小扁豆凝集素在制备预防和治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了小扁豆凝集素在制备预防和治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用，本发明专利技术首次发现小扁豆凝集素能够同时对SARS‑CoV‑2及SARS‑CoV‑2流行性突变株表现出较好的抗病毒活性，具有显著的抑制作用，且未表现出细胞毒性，可作为抑制SARS‑CoV‑2和SARS‑CoV‑2流行性突变株的候选药物，应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
小扁豆凝集素在制备预防和治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用
本专利技术属于生物医药
，具体而言，涉及小扁豆凝集素在制备预防和治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用。
技术介绍
冠状病毒(Coronaviruses，CoVs)在自然界中广泛存在，其自然宿主包括人类和其他哺乳动物如牛、猪、犬、猫、鼠和蝙蝠等。冠状病毒是一种有包膜的、非节段的单股正链RNA病毒，属于巢病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)正冠状病毒亚科(Ortho-coronavirinae)，由于病毒包膜上有向四周伸出的突起，形似花冠而得名，冠状病毒亚科进一步细分为四类，即α、β、γ和δ冠状病毒(FehrAR,PerlmanS.Coronaviruses:anoverviewoftheirreplicationandpathogenesis[J].Coronaviruses,2015:1-23.)，目前，已经鉴定出7种可感染人类的冠状病毒，其中，2种为α属冠状病毒，包括HCoV-229E和HCoV-NL63，5种为β属冠状病毒，包括严重急性呼吸综合征相关冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征相关冠状病毒(MERS-CoV)、HCoV-OC43、HCoV-HKU1和新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。SARS-CoV-2、SARS-CoV和MERS-CoV为高致病性冠状病毒，可引起急性呼吸窘迫综合征(Acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS)，甚至多器官损伤和衰竭等，目前尚无特效疫苗或药物用于预防和治疗高致病性冠状病毒的感染，临床上主要采取对症治疗和支持治疗。近期，一些新检测到的具有全球流行性的SARS-CoV-2突变株引起了全世界的关注，在目前已经检测分离到的SARS-CoV-2突变株中，发生在Spike蛋白(S蛋白)受体结合域的多个突变是主要的突变类型，Spike蛋白受体结合域是新冠病毒结合宿主受体的主要结构，该结构的突变则有可能导致增强与受体的亲和力、减弱中和抗体效应或者造成病毒的免疫逃逸，其中，D614G突变增强了SARS-CoV-2的感染能力(DaniloskiZ,JordanTX,IlmainJK,etal.TheSpikeD614GmutationincreasesSARS-CoV-2infectionofmultiplehumancelltypes[J].Elife,2021,10:e65365.)，与D614G组合的突变株(D614G+I472V，D614G+A435S)降低了对中和抗体的敏感性(LiQ,WuJ,NieJ,etal.TheimpactofmutationsinSARS-CoV-2spikeonviralinfectivityandantigenicity[J].Cell,2020,182(5):1284-1294.e9.)，K417N、E484K和N501Y突变株介导的病毒感染性、中和抗性增强，最近出现的SARS-CoV-2突变株B.1.1.7(501Y.V1)、B.1.351(501Y.V2)和P.1(501Y.V3)对中和抗体具有更高的抗性、传播性更强。针对当前出现的SARS-CoV-2流行性突变株，本专利技术的目的在于提供一种同时对SARS-CoV-2及SARS-CoV-2流行性突变株均具有较好的抗病毒活性的物质，所述物质为小扁豆凝集素(Lentillectin)，分子量为52.5kD，可同时与高甘露糖型、以及末端具有GlcNac的N糖结合，来源于兵豆属的小扁豆(Lensculinaris)，本专利技术经实验研究首次发现小扁豆凝集素具有有效的抗SARS-CoV-2和SARS-CoV-2流行性突变株的活性，且未表现出细胞毒性，可作为抑制SARS-CoV-2和SARS-CoV-2流行性突变株的候选药物，具有较高的临床应用价值和市场价值。目前，关于小扁豆凝集素在制备预防和治疗SARS-CoV-2及SARS-CoV-2流行性突变株引起的感染性疾病的药物中的应用，尚未见报道。
技术实现思路
针对当前出现的SARS-CoV-2流行性突变株，本专利技术的目的在于提供小扁豆凝集素在制备预防和治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用，所述小扁豆凝集素能够同时对SARS-CoV-2及SARS-CoV-2流行性突变株表现出较好的抗病毒活性，具有显著的抑制作用，且未表现出细胞毒性，可作为抑制SARS-CoV-2和SARS-CoV-2流行性突变株的候选药物。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面提供了小扁豆凝集素在制备预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用；优选地，所述小扁豆凝集素通过抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合而在早期发挥抗冠状病毒的作用；更优选地，所述小扁豆凝集素通过与冠状病毒S蛋白上的糖基化位点N234、N165、N343特异性结合而抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合。进一步，所述冠状病毒包括SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、及其突变株；优选地，所述冠状病毒为SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、及其突变株；更优选地，所述突变株包括B.1.1.7、B.1.351、P.1、D614G+I472V、D614G+A435S、A222V、K417N、S477N、E484K、N501Y、A222V+D614G、K417N+D614G、S477N+D614G、E484K+D614G、N501Y+D614G；最优选地，所述突变株为B.1.1.7、B.1.351、P.1。本专利技术的第二方面提供了一种用于预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物组合物。所述药物组合物包括小扁豆凝集素；优选地，所述药物组合物还可包括药学上可接受的载体和/或赋形剂；更优选地，所述药学上可接受的载体和/或赋形剂包括抑菌剂、粘膜吸收促进剂、保护剂中的一种或多种；最优选地，所述抑菌剂选自山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸、对羟基苯甲酸酯类、苯甲酸和山梨酸钾联合使用中的一种或多种；最优选地，所述粘膜吸收促进剂选自甘露醇、磷脂、表面活性剂、环糊精及其衍生物、甘草次酸及其衍生物、肽和蛋白质水解酶抑制剂、金属离子螯合剂中的一种或多种，最优选地，所述保护剂选自神经生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、人白蛋白、脑源性神经营养因子、透明质酸酶、神经胶质生长因子、生长分化因子、神经调节蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、白血病抑制因子、白介素、类干扰素活性物质、肿瘤坏死因子、神经生长相关蛋白中的一种或多种。所述药物组合物为药学上可接受的任意剂型，包括片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、混悬剂、溶液剂中的至少一种。进一步，所述载体和/或辅料包括药学上可接受的载体、稀释本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.小扁豆凝集素在制备预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用；/n优选地，所述小扁豆凝集素通过抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合而在早期发挥抗冠状病毒的作用；/n更优选地，所述小扁豆凝集素通过与冠状病毒S蛋白上的糖基化位点N234、N165、N343特异性结合而抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合。/n

【技术特征摘要】
1.小扁豆凝集素在制备预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物中的应用；
优选地，所述小扁豆凝集素通过抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合而在早期发挥抗冠状病毒的作用；
更优选地，所述小扁豆凝集素通过与冠状病毒S蛋白上的糖基化位点N234、N165、N343特异性结合而抑制冠状病毒S蛋白与细胞上的ACE2受体蛋白的结合。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述冠状病毒包括SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、及其突变株；
优选地，所述冠状病毒为SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、及其突变株；
更优选地，所述突变株包括B.1.1.7、B.1.351、P.1、D614G+I472V、D614G+A435S、A222V、K417N、S477N、E484K、N501Y、A222V+D614G、K417N+D614G、S477N+D614G、E484K+D614G、N501Y+D614G；
最优选地，所述突变株为B.1.1.7、B.1.351、P.1。


3.一种用于预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括小扁豆凝集素；
优选地，所述药物组合物还可包括药学上可接受的载体和/或赋形剂；
更优选地，所述药学上可接受的载体和/或赋形剂包括抑菌剂、粘膜吸收促进剂、保护剂中的一种或多种；
最优选地，所述抑菌剂选自山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸、对羟基苯甲酸酯类、苯甲酸和山梨酸钾联合使用中的一种或多种；
最优选地，所述粘膜吸收促进剂选自甘露醇、磷脂、表面活性剂、环糊精及其衍生物、甘草次酸及其衍生物、肽和蛋白质水解酶抑制剂、金属离子螯合剂中的一种或多种，
最优选地，所述保护剂选自神经生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、人白蛋白、脑源性神经营养因子、透明质酸酶、神经胶质生长因子、生长分化因子、神经调节蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、白血病抑制因子、白介素、类干扰素活性物质、肿瘤坏死因子、神经生长相关蛋白中的一种或多种。


4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为药学上可接受的任意剂型，包括片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、混悬剂、溶液剂中的至少一种。


5.一种体外非治疗性地抑制冠状病毒产生细胞病变效应和/或抑制冠状病毒增殖的方法，其特征在于，所述方法包括给有需要的受试对象施用小扁豆凝集素或权利要求3或4所述的药物组合物；
优选地，所述小扁豆凝集素的使用剂量为40-80μg/mL。


6.一种筛选预防和/或治疗冠状病毒引起的感染性疾病的候选药物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)提供待测化合物以及阳性对照化合物，所述的阳性对照化合物为小扁豆凝集素；
(2)在测试组中，检测步骤(1)中所述待测化合物对冠状病毒产生的细胞病变效应的抑制程度和/或对冠状病毒增殖的抑制程度，并与阳性对照组以及阴性对照组中相应的实验结...

【专利技术属性】
技术研发人员：王佑春，王兰，黄维金，王文波，李倩倩，吴佳静，武刚，于传飞，郭璐韵，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11