用于递送活性剂的可生物降解脂质制造技术

本发明专利技术涉及阳离子脂质，该阳离子脂质具有位于该阳离子脂质的脂质部分(例如疏水链)中的一个或多个可生物降解基团。可以将这些阳离子脂质掺入到脂质颗粒中用于递送活性剂，例如核酸。本发明专利技术还涉及脂质颗粒，这些脂质颗粒包含中性脂质、能够减少聚集的脂质、本发明专利技术的阳离子脂质、以及任选地固醇。该脂质颗粒可以进一步包含治疗剂，例如核酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于递送活性剂的可生物降解脂质本申请要求2018年10月1日提交的美国临时申请号62/739,548的权益，将其全部内容通过引用并入本文。
本专利技术涉及可生物降解脂质并且涉及其用于递送活性剂(例如核酸)的用途。
技术介绍
治疗性核酸包括例如小干扰RNA(siRNA)、微RNA(miRNA)、反义寡核苷酸、核酶、质粒、免疫刺激核酸、反义、antagomir、antimir、微RNA模拟物、supermir、U1衔接子以及适体。在siRNA或miRNA的情况下，这些核酸可以通过称为RNA干扰(RNAi)的过程下调特定蛋白质的细胞内水平。RNAi的治疗应用极为广泛，因为siRNA和miRNA构建体可以用针对靶蛋白的任何核苷酸序列进行合成。迄今为止，siRNA构建体在体外和体内模型中均已显示出特异性下调靶蛋白的能力。此外，目前正在临床研究中评估siRNA构建体。然而，siRNA或miRNA构建体目前面临的两个问题是，第一，它们对血浆中核酸酶消化的敏感性，第二，当作为游离siRNA或miRNA全身性施用时，它们进入细胞内区室(其中它们可以结合蛋白质RISC)的能力有限。由阳离子脂质与其他脂质组分(例如胆固醇和PEG脂质)和寡核苷酸(例如siRNA和miRNA)形成的脂质纳米颗粒已用于促进寡核苷酸的细胞摄取。仍然需要用于递送寡核苷酸的改进的阳离子脂质和脂质纳米颗粒。优选地，这些脂质纳米颗粒将提供高的药物:脂质比率，避免核酸在血清中降解和清除，适于全身递送，并提供核酸的细胞内递送。另外，这些脂质-核酸颗粒应该是耐受良好的并且提供足够的治疗指数，使得以有效的核酸剂量进行的患者治疗不存在对患者的显著毒性和/或风险。
技术实现思路
本专利技术涉及改进的脂质颗粒以及改进的阳离子脂质。一个实施例是脂质颗粒，该脂质颗粒包含可生物降解阳离子脂质、中性脂质、固醇、和能够减少聚集的脂质(例如PEG修饰的脂质)，其中可生物降解阳离子脂质与固醇的摩尔比率范围从约1.6:1至约2.0:1和/或可生物降解阳离子脂质与中性脂质的摩尔比率范围从约5.5:1至约5.9:1。诸位专利技术人出人意料地发现，相对于固醇和/或中性脂质的量具有一定较高含量的可生物降解阳离子脂质的脂质颗粒表现出增强的用于递送活性剂(例如siRNA)的功效。在一个实施例中，可生物降解阳离子脂质包含脂质部分，其中该脂质部分具有一个或多个可生物降解基团(例如酯基(-C(O)O-或-OC(O)-))。在一个优选的实施例中，能够减少聚集的脂质是1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-甲氧基聚乙二醇(PEG-DMG)，例如具有平均聚乙二醇分子量为2000的PEG-DMG。在另一个实施例中，可生物降解阳离子脂质与固醇的摩尔比率是从约1.7至约1.9:1，例如约1.9:1。在另一个实施例中，可生物降解阳离子脂质与中性脂质的摩尔比率范围从约5.5:1至约5.8:1，例如约5.8:1。在一个实施例中，该脂质颗粒包含从约55至约60mol％的可生物降解阳离子脂质，例如约58mol％(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。脂质颗粒可以包含从约28至约33mol％的固醇，例如从约28至约32mol％(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在一个实施例中，该脂质颗粒包含从约3至约12mol％，例如从约5至约12mol％、从约8至约12mol％或从约9至约11mol％的中性脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在另一个实施例中，该脂质颗粒包含约10mol％的中性脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在又另一个实施例中，该脂质颗粒包含从约0.5至约10mol％，例如从约0.5至约5mol％或从约1至约3mol％的能够减少聚集的脂质(例如PEG修饰的脂质)(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。另一个实施例是脂质颗粒，该脂质颗粒包含可生物降解阳离子脂质、中性脂质、固醇和能够减少聚集的脂质(例如PEG修饰的脂质)，其中该脂质颗粒包含从约55至约60mol％的可生物降解阳离子脂质和从约33至约28mol％的固醇(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在一个实施例中，该脂质颗粒包含约58mol％的可生物降解阳离子脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在另一个实施例中，该脂质颗粒包含从约3％至约12％的中性脂质、和从约0.5至约10mol％的能够减少聚集的脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在又另一个实施例中，该脂质颗粒包含约10mol％的中性脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在又另一个实施例中，该脂质颗粒包含约2mol％的能够减少聚集的脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在一个实施例中，该脂质颗粒包含从约55至约60mol％的阳离子脂质、从约3％至约12％的中性脂质、从约28至约33mol％的固醇、和从约0.5至约10mol％的能够减少聚集的脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在又另一个实施例中，该脂质颗粒包含约58％的阳离子脂质、约10％的中性脂质、约30％的固醇、和约2％的能够减少聚集的脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在又另一个实施例中，该脂质颗粒包含约55％的阳离子脂质、约10％的中性脂质、约33％的固醇、和约2％的能够减少聚集的脂质(基于脂质颗粒中100mol％的脂质组分)。在一个优选的实施例中，能够减少聚集的脂质是1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-甲氧基聚乙二醇(PEG-DMG)，例如具有平均聚乙二醇分子量为2000的PEG-DMG。一个实施例是阳离子脂质，该阳离子脂质具有式(A)：或其盐(例如其药学上可接受的盐)，其中R’不存在、是氢或烷基(例如C1-C4烷基)；对于R1和R2，(i)R1和R2各自独立地为任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基烷基、杂环或R10；(ii)R1和R2与它们所附接的氮原子一起形成任选取代的杂环；或(iii)R1和R2中的一个是任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基或杂环，而另一个与(a)相邻氮原子和(b)与氮原子相邻的(R)a基团形成4元至10元杂环或杂芳基(例如6元环)；R每次出现时独立地是-(CR3R4)-；R3和R4每次出现时独立地是H、卤素、OH、烷基、烷氧基、-NH2、R10、烷基氨基或二烷基氨基(在一个优选的实施例中，R3和R4每次出现时独立地是H或C1-C4烷基)；R10每次出现时独立地选自PEG和基于聚(噁唑啉)、聚(环氧乙烷)、聚(乙烯醇)、聚(甘油)、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚[N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺]和聚(氨基酸)的聚合物，其中(i)该PEG或聚合物是直链或支链的，(ii)该PEG或聚合物通过n个亚单元聚合，(iii)n是在10至200个单元之间的数均聚合度，并且(iv)其中具有式的化合物具有至多两个R10基团(优选地至多一个R10基团)；Q的虚线不存在或是键；当Q的虚线不存在时，则Q不存在或是-O-、-NH-、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有式(A)的化合物：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181001 US 62/739,5481.一种具有式(A)的化合物：



或其盐，其中
R’不存在、是氢或烷基；
对于R1和R2，
(i)R1和R2各自独立地为任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基烷基、杂环或R10；
(ii)R1和R2与它们所附接的氮原子一起形成任选取代的杂环；或
(iii)R1和R2中的一个是任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基或杂环，而另一个与(a)相邻氮原子和(b)与氮原子相邻的(R)a基团形成4元至10元杂环或杂芳基；
R每次出现时独立地是-(CR3R4)-；
R3和R4每次出现时独立地是H、卤素、OH、烷基、烷氧基、-NH2、R10、烷基氨基或二烷基氨基；
R10每次出现时独立地选自PEG和基于聚(噁唑啉)、聚(环氧乙烷)、聚(乙烯醇)、聚(甘油)、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚[N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺]和聚(氨基酸)的聚合物，其中(i)该PEG或聚合物是直链或支链的，(ii)该PEG或聚合物通过n个亚单元聚合，(iii)n是在10至200个单元之间的数均聚合度，并且(iv)该化合物具有至多两个R10基团；
Q的虚线不存在或是键；
当Q的虚线不存在时，则Q不存在或是-O-、-NH-、-N(R5)-、-S-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)N(R4)-、-N(R5)C(O)-、-S-S-、-OC(O)O-、-O-N＝C(R5)-、-C(R5)＝N-O-、-OC(O)N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-N(R5)C(O)O-、-C(O)S-、-C(S)O-或-C(R5)＝N-O-C(O)-；或
当Q的虚线是键时，则(i)b是0并且(ii)Q和与其相邻的叔碳(C*)形成取代的或未取代的具有从5至10个环原子的单环或双环杂环基；
R5每次出现时独立地是H或烷基；
X是亚烷基或亚烯基；
M1是可生物降解基团；
a是1、2、3、4、5或6；
b是0、1、2或3；
Z1是C6-C14支链烷基；并且
Z2是C4-C20烯基，其中该烯基可以任选地在双键的α位被一个或两个氟原子取代，该α位在双键和Z2的末端之间。


2.如权利要求1所述的化合物，其中R’R1R2N-(R)a-Q-(R)b-是(CH3)2N-(CH2)2-、(CH3)2N-(CH2)3-C(O)O-、(CH3)2N-(CH2)2-NH-C(O)O-、(CH3)2N-(CH2)2-OC(O)-NH-或(CH3)2N-(CH2)3-C(CH3)＝N-O-。


3.如权利要求1所述的化合物，其中R1和R2均为烷基。


4.如权利要求1或2所述的化合物，其中M1是-OC(O)-或-C(O)O-。


5.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z1是C6-C10支链烷基。


6.如权利要求5所述的化合物，其中Z1是-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH2CH3)、-CH2CH(iPr)(CH2CH2iPr)或-CH2CH(n-Bu)2。


7.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z2是含有一个或两个双键的C19烯基。


8.如权利要求7所述的化合物，其中Z2是-(CH2)9CH＝CHCH2CH＝CH(CH2)4CH3。


9.一种化合物，该化合物选自：






以及其盐。


10.一种具有式(A-I)的化合物：



或其盐，其中
s、t、u、v和q各自独立地是0、1、2、3、4、5、6或7；并且
W是头基。


11.如权利要求10所述的化合物，其中该头基是可质子化的胺基基团，其具有在约4至约11之间的pKa。


12.如权利要求10或11所述的化合物，其中该头基是(CH3)2N-(CH2)2-、(CH3)2N-(CH2)3-C(O)O-、(CH3)2N-(CH2)2-NH-C(O)O-、(CH3)2N-(CH2)2-OC(O)-NH-或(CH3)2N-(CH2)3-C(CH3)＝N-O-。


13.如权利要求10-12中任一项所述的化合物，其中s是3至5。


14.如权利要求13所述的化合物，其中s是4。


15.如权利要求10-14中任一项所述的化合物，其中t是4至6。


16.如权利要求15所述的化合物，其中t是5。


17.如权利要求10-16中任一项所述的化合物，其中q是2至4。


18.如权利要求17所述的化合物，其中q是3。


19.如权利要求10-18中任一项所述的化合物，其中u是0至2。


20.如权利要求19所述的化合物，其中u是1。


21.如权利要求10-20中任一项所述的化合物，其中v是0至2。


22.如权利要求21所述的化合物，其中v是1。


23.一种具有式(A-II)的化合物：



或其盐，其中
b是0、1、2或3；
s是0、1、2、3、4或5；
R200是C12-C22烷基、C12-C22烯基或C12-C22炔基；并且
R100是C5-C15烷基、C5-C15烯基或C5-C15炔基。


24.如权利要求23所述的化合物，其中b是1。


25.如权利要求23或24所述的化合物，其中s是2、3、或4。


26.如权利要求24所述的化合物，其中s是3。


27.如权利要求23-26中任一项所述的化合物，其中R100是C8-C12烷基。


28.如权利要求23-27中任一项所述的化合物，其中R200是C12-C14烷基、C12-C14烯基或C12-C14炔基。


29.如权利要求23-27中任一项所述的化合物，其中R200是C18-C20烷基、C18-C20烯基或C18-C20炔基。


30.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中该化合物呈药学上可接受的盐形式。


31.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中该化合物呈阳离子脂质形式。


32.一种脂质颗粒，该脂质颗粒包含中性脂质、能够减少聚集的脂质和如权利要求31所述的阳离子脂质。


33.如权利要求32所述的脂质颗粒，其中该中性脂质选自DSPC、DPPC、POPC、DOPE或SM；该能够减少聚集的脂质是PEG脂质；并且该脂质颗粒进一步包含固醇。


34.如权利要求32和33中任一项所述的脂质颗粒，其中该阳离子脂质以约20％...

【专利技术属性】
技术研发人员：穆图萨米·贾亚拉曼，何果，马丁·迈尔，
申请(专利权)人：阿尔尼拉姆医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US