中和肺炎链球菌溶血素蛋白的抗原结合蛋白及其用途制造技术

本申请涉及一种分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，LCDR1，LCDR2和LCDR3，所述HCDR1包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，所述HCDR2包含SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列，所述HCDR3包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述LCDR1包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列，所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列，且所述LCDR3包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。所述抗原结合蛋白能够特异性结合肺炎链球菌溶血素蛋白。本申请还提供了所述分离的抗原结合蛋白的制备方法及其用途。

【技术实现步骤摘要】
中和肺炎链球菌溶血素蛋白的抗原结合蛋白及其用途
本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种能够靶向肺炎链球菌溶血素蛋白(PLY)的抗原结合蛋白。
技术介绍
肺炎链球菌又称肺炎球菌，广泛定植在人类鼻咽部，在机体抵抗力低下时可引起肺部或者中枢神经系统感染，严重时形成菌血症或者脓毒症。溶血素(PLY)是肺炎链球菌重要的毒力因子，在肺炎链球菌形成感染过程中发挥重要作用。PLY可以破坏肺组织上皮、内皮及免疫细胞，增加血管通透性及肺炎链球菌定植、传播和侵袭，并影响患者肺功能，形成急性肺损伤，甚至急性呼吸窘迫综合征。因此，亟需开发有效的对抗肺炎链球菌感染的药物。
技术实现思路
本申请提供了一种分离的抗原结合蛋白，其具有下述性质中的一种或多种：1)能够特异性结合肺炎链球菌溶血素蛋白及其变体；2)对肺炎链球菌溶血素蛋白具有高亲和力及中和活性；3)能有效阻断肺炎链球菌形成的感染；4)能够有效预防和/或治疗肺炎链球菌引起的疾病和/或病症。一方面，本申请提供了一种分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，LCDR1，LCDR2和LCDR3，所述HCDR1包含SEQIDNO:3所示的氨基酸序列，所述HCDR2包含SEQIDNO:2所示的氨基酸序列，所述HCDR3包含SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，所述LCDR1包含SEQIDNO:6所示的氨基酸序列，所述LCDR2包含SEQIDNO:5所示的氨基酸序列，且所述LCDR3包含SEQIDNO:4所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含VH，所述VH包含SEQIDNO:40所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含抗体重链恒定区。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含VL，且所述VL包含SEQIDNO:41所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含抗体轻链恒定区。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含抗体或其抗原结合片段，其中抗体选自下组中的一种或多种：单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体；所述其中所述抗原结合片段包括Fab，Fab’，Fv片段，F(ab’)2，F(ab)2，scFv，di-scFv和/或dAb。在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白具有下述性质中的一种或多种：能够特异性结合肺炎链球菌溶血素蛋白和能够预防和/或治疗肺炎链球菌引起的疾病和/或病症。另一方面，本申请还提供了核酸分子，其编码所述分离的抗原结合蛋白。另一方面，本申请还提供了载体，其包含所述核酸分子。另一方面，本申请还提供了细胞，其包含所述核酸分子或所述载体。另一方面，本申请还提供了药物组合物，其包含所述分离的抗原结合蛋白、所述核酸分子、所述载体和/或所述细胞，以及任选地药学上可接受的载剂。另一方面，本申请还提供了制备所述分离的抗原结合蛋白的方法，所述方法包括在使得所述抗原结合蛋白表达的条件下，培养所述细胞。另一方面，本申请还提供了所述分离的抗原结合蛋白、所述核酸分子、所述载体、所述细胞和/或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗由肺炎链球菌引起或介导的疾病和/或病症。本领域技术人员能够从下文的详细描述中容易地洞察到本申请的其它方面和优势。下文的详细描述中仅显示和描述了本申请的示例性实施方式。如本领域技术人员将认识到的，本申请的内容使得本领域技术人员能够对所公开的具体实施方式进行改动而不脱离本申请所涉及专利技术的精神和范围。相应地，本申请的附图和说明书中的描述仅仅是示例性的，而非为限制性的。附图说明本申请所涉及的专利技术的具体特征如所附权利要求书所显示。通过参考下文中详细描述的示例性实施方式和附图能够更好地理解本申请所涉及专利技术的特点和优势。对附图简要说明如下：图1显示的是本申请所述分离的抗原结合蛋白与肺炎链球菌溶血素蛋白的亲和力测试。图2显示的是本申请所述分离的抗原结合蛋白的体外中和肺炎链球菌溶血素蛋白溶血活性的测定。图3显示的是本申请所述分离的抗原结合蛋白对PLY毒素模型小鼠的保护作用。图4显示的是本申请所述分离的抗原结合蛋白对肺炎链球菌感染模型小鼠的保护作用。具体实施方式以下由特定的具体实施例说明本申请专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所公开的内容容易地了解本申请专利技术的其他优点及效果。术语定义在本申请中，术语“肺炎链球菌溶血素”可以与“Pneumolysin”、“PLY”和“肺炎链球菌溶血素蛋白”互换使用，通常指肺炎链球菌含有的一种多功能毒力因子。在本申请中，该术语可涵盖野生型肺炎链球菌溶血素蛋白及其变体、类似物、同源物和功能活性片段。例如，所述肺炎链球菌溶血素蛋白的变体可以包含与野生型溶血素相比，发生第146位氨基酸缺失的突变。例如，所述功能活性片段可以是能够在宿主中引起体液和/或细胞免疫应答的部分。在本申请中，术语“分离的抗原结合蛋白”通常指脱离了其天然存在状态的具有抗原结合能力的蛋白。该“分离的抗原结合蛋白”可以包含结合抗原的部分和任选地，允许抗原结合部分采用促进所述抗原结合部分结合抗原的构象的框架或构架部分。抗原结合蛋白可以包含例如抗体来源的蛋白框架区(FR)或具有移植的CDR或CDR衍生物的备选蛋白框架区或人工框架区。此类框架包括，但不限于包含被引入例如以稳定抗原结合蛋白的三维结构的突变的抗体来源的框架区以及包含例如生物相容性聚合物的完全合成的框架区。在本申请中，术语“CDR”也称“互补决定区”，通常指抗体可变结构域中的区域，其序列是高度可变的和/或形成结构定义环。通常，抗体包括六个CDR；在VH中三个(HCDR1、HCDR2、HCDR3)，和在VL中三个(LCDR1、LCDR2、LCDR3)。在某些实施方案中，仅由重链组成的天然存在的骆驼抗体在缺乏轻链的情况下，其功能也能够正常且稳定。参见，例如，Hamers-Castermanetal.,Nature363:446-448(1993)；Sheriffetal,NatureStruct.Biol.3:733-736(1996)。抗体CDR可以通过多种编码系统来确定，如CCG、Kabat、AbM、Chothia、IMGT、综合考虑Kabat/Chothia等。这些编码系统为本领域内已知，具体可参见，例如，http://www.bioinf.org.uk/abs/index.html#kabatnum。在本申请中，术语“可变结构域”与“可变区”可以互换使用，通常指抗体重链和/或轻链的一部分。重链和轻链的可变结构域可以分别称为“VH”和“VL”(或者分别称为“VH”和“VL”)。这些结构域通常是抗体的变化最大的部分(相对于相同类型的其它抗体)，且包含抗原结合位点。在本申请中，术语“抗体”通常指免疫球蛋白或其片段或其衍生物，涵盖包括抗原结合位点的任何多肽，无论其是在体外还是体内产生的。该术语包括但不限于多克隆的、单本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，LCDR1，LCDR2和LCDR3，所述HCDR1包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，所述HCDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，所述HCDR3包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述LCDR1包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列，所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列，且所述LCDR3包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.分离的抗原结合蛋白，其包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，LCDR1，LCDR2和LCDR3，所述HCDR1包含SEQIDNO:3所示的氨基酸序列，所述HCDR2包含SEQIDNO:2所示的氨基酸序列，所述HCDR3包含SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，所述LCDR1包含SEQIDNO:6所示的氨基酸序列，所述LCDR2包含SEQIDNO:5所示的氨基酸序列，且所述LCDR3包含SEQIDNO:4所示的氨基酸序列。


2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白，其包含VH，所述VH包含SEQIDNO:40所示的氨基酸序列。


3.根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其包含VL，且所述VL包含SEQIDNO:41所示的氨基酸序列。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其能够特异性结合肺炎链球菌溶血素蛋白和/或能够预防和/或治疗肺炎链球菌引起的疾病和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭诗雨，李博华，邱熙然，陈欣宁，
申请(专利权)人：星济生物苏州有限公司，昕曜生物上海有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32