶酸活化时，叶酸、N-羟基琥珀酰亚胺钠盐、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基二亚胺盐酸盐的质量比为1∶0.25～1∶0.5～1。优选的，介孔二氧化硅纳米粒的制备就是以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂。此方法制备的叶酸修饰介孔二氧化硅纳米粒的内外表面稳定的接入了叶酸分子，介孔有序分布，具有较大的比表面和孔容，为载闹羊花素III提供了良好的载体条件。上述方法制备的叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒，包封率为11～22％。本专利技术制备的叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒透射电镜下呈圆形或类圆形，粒径分布均匀，粒径为116～130nm，Zeta电位为21～26mV，载药量为5％～20％，并在炎症细胞中具有靶向聚集，同时具有缓释特征。因此，上述叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒可用于抗炎、免疫系统疾病的治疗。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒，制备方法简单，对炎症细胞的靶向性较好，可以延缓闹羊花素III的释放，提高闹羊花素III在体内的安全性，起到了减毒增效的作用，作为闹羊花素III抗炎靶向递药系统具有较好的应用前景。附图说明图1为实施例1制备的叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的透射电镜图。图2为闹羊花素III原药、载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒、叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒体外释放图。图3为闹羊花素III原药、载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒、叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒对脂多糖激活的RAW264.7细胞的增殖抑制率图。具体实施方式实施例1一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，包括：1)称取0.5g十六烷基三甲基氯化铵溶于超纯水，加热至完全溶解为止；然后将20mL超纯水、冷却后的十六烷基三甲基氯化铵溶液、69μL三乙胺混合，预热1h后，逐滴加入1.5mL正硅酸乙酯，反应1h后，将三口烧瓶取出放置在室温环境中，自然冷却。2)将冷却后的溶液离心弃上清液，所得的颗粒重新分散在20mL无水乙醇中，并加入30mg硝酸铵，超声2h，离心弃上清液。向所得颗粒中加入20mL无水乙醇进行超声分散，即得介孔二氧化硅初始纳米粒MSN。3)取5mL的5mg/mLMSN置于15mL离心管中，离心弃去上清液(11000r/min，30min)；称取3.0mg叶酸置于15mL离心管中，加入1mL无水乙醇，超声使溶解；向超声溶解后的叶酸溶液加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基二亚胺盐酸盐与N-羟基琥珀酰亚胺钠盐，在室温下活化半小时；将活化好的叶酸溶液加入MSN固体颗粒中，并补加4mL乙醇，超声溶解，然后将所得溶液避光反应2h，反应完成后将所得溶液离心弃上清液，并用乙醇洗涤三次，即得叶酸修饰介孔二氧化硅纳米粒FA-MSN。4)精密称取3mg闹羊花素III样品置于2mL离心管中，加入1mL甲醇，超声溶解；向所得3mgFA-MSN固体颗粒中加入1mL闹羊花素III甲醇溶液，将混合液避光反应24h，反应完成后将所得溶液离心弃上清液，并用乙醇洗涤三次，即得叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒RJ-III@FA-MSN。利用高倍透射电子显微镜观察制备的RJ-III@FA-MSN的形貌；采用激光粒度仪测定纳米粒的粒径、粒径分布和Zeta电位，结果见表1。所得RJ-III@FA-MSN外观均为规整的圆球形，形态分布均匀，无黏连，具有介孔结构。载药前后粒径、电位均无明显变化。表1FA-MSN和RJ-III@FA-MSN粒径、PDI、Zeta电位包封率和载药量的测定仪器工作条件采用WatersACQUITYHSST3色谱柱(2.1×50mm，1.8μm)；流动相：水(A)-乙腈(B)；梯度洗脱：0.01～0.20min，23％～23％B、0.20～1.10min，23％～50％B、1.10～1.20min，50％～98％B、1.20～1.70min，98％～98％B、1.70～1.75min，98％～23本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，其特征是包括如下步骤：/n1)以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂，反应至完全，离心分离获得介孔二氧化硅纳米粒；/n2)以质量比为1∶0.25～1∶0.5～1的叶酸、N-羟基琥珀酰亚胺钠盐、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基二亚胺盐酸盐混合，反应至完全，获得活化后的叶酸溶液；/n3)在介孔二氧化硅纳米粒溶液中加入活化后叶酸溶液，反应至完全，离心分离获得叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒；/n4)以质量比为3～25∶3的叶酸修饰介孔二氧化硅纳米粒甲醇溶液和闹羊花素III甲醇溶液混合，反应至完全后离心分离获得叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒。/n

【技术特征摘要】
1.一种叶酸修饰载闹羊花素III介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，其特征是包括如下步骤：
1)以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂，反应至完全，离心分离获得介孔二氧化硅纳米粒；
2)以质量比为1∶0.25～1∶0.5～1的叶酸、N-羟基琥珀酰亚胺钠盐、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基二亚胺盐酸盐混合，反应至完全，获得活化后的叶酸溶液；
3)在介孔二氧化硅纳米粒溶液中加入活化后叶酸溶液，反应至完全，离心分离获得叶酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒；
4)以质量比为3～25∶3...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵春草，杨清云，刘敏臣，张继全，冯怡，薛原，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：上海;31