一种克雷伯氏菌、采用该克雷伯氏菌制得的复合菌剂及该复合菌剂的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种克雷伯氏菌，所述克雷伯氏菌命名为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)HR‑3，于2020年10月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2020605。本发明专利技术还公开了含有上述克雷伯氏菌的复合菌剂。本发明专利技术最后公开了上述复合菌剂在染料废水脱色中的应用。本发明专利技术复合菌剂能够在高碱度、高盐度条件下对印染废水具有较高的脱色率，同时还能够适用于多种不同类型染料的高效脱色，本发明专利技术复合菌剂有效增加了微生物对印染废水的适应性与广谱性，具有良好的应用前景和生态效益。

【技术实现步骤摘要】
一种克雷伯氏菌、采用该克雷伯氏菌制得的复合菌剂及该复合菌剂的应用
本专利技术涉及一种克雷伯氏菌，还涉及采用上述克雷伯氏菌制得的复合菌剂，最后涉及上述复合菌剂在染料废水脱色中的应用，属于污水处理领域。
技术介绍
印染行业是我国工业用水大户和废水排放大户，在纺织印染过程中，约有10％～20％的染料会成为废染料随废水排出，据不完全统计，我国印染废水的排放量约为300～400万m3/d，约占整个工业废水排放量的35％，印染废水排入水体后，会导致水体透明度下降，严重影响水体的观感，此外还会消耗水中的溶解氧，严重破坏水体生态平衡，威胁水生生物及人类安全。印染废水具有水质水量变化大、COD含量高、色度深、碱度大(一般pH为8～10)、生物毒性大、氨氮浓度高以及水温偏高等特点，印染废水经冷却处理后进入生化处理阶段的水温一般为35～55℃(温度波动范围大)。目前对于印染废水的脱色主要包含物理法、化学法及生物法。物理法主要包含萃取法、吸附法、膜分离法等；化学法主要包含化学氧化法、电化学法、化学混凝法等；生物法是利用微生物降解染料实现脱色。因物理与化学处理方法大多存在着成本高、能耗大、效率低、难实施，且极易产生二次污染等问题，因此不适合大规模应用。相比之下，生物法成本低、效率高、操作简单、降解彻底，且不会产生二次污染，因而受到广泛关注。由于微生物对于其生存条件以及营养物质有着不同的要求，pH、盐度、温度等环境因素，对微生物脱色能力影响很大，极大限制了染料降解菌的工业化应用。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术提供一种克雷伯氏菌，本专利技术还提供含有上述克雷伯氏菌的复合菌剂，该复合菌剂能够在高碱度和高盐度下对高浓度染料废水进行高效脱色。技术方案：本专利技术所述的克雷伯氏菌，命名为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3，分类命名为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)，菌株号为HR-3，现已保藏于位于中国武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2020605，保藏日期为2020年10月19日。菌株HR-3的生物学性质如下：本专利技术克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3来源于垃圾渗滤液生化处理系统中的活性污泥，经分离纯化后，在LB培养基中，于35℃好氧条件生长良好，菌体边缘不规则，直径大小3～5mm，乳白色菌落，不透明，表面湿润有黏液，革兰氏阴性菌。本专利技术克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3，经16SrRNA测序，采用BLAST分析，将克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3基因序列于NCBI中检索，其基因序列与Klebsiellasp.CCFM8376，登录号为KJ803933.1的亲缘关系最近，因此鉴定菌株HR-3为克雷伯氏菌。采用上述克雷伯氏菌制得的复合菌剂，所述复合菌剂由保藏编号为CCTCCM2020604的解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2的扩培菌液和保藏编号为CCTCCM2020605的克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3的扩培菌液按体积比1:1混合而成。复合菌剂中的解硫胺素芽孢杆菌，命名为解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2，分类命名为解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)，菌株号为YR-2，现已保藏于位于中国武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2020604，保藏日期为2020年10月19日。解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2菌株来源于垃圾渗滤液污水处理系统活性污泥中，经分离纯化后，在染料培养基中于35℃好氧条件下生长良好，菌体边缘不规则，直径大小为2～6mm，米白色菌落，不透明，为革兰氏阳性菌。其中，上述复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：(1)将保藏编号为CCTCCM2020604的解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2和保藏编号为CCTCCM2020605的克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3分别按体积分数1％～3％接种于液体LB培养基中，于35℃下好氧培养至菌液的OD值为1.5～2.0，分别得到YR-2的扩培菌液和HR-3的扩培菌液；(2)将步骤(1)得到的YR-2扩培菌液和HR-3扩培菌液按体积比1:1混合，得到复合菌剂。本专利技术还要解决的技术问题是提供上述复合菌剂在染料废水脱色中的应用。所述的应用为：将复合菌剂接种于模拟染料废水中，于厌氧/缺氧下反应24～48h；其中，复合菌剂的接种量为1％～10％(体积分数)，染料废水的温度为30～55℃，染料废水的pH值为7～10，染料废水的盐度为1％～5％；染料废水中，染料的质量浓度为25～200mg/L；染料废水中的染料为活性艳红X-3B、活性黑5、中性红、甲基橙、刚果红、亚甲基蓝或孔雀石绿中的一种或多种的混合。有益效果：本专利技术复合菌剂能够在高碱度及高盐度环境中对印染废水具有较高的脱色率，同时还能够适用于多种不同类型染料的高效降解脱色，本专利技术复合菌剂有效增加了微生物对印染废水的适应性与广谱性，具有良好的应用前景和生态效益。附图说明图1为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3对不同染料的脱色效率图；图2为解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2系统发育树；图3为解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2在不同温度条件下对染料的脱色效率图；图4为解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2对不同染料的脱色效果；图5为复合菌剂在不同pH条件下的脱色效率图；图6为复合菌剂在不同盐度条件下的脱色效率图；图7为复合菌剂对不同染料的脱色效率图。具体实施方式以下结合附图和具体实施例对本专利技术的技术方案做进一步说明。实施例1克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3菌株是从某垃圾渗滤液处理系统活性污泥中筛选获得，具体过程如下：(1)取某垃圾渗滤液生物段活性污泥；(2)将得到的污泥按体积比10％接种至100mL灭菌后的染料培养基(染料培养基中的染料浓度为25mg/L)中，在生化培养箱中于35℃静置培养，观察染料培养基中颜色变化；培养至染料培养基无色后，将一级培养液按体积比10％接种至新的染料培养基(染料培养基的染料浓度为50mg/L)中，继续于35℃静置培养，观察染料培养基中颜色变化；培养至染料培养基无色后，将二级培养液按体积比5％接种至100mL新的染料培养基中(染料培养基中染料浓度为100mg/L)，培养至染料培养基无色后，再将三级培养液按体积比5％接种至100mL新的染料初始浓度为100mg/L的染料培养基中，如此在染料初始浓度为100mg/L的染料培养基中连续接种驯化3次，完成驯化；(3)取出步骤(2)中驯化后的污泥，经过梯度稀释后，涂布于固体含活性艳红X-3B本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种克雷伯氏菌，其特征在于：所述克雷伯氏菌命名为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3，于2020年10月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2020605。/n

【技术特征摘要】
1.一种克雷伯氏菌，其特征在于：所述克雷伯氏菌命名为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3，于2020年10月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2020605。


2.一种采用权利要求1所述的克雷伯氏菌制得的复合菌剂，其特征在于：所述复合菌剂由保藏编号为CCTCCM2020604的解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2的扩培菌液和保藏编号为CCTCCM2020605的克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3的扩培菌液的扩培菌液按体积比1:1混合而成。


3.根据权利要求2所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将保藏编号为CCTCCM2020604的解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillussp.)YR-2和保藏编号为CCTCCM2020605的克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)HR-3分别按体积分数1％～3％接种于液体LB培养基中，于35℃下好氧培养至菌液的OD值为1.5～2.0，分别得到YR-2的扩培菌液和HR-3的扩培菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄开龙，张徐祥，杨庆，刘宁，任洪强，叶林，朱继业，阮在高，范海燕，
申请(专利权)人：南京江岛环境科技研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32