一种基于MALDI-TOF MS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种基于MALDI‑TOFMS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法。它是以50S核糖体蛋白L30、50S核糖体蛋白L31typeB和30S核糖体蛋白S20作为特征蛋白。本发明专利技术利用蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌的全基因组测序信息指导MALDI‑TOFMS特征峰的筛选和鉴定，获得能准确区分蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌的MALDI‑TOFMS特征峰，结果准确可靠，为MALDI‑TOFMS区分近缘物种提供思路。

【技术实现步骤摘要】
一种基于MALDI-TOFMS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法
：本专利技术属于微生物检测领域，具体涉及一种基于MALDI-TOFMS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法。
技术介绍
：蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)是我国常见的食源性致病菌之一，其产生的肠毒素和呕吐毒素可引起腹泻和呕吐两种胃肠道疾病。在2006至2016年期间，蜡样芽胞杆菌在我国食源性致病菌造成的食物中毒事件中排名第三。苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis)是昆虫病原菌，其在形成芽胞的同时产生杀虫晶体蛋白，因此被用作生物杀虫剂。蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌同属蜡样芽胞杆菌群，16SrRNA基因序列相似性大于99％，dDDH(digitalDNA-DNAhybridization)值大于物种划分阈值70％，极难区分。在食品风险监测中，蜡样芽胞杆菌是国内和国际上的常规检测对象，苏云金芽胞杆菌作为广泛使用的生物杀虫剂同样常见于食品中，对蜡样芽胞杆菌的准确鉴定造成干扰。因此，蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌的准确区分不可缺少。...

【技术保护点】
1.一种基于MALDI-TOF MS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法，其特征在于，是以50S核糖体蛋白L30、50S核糖体蛋白L31 type B和30S核糖体蛋白S20作为特征蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于MALDI-TOFMS的蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴定方法，其特征在于，是以50S核糖体蛋白L30、50S核糖体蛋白L31typeB和30S核糖体蛋白S20作为特征蛋白。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将待测细菌涂在靶板上，用MALDI-TOFMS进行检测并采集数据，当待测细菌具有特征峰组合m/z3211，6427，9188和9214，待测细菌为蜡样芽胞杆菌；当待测细菌具有特征峰组合m/z3218，6441，9160和9229，待测细菌为苏云金芽胞杆菌。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的将待测细菌涂在靶板上是将待测细菌涂在靶板上，加体积分数70％甲酸，待其干燥，再加入含10mg/mLα-氰基-4-羟基肉桂酸的标准溶液，待其干燥，所述的标准溶液是按体积分数计，包括50％乙腈、47.5％水和2.5％三氟乙酸。


4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴清平，陈敏玲，丁郁，王涓，张菊梅，张俊卉，周桓，余树波，陈谋通，薛亮，叶青华，韦献虎，张友雄，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：广东;44