一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法技术

本发明专利技术公开了一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法，针对Hg

【技术实现步骤摘要】
一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法
本专利技术涉及食品药品检测分析领域，具体涉及一种针对汞元素形态及价态分析中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱分析汞形态时，二价汞(无机汞，Hg2+)色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法。
技术介绍
目前，采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(HPLC-ICP-MS)分析样品中汞元素中二价汞(Hg2+，无机汞)、甲基汞(CH3Hg)、乙基汞(CH2CH3Hg)等元素形态及价态的方法，在食品、药品领域已经得到广泛应用。该方法分析中一般采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相中添加半胱氨酸或巯基乙醇等与Hg2+、CH3Hg、CH2CH3Hg形成络合物进行分离。Hg2+对十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱残留的硅羟基(-OH)具有较强的结合能力，由于样品基质的影响，分析一段时间后Hg2+色谱峰吸附、洗脱行为受到影响，出现色谱峰展宽、拖尾，柱效降低等情况，影响Hg2+与甲基汞色谱峰分离，导致无法准确定量，甚至出现Hg2+色谱峰消失，无法进行分析。针对该问题，《中国药典》2020年版四部通则2322“汞、砷元素形态及价态分析法”附注(3)中，提到“进行汞元素形态及价态分析时，由于色谱柱中残留的未完全封端硅羟基对Hg2+的影响，导致柱效损失较快。建议采用封端覆盖率较高的色谱柱，且必要时在一定进样间隔，采用阀切换技术以高比例有机相冲洗色谱柱后，再继续分析”。现有液相色谱分析技术中，当遇到色谱柱的柱效降低，导致色谱峰展宽、拖尾等情况，多采用高比例有机相(甲醇、乙腈等)进行冲洗色谱柱，洗脱吸附在色谱柱的杂质，从而达到恢复柱效的目的，或直接更换新的色谱柱。但在实际实施中采用甲醇清洗色谱柱的步骤，对于柱效的恢复程度有限，冲洗后的Hg2+色谱峰也无法达到新色谱柱的柱效。因此色谱柱分析至一定量样品后，多数情况下只能更换色谱柱，使得测定成本大大增加。因此，研发出一种在HPLC-ICP-MS分析汞元素形态及价态方法中有效恢复Hg2+色谱峰柱效、峰形的处理方法，对于提高方法准确度、降低分析成本十分重要，成为汞形态分析中急需解决的问题之一。
技术实现思路
针对现有HPLC-ICP-MS分析汞元素形态及价态的方法中，无机汞(Hg2+)色谱峰柱效降低、峰形变差，影响准确定量的问题，本专利技术提供了一种有效恢复Hg2+色谱峰形和柱效的处理方法。本专利技术的第一方面，提供了一种应用于汞元素形态及价态分析中无机汞(Hg2+)色谱峰柱效降低后的再恢复的再生试剂，所述再生试剂由一定比例的硝酸银水溶液和甲醇组成。优选地，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1～0.5mmol/L。优选地，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1mmol/L。优选地，所述再生试剂中包括质量浓度百分比为2～8％的甲醇。第二方面，本专利技术提供一种汞元素形态及价态分析中无机汞(Hg2+)色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，当液相色谱仪为双元泵，包括以下步骤：步骤S1、色谱柱前期处理步骤：将所述色谱柱出口端与ICP-MS雾化器进口处的连接拆除，所述色谱柱的进口端连接高效液相色谱流动相出口阀，色谱柱出口端接废液收集装置；步骤S2A、色谱柱预清洗步骤：流动相：A相为水，B相为甲醇，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，清洗时间为30～60min；步骤S3A、色谱柱再生处理步骤：将上述硝酸银水溶液置于流动相A相，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，再生处理时间为30～60min；步骤S4、色谱柱再生试剂置换步骤：将流动相A相换为水，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，置换时间为30～60min，置换完成后将所述色谱柱的出口端连接至所述ICP-MS雾化器进口处。优选地，所述硝酸银水溶液的制备过程为：精密取0.1mol/L的硝酸银溶液1～5mL，加入约700～900mL水，加水至1000mL，摇匀，即得。进一步优选地，所述硝酸银水溶液的制备过程为：精密取0.1mol/L的硝酸银溶液1mL，加入约900mL水，加水至1000mL，摇匀，即得。优选地，所述0.1mol/L的硝酸银溶液中所述硝酸银为分析纯、色谱纯中的一种或两种。更优选地，所述0.1mol/L的硝酸银溶液中所述硝酸银为色谱纯；第三方面，本专利技术提供一种汞元素形态及价态分析中无机汞(Hg2+)色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，当液相色谱仪为单元泵，包括以下步骤：步骤S1、色谱柱前期处理步骤：将所述色谱柱出口端与ICP-MS雾化器进口处的连接拆除，所述色谱柱的进口端连接高效液相色谱流动相出口阀，色谱柱出口端接废液收集装置；步骤S2B、色谱柱预清洗步骤：将含5％甲醇的水溶液置于流动相，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，清洗时间为30～60min；步骤S3B、色谱柱再生处理步骤：将上述再生溶液置于流动相，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，再生处理时间为30～60min；步骤S4、色谱柱再生试剂置换步骤：将含5％甲醇的水溶液置于流动相，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，置换时间为30～60min，置换完成后将所述色谱柱的出口端连接至所述ICP-MS雾化器进口处。优选地，还包括一检验步骤：按照正常高效液相-电感耦合等离子体质谱联用分析汞元素形态及价态的操作步骤，进样分析10～50μlHg2+、CH3Hg、CH2CH3Hg混合对照品溶液。优选地，步骤S1～步骤S4中，所述水为HPLC级水、超纯水、去离子中的一种或多种。更优选地，步骤S1～步骤S4中，所述甲醇为HPLC级。优选地，步骤S1～步骤S4中，所述甲醇为HPLC级、色谱纯或质谱纯中的一种或多种。更优选地，步骤S1～步骤S4中，所述甲醇为HPLC级或色谱纯。本专利技术提供了汞元素形态及价态分析中Hg2+色谱峰柱效降低或失效后的再生恢复处理方法，本专利技术的有益效果是：汞元素形态及价态分析中十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的残余硅羟基对Hg2+有一定吸附作用，经多次进样分析后，由于基质的影响，Hg2+色谱峰逐渐展宽，出现与甲基汞的分离度降低的情况，甚至出现Hg2+色谱峰消失的现象，导致无法准确定量分析。本专利技术针对Hg2+色谱峰柱效降低、峰形变差的情况，提供了特制的再生处理试剂，以一定浓度的硝酸银作为水相，与一定比例的甲醇混合，通过依次采用预清洗、再生处理、置换清洗等步骤，解决了目前针对汞形态分析中Hg2+色谱峰形变差和展宽、色谱柱柱效降低等情况尚无有效处理方法的问题，针对性较强。本专利技术还确定了再生试剂的浓度、清洗流速和时间，在特定的浓度、流速和清洗时间下，可有效改善Hg2+色本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种应用于汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复的再生试剂，所述再生试剂由一定比例的硝酸银水溶液和甲醇组成。/n

【技术特征摘要】
1.一种应用于汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复的再生试剂，所述再生试剂由一定比例的硝酸银水溶液和甲醇组成。


2.根据权利要求1中所述的再生试剂，其特征在于，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1～0.5mmol/L。


3.根据权利要求2中所述的再生试剂，其特征在于，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1mmol/L。


4.根据权利要求1中所述的再生试剂，其特征在于，所述再生试剂中所述甲醇的质量浓度百分比为2～8％。


5.一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法，其特征在于，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，液相色谱仪为双元泵，包括以下步骤：
步骤S1、色谱柱前期处理步骤：将所述色谱柱的出口端与ICP-MS雾化器进口处的连接拆除，所述色谱柱的进口端连接高效液相色谱流动相出口阀，所述色谱柱的出口端接废液收集装置；
步骤S2A、色谱柱预清洗步骤：流动相：A相为水，B相为甲醇，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，清洗时间为30～60min；
步骤S3A、色谱柱再生处理步骤：将如权利要求1-4任一项所述的硝酸银水溶液置于流动相A相，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，再生处理时间为30～60min；
步骤S4、色谱柱再生试剂置换步骤：将流动相A相换为水，流动相A相和流动相B相的体积比为95：5，流速0.5～1.5mL/min，柱温为室温，置换时间为30～60min，置换完成后将所述色谱柱出口端连接至所述ICP-MS雾化器进口处。


6.根据权利要求5中所述的再恢复处理方法，其特征在于，所述硝酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽敏，季申，毛秀红，胡青，曹帅，周如洁，彭伟楠，程益清，付泽晓，
申请(专利权)人：上海市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：上海;31