TCR和肽制造技术

T细胞受体(TCR)，其结合由主要组织相容性复合物(MHC)呈递时的Wilms肿瘤1蛋白(WT1)肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TCR和肽专利
本专利技术涉及T细胞受体(TCR)，其结合由主要的组织相容性复合物呈递时的源自Wilms肿瘤1蛋白(WT1)的肽。在这方面，本专利技术涉及特异性识别WT1肽的互补决定区(CDR)。本专利技术进一步涉及源自WT1的免疫原性肽。专利技术背景T细胞受体(TCR)基因疗法基于将高亲合力肿瘤特异性TCR基因遗传转移到T淋巴细胞中，从而使得能够特异性靶向期望的肿瘤相关抗原并且导致较小的毒性和更特异且有效的疗法。此种方法已在临床试验中显示出希望。限制TCR基因疗法用于癌症临床治疗的主要障碍之一是缺乏肿瘤特异性T细胞和相应的TCR。因此，肿瘤特异性TCR的低可用性仍然是一个开放的问题，其限制基于TCR的免疫治疗方法的广泛利用。大部分肿瘤相关抗原(TAA)是自身抗原，因此，由于中枢和外周耐受性，对此类分子特异的T细胞被破坏或无反应化。尽管这样，在同种异体造血干细胞移植(allo-HSCT)之后，在健康的供体和患者中，尤其是在受血液恶性影响的患者中，已经观察到天然存在的肿瘤特异性T细胞，在所述同种异体造血干细胞移植中肿瘤特异性淋巴细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.T细胞受体(TCR)，其结合由主要组织相容性复合物(MHC)呈递时的Wilms肿瘤1蛋白(WT1)肽，其中所述TCR：/n(i)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CASGGGADGLTF(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASGRGDTEAFF(SEQ ID NO:30)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；/n(ii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAMRTGGGADGLTF(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181031 GB 1817821.01.T细胞受体(TCR)，其结合由主要组织相容性复合物(MHC)呈递时的Wilms肿瘤1蛋白(WT1)肽，其中所述TCR：
(i)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CASGGGADGLTF(SEQIDNO:25)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASGRGDTEAFF(SEQIDNO:30)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(ii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAMRTGGGADGLTF(SEQIDNO:3)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSEAGLSYEQYF(SEQIDNO:8)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(iii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CILSTRVWAGSYQLTF(SEQIDNO:14)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CATGQATQETQYF(SEQIDNO:19)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(iv)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVIGGTDSWGKLQF(SEQIDNO:36)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSQEEGAVYGYTF(SEQIDNO:41)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(v)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVIGGTDSWGKLQF(SEQIDNO:36)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CATSREGLAADTQYF(SEQIDNO:52)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(vi)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CVVPRGLSTDSWGKLQF(SEQIDNO:47)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CATSREGLAADTQYF(SEQIDNO:52)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(vii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CVVPRGLSTDSWGKLQF(SEQIDNO:47)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSQEEGAVYGYTF(SEQIDNO:41)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(viii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(ix)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(x)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xi)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVTLLSIEPSAGGYQKVTF(SEQIDNO:126)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSLEGRAMPRDSHQETQYF(SEQIDNO:136)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xiii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVTLLSIEPSAGGYQKVTF(SEQIDNO:126)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CATSWGLNEQYF(SEQIDNO:142)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xiv)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAATSRDDMRF(SEQIDNO:131)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSLEGRAMPRDSHQETQYF(SEQIDNO:136)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xv)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAATSRDDMRF(SEQIDNO:131)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CATSWGLNEQYF(SEQIDNO:142)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xvi)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CALPDKVIF(SEQIDNO:148)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSVSAGSTGELFF(SEQIDNO:158)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xvii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAGLYATNKLIF(SEQIDNO:153)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSVSAGSTGELFF(SEQIDNO:158)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xviii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xix)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xx)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xxi)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；或
(xxii)包含CDR3α和CDR3β，所述CDR3α包含CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体，所述CDR3β包含CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)的氨基酸序列或其具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体。


2.权利要求1的TCR，其包含以下CDR序列：
(i)CDR1α-NSAFQY(SEQIDNO:23)，
CDR2α-TYSSGN(SEQIDNO:24)，
CDR3α-CASGGGADGLTF(SEQIDNO:25)，
CDR1β-SGDLS(SEQIDNO:28)，
CDR2β-YYNGEE(SEQIDNO:29)，和
CDR3β-CASGRGDTEAFF(SEQIDNO:30)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(ii)CDR1α-TSDQSYG(SEQIDNO:1)，
CDR2α-QGSYDEQN(SEQIDNO:2)，
CDR3α-CAMRTGGGADGLTF(SEQIDNO:3)，
CDR1β-SNHLY(SEQIDNO:6)，
CDR2β-FYNNEI(SEQIDNO:7)，和
CDR3β-CASSEAGLSYEQYF(SEQIDNO:8)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(iii)CDR1α-TISGTDY(SEQIDNO:12)，
CDR2α-GLTSN(SEQIDNO:13)，
CDR3α-CILSTRVWAGSYQLTF(SEQIDNO:14)，
CDR1β-KGHDR(SEQIDNO:17)，
CDR2β-SFDVKD(SEQIDNO:18)，和
CDR3β-CATGQATQETQYF(SEQIDNO:19)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(iv)CDR1α-DRGSQS(SEQIDNO:34)，
CDR2α-IYSNGD(SEQIDNO:35)，
CDR3α-CAVIGGTDSWGKLQF(SEQIDNO:36)，
CDR1β-LGHNA(SEQIDNO:39)，
CDR2β-YSLEER(SEQIDNO:40)，和
CDR3β-CASSQEEGAVYGYTF(SEQIDNO:41)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(v)CDR1α-DRGSQS(SEQIDNO:34)，
CDR2α-IYSNGD(SEQIDNO:35)，
CDR3α-CAVIGGTDSWGKLQF(SEQIDNO:36)，
CDR1β-LNHNV(SEQIDNO:50)，
CDR2β-YYDKDF(SEQIDNO:51)，和
CDR3β-CATSREGLAADTQYF(SEQIDNO:52)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(vi)CDR1α-NSASQS(SEQIDNO:45)，
CDR2α-VYSSGN(SEQIDNO:46)，
CDR3α-CVVPRGLSTDSWGKLQF(SEQIDNO:47)，
CDR1β-LNHNV(SEQIDNO:50)，
CDR2β-YYDKDF(SEQIDNO:51)，和
CDR3β-CATSREGLAADTQYF(SEQIDNO:52)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(vii)CDR1α–NSASQS(SEQIDNO:45)，
CDR2α-VYSSGN(SEQIDNO:46)，
CDR3α–CVVPRGLSTDSWGKLQF(SEQIDNO:47)，
CDR1β-LGHNA(SEQIDNO:39)，
CDR2β-YSLEER(SEQIDNO:40)，和
CDR3β-CASSQEEGAVYGYTF(SEQIDNO:41)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(viii)CDR1α–VSNAYN(SEQIDNO:91)，
CDR2α-GSKP(SEQIDNO:92)，
CDR3α–CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)，
CDR1β-SEHNR(SEQIDNO:96)，
CDR2β-FQNEAQ(SEQIDNO:97)，和
CDR3β-CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(ix)CDR1α–VSNAYN(SEQIDNO:91)，
CDR2α-GSKP(SEQIDNO:92)，
CDR3α–CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)，
CDR1β-SGHDN(SEQIDNO:102)，
CDR2β-FVKESK(SEQIDNO:103)，和
CDR3β-CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(x)CDR1α–VSGNPY(SEQIDNO:108)，
CDR2α-YITGDNLV(SEQIDNO:109)，
CDR3α–CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)，
CDR1β-MNHEY(SEQIDNO:118)，
CDR2β-SMNVEV(SEQIDNO:119)，和
CDR3β-CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xi)CDR1α–NIATNDY(SEQIDNO:113)，
CDR2α-GYKTK(SEQIDNO:114)，
CDR3α–CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)，
CDR1β-MNHEY(SEQIDNO:118)，
CDR2β-SMNVEV(SEQIDNO:119)，和
CDR3β-CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xii)CDR1α–SSVSVY(SEQIDNO:124)，
CDR2α-YLSGSTLV(SEQIDNO:125)，
CDR3α–CAVTLLSIEPSAGGYQKVTF(SEQIDNO:126)，
CDR1β-SEHNR(SEQIDNO:134)，
CDR2β-FQNEAQ(SEQIDNO:135)，和
CDR3β-CASSLEGRAMPRDSHQETQYF(SEQIDNO:136)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xiii)CDR1α–SSVSVY(SEQIDNO:124)，
CDR2α-YLSGSTLV(SEQIDNO:125)，
CDR3α–CAVTLLSIEPSAGGYQKVTF(SEQIDNO:126)，
CDR1β-LNHNV(SEQIDNO:140)，
CDR2β-YYDKDF(SEQIDNO:141)，和
CDR3β-CATSWGLNEQYF(SEQIDNO:142)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xiv)CDR1α–DSASNY(SEQIDNO:129)，
CDR2α-IRSNVGE(SEQIDNO:130)，
CDR3α–CAATSRDDMRF(SEQIDNO:131)，
CDR1β-SEHNR(SEQIDNO:134)，
CDR2β-FQNEAQ(SEQIDNO:135)，和
CDR3β-CASSLEGRAMPRDSHQETQYF(SEQIDNO:136)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xv)CDR1α–DSASNY(SEQIDNO:129)，
CDR2α-IRSNVGE(SEQIDNO:130)，
CDR3α–CAATSRDDMRF(SEQIDNO:131)，
CDR1β-LNHNV(SEQIDNO:140)，
CDR2β-YYDKDF(SEQIDNO:141)，和
CDR3β-CATSWGLNEQYF(SEQIDNO:142)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xvi)CDR1α–TRDTTYY(SEQIDNO:146)，
CDR2α-RNSFDEQN(SEQIDNO:147)，
CDR3α–CALPDKVIF(SEQIDNO:148)，
CDR1β-SGDLS(SEQIDNO:156)，
CDR2β-YYNGEE(SEQIDNO:157)，和
CDR3β-CASSVSAGSTGELFF(SEQIDNO:158)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xvii)CDR1α–SIFNT(SEQIDNO:151)，
CDR2α-LYKAGEL(SEQIDNO:152)，
CDR3α–CAGLYATNKLIF(SEQIDNO:153)，
CDR1β-SGDLS(SEQIDNO:156)，
CDR2β-YYNGEE(SEQIDNO:157)，和
CDR3β-CASSVSAGSTGELFF(SEQIDNO:158)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xviii)CDR1α–VSNAYN(SEQIDNO:91)，
CDR2α-GSKP(SEQIDNO:92)，
CDR3α–CAAPNDYKLSF(SEQIDNO:93)，
CDR1β-MNHEY(SEQIDNO:118)，
CDR2β-SMNVEV(SEQIDNO:119)，和
CDR3β-CASSTLGGELFF(SEQIDNO:120)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xix)CDR1α–VSGNPY(SEQIDNO:108)，
CDR2α-YITGDNLV(SEQIDNO:109)，
CDR3α–CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)，
CDR1β-SEHNR(SEQIDNO:96)，
CDR2β-FQNEAQ(SEQIDNO:97)，和
CDR3β-CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xx)CDR1α–VSGNPY(SEQIDNO:108)，
CDR2α-YITGDNLV(SEQIDNO:109)，
CDR3α–CAVRDGGATNKLIF(SEQIDNO:110)，
CDR1β-SGHDN(SEQIDNO:102)，
CDR2β-FVKESK(SEQIDNO:103)，和
CDR3β-CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xxi)CDR1α–NIATNDY(SEQIDNO:113)，
CDR2α-GYKTK(SEQIDNO:114)，
CDR3α–CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)，
CDR1β-SEHNR(SEQIDNO:96)，
CDR2β-FQNEAQ(SEQIDNO:97)，和
CDR3β-CASSSGLAFYEQYF(SEQIDNO:98)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；
(xxii)CDR1α–NIATNDY(SEQIDNO:113)，
CDR2α-GYKTK(SEQIDNO:114)，
CDR3α–CLVGGYTGGFKTIF(SEQIDNO:115)，
CDR1β-SGHDN(SEQIDNO:102)，
CDR2β-FVKESK(SEQIDNO:103)，和
CDR3β-CASSQLSGRDSYEQYF(SEQIDNO:104)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体；或
(xxiii)CDR1α-DRGSQS(SEQIDNO:182)，
CDR2α-IYSNGD(SEQIDNO:183)，
CDR3α-CASGGGADGLTF(SEQIDNO:25)，
CDR1β-SGDLS(SEQIDNO:28)，
CDR2β-YYNGEE(SEQIDNO:29)，和
CDR3β-CASGRGDTEAFF(SEQIDNO:30)，
或其各自具有多达3个氨基酸取代、添加或缺失的变体。


3.权利要求1或2的TCR，其包含：
(i)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:26的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:31的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(ii)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:4的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:9的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(iii)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:15的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:20的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(iv)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:37的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:42的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(v)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:37的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:53的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(vi)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:48的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:53的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(vii)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:48的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:42的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(viii)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:94的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:99的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(ix)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:94的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDNO:105的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体；
(x)α链可变域和β链可变域，所述α链可变域包含SEQIDNO:111的氨基酸序列或与其具有至少75％序列同一性的其变体，所述β链可变域包含SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：MC博尼尼，E鲁吉罗，ZI马格纳尼，F西塞里，E卡内瓦尔，
申请(专利权)人：圣拉斐尔医院有限责任公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT