改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法技术

本发明专利技术涉及一种改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法，包括在细胞培养基中培养表达重组糖蛋白的真核细胞，其中细胞培养基补充了岩藻糖、锰和牛磺酸，其中所产生的重组糖蛋白的糖基化谱被改变，使得与没有所述补充培养时相比，更类似于参考糖蛋白的糖基化谱。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法专利
本专利技术涉及一种改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法，包括在细胞培养基中培养表达重组糖蛋白的真核细胞，其中细胞培养基补充了岩藻糖、锰和牛磺酸，其中所产生的重组糖蛋白的糖基化谱被改变，使得相比于没有所述补充培养时，更类似于参考糖蛋白的糖基化谱。专利技术背景糖蛋白对于包括先天免疫系统和适应性免疫系统在内的免疫系统所有分支的正常功能是至关重要的。例如，糖蛋白经由补体依赖的细胞毒作用(CDC)和抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)参与威胁的识别、结合、信号转导和消除(Rudd等，Science，291，2001，2370-2376；和Jefferis等，ImmunolRev，163，1998，59-76)。哺乳动物表达的抗体在其重链(HC)的Asn残基上带有单个聚糖。聚糖结构的存在和组成影响抗体的受体结合和效应子功能(Rudd等，Science，291，2001，2370-2376；和Jefferis等，ImmunolRev，163，1998，59-76)。例如，Ig本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法，包括：/n在细胞培养基中培养表达重组糖蛋白的真核细胞，其中细胞培养基补充了岩藻糖、锰和牛磺酸，/n其中所产生的重组糖蛋白的糖基化谱被改变，使得与没有所述补充培养时相比，更类似于参考糖蛋白的糖基化谱。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181107 HU P18003761.一种改变细胞培养物中产生的重组糖蛋白的糖基化谱的方法，包括：
在细胞培养基中培养表达重组糖蛋白的真核细胞，其中细胞培养基补充了岩藻糖、锰和牛磺酸，
其中所产生的重组糖蛋白的糖基化谱被改变，使得与没有所述补充培养时相比，更类似于参考糖蛋白的糖基化谱。


2.根据权利要求1所述的方法，其中改变的糖基化谱包括岩藻糖基化谱和/或半乳糖基化谱中的一种或多种。


3.根据权利要求2所述的方法，其中改变的岩藻糖基化谱是参考糖蛋白的岩藻糖基化谱的至少90％，优选至少95％，更优选至少96％，更优选至少98％，和/或改变的半乳糖基化谱是参考糖蛋白的半乳糖基化谱的至少90％，优选至少95％，更优选至少96％，更优选至少98％。


4.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中培养基中的岩藻糖浓度通过补充提高0.4mM至1.6mM，优选0.4mM至1.2mM，更优选0.6mM至1mM。


5.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中培养基中的锰浓度通过补充提高0.02μM至0.1μM，优选0.04μM至0.08μM，更优选0.06μM至0.08μM。


6.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中补充后培养基中的牛磺酸终浓度为12.5mM至50mM，优选15mM至35mM，更优选20mM至30mM。


7.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中该方法进一步包括从细胞培养物分离所产生的重组糖蛋白的步骤。


8.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中真核细胞是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。


9.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中以大规模生产重组糖蛋白。


10.根据之前任一项权利要求所述的方法，其中重组糖蛋白是IgG型的免疫球蛋白。


11.根据之前任一项权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·帕尔塔，A·普蒂奇，T·巴洛格，B·霍瓦斯，G·纳吉，
申请(专利权)人：吉瑞工厂，
类型：发明
国别省市：匈牙利;HU