一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法技术

技术编号:29609566 阅读:36 留言:0更新日期:2021-08-10 18:16
本发明专利技术公开一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法,所述的原代子宫内膜细胞系通过以下步骤获得:(1)取健康的成年母猪子宫,用含有双抗的PBS缓冲液冲洗干净,剪开子宫内膜,PBSS缓冲液冲洗干净;(2)采取猪子宫内膜上皮,将其剪至1mm

【技术实现步骤摘要】
一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法
本专利技术属于生物制品
,具体涉及一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法。
技术介绍
猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemicdiarrheacoronavirus,PEDV)是引起猪以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的急性、高度接触性的猪肠道传染病。PEDV可以感染各年龄段的猪,但哺乳仔猪更易感染,其死亡率和发病率接近100%。近年来,PED的流行更是越来越广泛,新的变异株不断出现,商品化疫苗与流行毒株的抗原性不匹配,免疫效果不佳,从而严重影响着我国养猪业的健康发展。现有技术中,关于PEDV在原代子宫内膜细胞上面的研究尚未开展,后期需要加快研究。PEDV在小肠粘膜上皮细胞(IPEC-J2)上能有效复制,但在猪体内其它的细胞感染研究较少.因此,提供一种新型PEDV感染细胞模型,这有着重要的生物学意义,为后续开展病毒受体及致病机制等研究奠定基础。
技术实现思路
针对现有技术中的不足之处,本专利技术提供一种可供PEDV复制用的原代本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)取猪子宫内膜上皮:采取健康的成年母猪子宫,用含有双抗的PBS缓冲液冲洗干净,剪开子宫内膜,PBSS缓冲液冲洗干净,采取猪子宫内膜上皮,将其剪至1mm

【技术特征摘要】
1.一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取猪子宫内膜上皮:采取健康的成年母猪子宫,用含有双抗的PBS缓冲液冲洗干净,剪开子宫内膜,PBSS缓冲液冲洗干净,采取猪子宫内膜上皮,将其剪至1mm3的小块;
(2)消化:猪子宫内膜上皮用PBS缓冲液清洗后,加入两倍体积的0.1%胶原蛋白酶(0.1mg/ml),消化2小时,期间晃动使其能均匀消化;随加入等体积含有10%血清的细胞培养基终止其消化;
(3)分离:随后采用100nm的细胞筛过...

【专利技术属性】
技术研发人员:宋长绪洪林君刘献辉周臣张歆明徐舸刘燕玲张乐宜
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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