本发明专利技术公开了一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法。该方法能够同时测定强力定眩片中天麻素、没食子酸、5‑羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂、蒙花苷12种化学成分的含量。研究结果表明，使用本发明专利技术的方法检测12种化学成分，在试验范围内线性关系良好(r＞0.9990)，平均加样回收率为96.0％～117.0％，RSD为1.00％～2.80％。本发明专利技术首次建立了采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，该方法准确、灵敏、测定结果不受药材、制剂中其他物质的干扰，专属性强，能够较为全面地对强力定眩片进行定性及化学成分的定量分析，为强力定眩片的质量控制提供了参考和依据。
【技术实现步骤摘要】
一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法
本专利技术涉及一种采用HPLC法测定药物中化学成分含量的方法，特别涉及一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法。本专利技术属于医药
技术介绍
强力定眩片(国药准字Z61020139)是陕西汉王药业有限公司独家生产的药品，是由天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎5味中药组成的复方制剂，其配伍精良，诸药合用共奏息风止痉、平肝潜阳、益气活血之效。主治高血压、高脂血证和眩晕等证。该药能解除血管痉挛，扩张血管，降低血黏稠度，提升患者脑组织中的去甲肾上腺素、多巴胺以及5-羟色胺水平，临床疗效显著。中药尤其是中药复方化学成分复杂，具有多靶点协同发挥药效的特点，单一化学成分定量难以全面反映中药材、中药复方质量。多指标性化学成分的定量能更加全面、客观地评价复方制剂的质量。强力定眩片的法定质量标准中缺乏反映药品质量的多化学成分定量检测指标。专利技术人在前期研究中采用液质联用技术定性研究了强力定眩片中的化学成分，结合相关文献研究、对照品比对、以及HPLC系统分析等方法验证，最终确定了强力定眩片中与质量控制和功效相关的化学成分主要包含但不限于12种。为此，本专利技术首次建立了采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种成分含量的方法，以期为强力定眩片的生产工艺和质量控制标准提供理论和技术支持。
技术实现思路
本专利技术的目的在于建立一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，该方法快速、准确、高效、灵敏，测定结果不受药材、制剂中其他物质的干扰，专属性强，能够较为全面地对强力定眩片进行定量检测和分析。为了达到上述目的，本专利技术采用了以下技术手段：本专利技术的一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，其中，所述的12种化学成分为天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备取供试品5-10片，去除薄膜衣，研细，精密称取0.4g，置5-50mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备精密称取天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内酯、蒙花苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液；(3)单味药材及阴性样品溶液的制备采用水煎煮、乙醇回流提取、浓缩和减压干燥工艺，分别制备天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎单味药材样品和缺天麻、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲叶、缺野菊花和川芎的阴性模拟样品，按步骤(1)的方法制成相应阴性对照溶液；(4)HPLC法测定12种化学成分含量色谱柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A)；检测波长：280nm；进样量：5μL；体积流量：0.8mL/min；柱温：30℃；(5)线性回归方程的制备分别精密吸取混合对照品溶液适量，逐级稀释成一系列不同质量浓度的标准溶液，按步骤(4)的色谱条件进样测定，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得到线性回归方程；(6)供试品溶液中12种化学成分含量的测定吸取供试品溶液按步骤(4)的色谱条件进样测定，得到供试品溶液中12种化学成分的色谱图，并确定相应的峰面积，分别将12种化学成分的峰面积带入所述线性回归方程，即可得到样品溶液中12种化学成分的含量。在本专利技术所述的方法中，优选的，步骤(1)中超声处理的时间为15-30min，功率为250W，频率为40kHz。在本专利技术所述的方法中，优选的，步骤(2)中每1mL所述的混合对照品溶液中含天麻素1.045mg、没食子酸1.002mg、5-羟甲基糠醛0.185mg、对羟基苯甲醇0.41mg、新绿原酸0.102mg、绿原酸0.1mg、香草酸0.135mg、对羟基苯甲醛0.136mg、松脂醇二葡萄糖苷0.109mg、槐角苷0.108mg、藁本内酯22mg、蒙花苷0.111mg。在本专利技术所述的方法中，优选的，步骤(1)和步骤(2)中所述的稀乙醇为45％-55％(v/v)的乙醇溶液。研究结果证明，使用本专利技术的检测方法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量，12种化学成分在试验范围内线性关系良好(r＞0.9990)，平均加样回收率为96.0％～117.0％，RSD为1.00％～2.80％。相较于现有技术，本专利技术的有益效果是：本专利技术首次建立了采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，该方法准确、灵敏、测定结果不受药材、制剂中其他物质的干扰，专属性强，能够较为全面地对强力定眩片进行定量检测和分析，为强力定眩片的质量控制提供了参考和依据。附图说明图1A-K为各成分HPLC色谱图；其中，1：天麻素；2：没食子酸；3:5-羟甲基糠醛；4：对羟基苯甲醇；5：新绿原酸；6：绿原酸；7：香草酸；8：对羟基苯甲醛；9：松脂醇二葡萄糖苷；10：槐角苷；11：藁本内酯；12：蒙花苷。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术不限于以下实施例。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神及范围下可对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例11.材料1.1仪器LC-2010CHT高效液相色谱仪(日本岛津公司)，LCLabsolution色谱工作站(日本岛津公司)，BSA2202S型电子天平(德国sartorius公司)，移液枪(德国Eppendorf)，Milli-QIntegral5超纯水一体化系统(密理博公司)；KQ-500E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，250W，40kHz)。1.2试剂与药物6批强力定眩片批号007101、024102、019101、016101、021101、026102均由陕西汉王药业股份有限公司提供。天麻素(HR16313B1，纯度≥98.0％)、5-羟甲基糠醛(HH248894198，纯度≥98.0％)、对羟基苯甲醇(H21D6Q7813，纯度≥98.0％)、新绿原酸(HR20422B1，纯度≥98.0％)、对羟基苯甲醛(HA060208198，纯度≥98.0％)、松脂醇二葡萄糖苷(HS0870W2，纯度≥98.0％)、藁本内酯(HL09355198，纯度≥98.0％)等对照品均购自宝鸡辰光生物科技有限公司；绿原酸(110753-201415，纯度≥96.20％)、蒙花苷(1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，其特征在于，所述的12种化学成分为天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步骤：/n(1)供试品溶液的制备/n取供试品5-10片，去除薄膜衣，研细，精密称取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；/n(2)对照品溶液的制备/n精密称取天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内酯、蒙花苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液；/n(3)单味药材及阴性样品溶液的制备/n采用水煎煮、乙醇回流提取、浓缩和减压干燥工艺，分别制备天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎单味药材样品和缺天麻、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲叶、缺野菊花和川芎的阴性模拟样品，按步骤(1)的方法制成相应阴性对照溶液；/n(4)HPLC法测定12种化学成分含量/n色谱柱：Lamdo Stamsil C
【技术特征摘要】
1.一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，其特征在于，所述的12种化学成分为天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备
取供试品5-10片，去除薄膜衣，研细，精密称取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(2)对照品溶液的制备
精密称取天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内酯、蒙花苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液；
(3)单味药材及阴性样品溶液的制备
采用水煎煮、乙醇回流提取、浓缩和减压干燥工艺，分别制备天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎单味药材样品和缺天麻、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲叶、缺野菊花和川芎的阴性模拟样品，按步骤(1)的方法制成相应阴性对照溶液；
(4)HPLC法测定12种化学成分含量
色谱柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗欢欢，冯泽宇，李捷，田惠玲，谢艳华，肖会敏，王四旺，李志平，
申请(专利权)人：陕西汉王药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61
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