基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统、方法及应用技术方案

本发明专利技术涉及基于CRISPR‑Cas14a的通用细菌和病毒检测系统、方法及应用。所述检测系统包括CRISPR‑Cas14a系统、TSPE和磁性纳米粒子；所述CRISPR‑Cas14a系统包括通用sgRNA和Cas14a；所述TSPE为标签特异性引物扩增体系，包括含有Tag序列的标签正向引物和含有生物素标记序列的反向引物；所述磁性纳米粒子可与TSPE的反向引物连接。本发明专利技术检测系统具有通用sgRNA，且检测过程不需要PAM，检测过程得到简化，应用范围更广。所述检测方法操作简单，相较于传统检测方法，省去了多次制备sgRNA的过程，简化了标签特异性引物扩增体系的纯化过程(TSPE)，降低了检测过程中的操作难度和生产成本。所述应用具体值本发明专利技术检测系统在检测无PAM序列DNA的中的应用。

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统、方法及应用
本专利技术涉及医药检测技术的
，尤其涉及一种基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统、方法及应用。
技术介绍
许多威胁生命的传染病通常具有相似的体征与症状，为了进一步确定如何用药，需要明确患者感染的细菌或病毒的具体种类。现今，核酸检测系统可用于鉴定细菌或病毒的种类，且具有高度灵敏、诊断速度快的优点。在病毒和细菌检测领域中，常用的核酸检测系统主要依赖CRISPR-Cas系统。CRISPR-Cas系统(聚簇成规则间隔的短回文重复序列和相关蛋白)是细菌中的一种适应性免疫系统，可整合入侵的外源DNA；当病原体再次入侵时，转录形成crRNA，crRNA与Cas酶形成核糖核蛋白复合物，该复合物与外源DNA上的特定核酸序列(靶核酸序列)配对并切割，使病原体灭活。结合CRISPR-Cas系统的上述性质，再辅以通用荧光核酸传感平台，即可用于病原体的检测。目前，基于CRISPR-Cas系统的核酸检测系统主要包括基于CRISPR-Cas9的核酸检测系统和基于CRI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统，其特征在于，包括CRISPR-Cas14a系统、TSPE和磁性纳米粒子；/n所述CRISPR-Cas14a系统包括通用sgRNA和Cas14a；/n所述TSPE为标签特异性引物扩增体系，包括含有Tag序列的标签正向引物和含有生物素标记序列的反向引物；/n所述磁性纳米粒子可与TSPE的反向引物连接。/n

【技术特征摘要】
1.基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统，其特征在于，包括CRISPR-Cas14a系统、TSPE和磁性纳米粒子；
所述CRISPR-Cas14a系统包括通用sgRNA和Cas14a；
所述TSPE为标签特异性引物扩增体系，包括含有Tag序列的标签正向引物和含有生物素标记序列的反向引物；
所述磁性纳米粒子可与TSPE的反向引物连接。


2.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统，其特征在于，所述通用sgRNA序列如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统，其特征在于，所述CRISPR-Cas14a系统还包括探针DNA，
所述探针DNA修饰有荧光基团和猝灭基团。


4.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和病毒检测系统，其特征在于，所述TSPE还包括目标DNA模板。


5.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas14a的通用细菌和...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋凤阁，崔倩，杨治庆，
申请(专利权)人：海南微氪生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;46