用于诊断阿尔茨海默病的产品制造技术

本发明专利技术公开了用于诊断阿尔茨海默病的产品，所述的产品包括检测样本中生物标志物组合的表达水平的试剂。ROC曲线分析显示，本发明专利技术的生物标志物组合具有较高的AUC值。根据本发明专利技术的研究成果，可以将本发明专利技术的生物标志物组合应用于阿尔茨海默病的诊断中。

【技术实现步骤摘要】
用于诊断阿尔茨海默病的产品
本专利技术属于生物医药领域，涉及用于诊断阿尔茨海默病的产品。
技术介绍
阿尔茨海默病(AlzheimerDisease，AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征，病因迄今未明。65岁以前发病者，称早老性痴呆；65岁以后发病者称老年性痴呆。患者通常在症状出现后可存活8至10年，但疾病的病程可以为1至25年。通常由肺炎、营养不良或一般身体消耗(活动)引起死亡。2015年，全球痴呆患者人数已达4680万人，其中50％-75％为阿尔茨海默病患者，有约990万例新发痴呆患者将被诊断，平均每3秒新增1人，预计到2050年将达1.31亿人。研究表明，老年性痴呆是继肿瘤、心脏病、脑血管病之后引起老年人死亡的第四大病因，花费在所有疾病中排第三位。随着我国人口的老龄化，阿尔茨海默病患者持续增加。目前，我国大约有600万患者，数量居全球之首，而且每年平均有30万新发病例，也是全球增速最快的国家之一。阿尔茨海默病可能是一组异质性疾病，涉及很多因素，如遗传、外伤、病毒感染、其他疾病等等，但其发病机制尚不清楚，其中一个主要机制为β分泌酶l(β-siteamyloidprecursorprotein-cleavingenzyme，BACE1)裂解淀粉样前蛋白(amyloidprecursorprotein，APP)形成的淀粉样斑块在神经元聚集，打破了Aβ42/Aβ40的平衡状态，产生神经毒性。AD与其他类型的痴呆，如血管性痴呆(VaD)、帕金森病性痴呆(PDD)、行为变异性额颞叶痴呆(bvFTD)、路易体痴呆(DLB)等，可能存在重叠的临床表现、病理和生物标志物，往往导致临床诊断困难。基于上述问题，AD的临床治疗急需一种可有效诊断AD的方法。
技术实现思路
本专利技术提供了一种生物标志物组合，所述生物标志物包括LOC653658、CLC、RPL26和RPL31。本专利技术还提供了前面所述的生物标志物组合的检测试剂在制备诊断阿尔茨海默病的产品中的应用。在本专利技术中，术语“生物标志物”意指化合物，优选是基因，与来自具有第二表型(例如没有疾病)的受试者或一组受试者的生物样品相比，它在来自具有第一表型(例如患有疾病)的受试者或一组受试者的生物样品中差异地存在(即增加或减少)。术语“生物标志物”通常是指一种基因的存在/浓度/含量或两种或更多种基因的存在/浓度/含量。术语“受试者”意指任何动物，还指人类和非人类的动物。术语“非人类的动物”包括所有脊椎动物，例如，哺乳动物，如非人灵长类动物(特别是高等灵长类动物)、绵羊、狗、啮齿类动物(如小鼠或大鼠)、豚鼠、山羊、猪、猫、兔、牛、和任何家畜或宠物；以及非哺乳动物，如鸡，两栖类，爬行动物等。生物标志物可以在任何水平上差异地存在，但是一般以如下的水平存在，所述水平增加了至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少100％、至少110％、至少120％、至少130％、至少140％、至少150％、或更多；或一般以如下的水平存在，所述水平减少了至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或100％(即不存在)。优选地，生物标志物以具有统计显著性(即p值小于0.05和/或q值小于0.10，如使用韦尔奇氏T检验(Welch'sT-test)或Wilcoxon秩和检验(Wilcoxon'srank-sumTest)所确定的水平差异地存在。进一步，所述的试剂包括引物、探针、抗体。术语“引物”指的是能够形成与模板链互补的碱基对(basepair)，并且起到用于复制模板链的起始点作用的7个～50个核酸序列。引物通常合成而得，但也可以使用自然生成的核酸。引物的序列并不一定需要与模板的序列完全相同，只要充分互补而能够与模板杂交即可。可以混入不改变引物的基本性质的追加特征。作为可以混入的追加特征的例子，有甲基化、带帽、一个以上的核酸被同系物取代和核酸间的修饰，但不限于此。术语“核酸”泛指：染色体的段；DNA、cDNA和/或RNA的段或部分。核酸可以自最初与任何源分离的核酸样本(例如，与样本DNA或RNA分离、从样本DNA或RNA纯化、扩增、克隆或逆转录)获取或获得。术语“探针”指的是能与另一分子的特定序列或亚序列或其它部分结合的分子。除非另有指出，术语“探针”通常指能通过互补碱基配对与另一多核苷酸(往往称为“靶多核苷酸”)结合的多核苷酸探针。根据杂交条件的严谨性，探针能和与该探针缺乏完全序列互补性的靶多核苷酸结合。探针可作直接或间接的标记，其范围包括引物。杂交方式包括，但不限于：溶液相、固相、混合相或原位杂交测定法。本专利技术还提供了一种诊断阿尔茨海默病的产品，所述的产品包括检测样本中前面所述的生物标志物组合的基因表达水平的试剂。进一步，所述的产品包括试剂盒、芯片或试纸条。进一步，所述的试剂包括通过PCR、原位杂交、芯片、高通量测序平台或免疫法检测所述生物标志物组合的表达水平的试剂，优选地，所述的PCR包括逆转录PCR或实时定量PCR。在本专利技术中，试剂盒还包括容器、使用说明书、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂，以及附有试剂盒的使用说明书，其中记载了如何采用试剂盒进行检测，和如何利用检测结果对疾病发展进行判断、对治疗方案进行选择。本专利技术所述的试剂盒可包含适于实用(如针对于不同的检测方法)的多种不同的试剂，并不限于目前所列举的试剂，只要是基于前面所述的生物标志物组合的检测来诊断阿尔茨海默病的试剂均包含在本专利技术范围内。进一步，所述的产品还包括处理样本的试剂。本专利技术还提供了生物标志物在构建预测阿尔茨海默病的计算模型或者嵌入了所述计算模型的系统中的应用，所述的生物标志物包括权利要求1所述的生物标志物组合；优选的，所述计算模型以生物标志物表达水平作为输入变量，通过生物信息学方法进行运算，输出疾病的风险概率。正如熟练技术人员知道的，可以以不同方式实施和实现将标志物水平与某种可能性或风险关联起来的步骤。优选地，在数学上组合标志物和一种或多种其它标志物的测定浓度，并将组合值与根本的诊断问题关联起来。可以通过任何适宜的现有技术数学方法将标志物值的测定组合。优选地，在标志物组合中应用的数学算法是一种对数函数。优选地，应用此类数学算法或此类对数函数的结果是单一值。根据根本的诊断问题，能容易地将此类值与例如个体关于阿尔茨海默病的风险或与有助于评估阿尔茨海默病患者的其它有意诊断用途关联起来。以一种优选的方式，此类对数函数是如下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物包括LOC653658、CLC、RPL26和RPL31。/n

【技术特征摘要】
1.一种生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物包括LOC653658、CLC、RPL26和RPL31。


2.权利要求1所述的生物标志物组合的检测试剂在制备诊断阿尔茨海默病的产品中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的试剂包括引物、探针、抗体。


4.一种诊断阿尔茨海默病的产品，其特征在于，所述的产品包括检测样本中权利要求1所述的生物标志物组合的基因表达水平的试剂。


5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述的产品包括试剂盒、芯片或试纸条。


6.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述的试剂包括通过PCR、原位杂交、芯片、高通量测序平台或免疫法检测所述生物标志物组合的表达水平的试剂，优选地，所述的PCR包括逆转录PCR或实时定量PCR。


7.根据权利要求4-6任一项所述的产品，其特征在于，所述的产品还包括处理样本的试剂。


8.生物标志物在构建预测阿尔茨海默病的计算模型或者嵌入了所述计算模型的系统中的应用，其特征在于，所述的生物标志物包括权利要求1所述的生物标志物组合；
优选的，所述计算模型...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘新，孙鹏涛，王金丽，
申请(专利权)人：河北医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：河北;13