嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus及其应用制造技术

本发明专利技术提出一种嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术提供的嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.21712。本发明专利技术提供的嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus可高效降解花椒粕中的烷基酰胺，此外，利用嗜酸乳杆菌对花椒粕固体发酵还显著降低了抗营养因子的含量，使动物更容易吸收营养，因此，将发酵花椒粕作为一种饲料添加剂还具有广阔的商业应用前景。

【技术实现步骤摘要】
嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus及其应用
本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus及其应用。
技术介绍
农副产品残渣(例如豆粕、棉籽粕、菜籽粕)作为动物饲料资源是一种可行的方法，它可以解决垃圾处理、食品安全以及资源短缺和环境污染的问题。花椒属于芸香科，因其良好的耐受性，在中国和东南亚广泛分布。因其独特的风味每年约有30％的花椒被用于压榨，制为花椒油。但是，花椒榨油后的副产物(花椒粕)通常在榨油后作为废物丢弃。花椒粕是高营养价值的副产品，与其他农业副产品相比，其具有较高的抗微生物、抗病毒、抗肿瘤、抗炎和抗氧化活性。因此，花椒粕是饲料添加剂的有利来源。花椒粕包含各种生物活性成分，其中烷基酰胺是导致刺痛和麻木感的主要成分。烷基酰胺具有长链不饱和脂肪结构和强刺激性以及例如麻醉效果、抗氧化活性以及抗微生物和抗炎特性的其他生理功能。但是，花椒粕会抑制动物的进食，例如大鼠避免食用含有花椒烷基酰胺的处理的威化饼，因为烷基酰胺会刺激大鼠中的三叉神经感觉神经元。尽管烷基酰胺对健康有益，但其高含量会使得花椒粕成为饲料添加剂有局限性。因此动物健康、经济损失和潜在的环境污染需要一种实用的方法，以尽量减少花椒粕中烷基酰胺的含量。传统方法比如加热、切碎、高压、干燥等方法可降解烷基酰胺，但是存在制备时间长、成本高、有效性低等诸多缺点。当前，生物法被认为是环境友好的并且在经济上可能是可行的替代方法。众所周知，乳酸菌对于废物的降解和利用极为重要，因为它们可以利用营养物将其转化为其他可利用的物质。花椒粕中存在乳酸菌菌株，已有研究表明，用鼠李糖乳杆菌发酵后，青花椒提取物中的抗炎、抗菌和抗黑色素生成活性增强。但是，目前没有研究探究花椒粕中烷基酰胺的乳酸菌降解。
技术实现思路
本专利技术提供了一种嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus及其应用，该菌可高效降解花椒粕中的烷基酰胺，此外，利用嗜酸乳杆菌对花椒粕固体发酵还显著降低了抗营养因子的含量，使动物更容易吸收营养，因此，将发酵花椒粕作为一种饲料添加剂还具有广阔的商业应用前景。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus，该菌株已于2021年1月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNO.21712。本专利技术还提供了一种根据上述技术方案所述的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus在花椒粕中对其烷基酰胺进行生物降解中的应用。作为优选，以花椒粕为发酵基质，加入嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus，经固态发酵处理降解烷基酰胺。作为优选，固态发酵处理时，所加入的花椒粕与水的质量比为1：(0.4-0.7)，优选1：(0.6-0.7)。作为优选，固态发酵处理时，所加入的葡萄糖浓度为0.5％-1.5％mg/g，优选0.5％-1.0％mg/g，更优选1.0％mg/g。作为优选，固态发酵处理时，所加入的纤维素酶浓度为0.01％-0.05％mg/g，优选0.01％-0.03％mg/g，优选0.01％mg/g。作为优选，固态发酵处理时，所接种的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus菌数为9×107-1.5×108cfu/g，优选9×107cfu/g。作为优选，固态发酵处理时，固态发酵的发酵温度为34-37℃，优选37℃；初始pH为5.5-6.5，优选6.0；发酵周期为12-36h，优选为30-36h，更优选为36h。本专利技术还提供了一种烷基酰胺降解剂，采用上述技术方案所述的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus制备得到。作为优选，还包括生理上可接受的载体，其中，所接种的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus菌数为9×107-1.5×108cfu/g。本专利技术还提供了一种发酵花椒粕，其通过与嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus经共同固态发酵培养得到，其中，发酵花椒粕中的生物碱得到高效降解。作为优选，花椒粕中的烷基酰胺降解率达到51.86％。本专利技术还提供了一种饲料添加剂，采用上述技术方案所述的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus制备得到。与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：1、本专利技术提供了一株嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus，其从花椒粕中分离筛选得到，可高效降解花椒粕中的烷基酰胺。2、利用嗜酸乳杆菌与花椒粕进行固态发酵，在料水比为1:0.6、纤维素酶浓度0.01％、接种量9×107cfu/g、发酵温度37℃、初始pH6.0、发酵时间为36h的发酵条件下，烷基酰胺的最低含量为2.96，降解率达到51.86％。3、利用嗜酸乳杆菌对花椒粕固体发酵显著降低了抗营养因子的含量，使动物更容易吸收营养。因此，将发酵花椒粕作为一种饲料添加剂具有广阔的商业应用前景。附图说明图1为本专利技术实施例提供的不同乳酸菌菌株对花椒粕烷基酰胺含量的影响示意图；其中，R3，L.paracasei；R6，L.acidipiscis；R11，L.acidipiscis；R13，L.sp.；R20，L.acidipiscis；图2为本专利技术实施例提供的固态发酵发酵基质优化示意图；其中，a为料水比，b为葡萄糖浓度，c为纤维素酶浓度；图3为本专利技术实施例提供的固态发酵条件的优化示意图：其中，a为接种量，b为发酵温度，c为初始pH，d为发酵周期。图4为本专利技术实施例提供的花椒粕和发酵花椒粕的细菌群落；其中，细菌群落以门水平(a)和属水平(b)显示。图5为本专利技术实施例提供的花椒粕和发酵花椒粕基于种水平的Circos分析示意图。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例11.1乳酸菌菌株的分离与鉴定在锥形瓶中称重10g花椒粕，然后将50mL无菌水添加到锥形瓶中。在摇床中以180rpm摇动30分钟来制备悬浮液。将细胞悬浮液逐渐稀释至10-1-10-6。将每种梯度稀释的细胞悬浮液(100μL)在MRS培养基上涂布。将所有板在恒温培养箱中于37℃倒置48小时。选择单个菌落并在新的MRS板上划线，直到在显微镜下菌落的形态一致为止，将纯菌株储存在-20℃。参考伯杰细菌鉴定手册，根据革兰氏染色、形态学、过氧化氢酶鉴定筛选菌株，并根据16SrDNA基因序列分析的特点，进一步鉴定了这些乳酸菌菌株。具体方法如下：用试剂盒提取DNA，乳酸菌16Sr本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus，其特征在于，该菌株已于2021年1月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.21712。/n

【技术特征摘要】
1.嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus，其特征在于，该菌株已于2021年1月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNO.21712。


2.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus在花椒粕中对其烷基酰胺进行生物降解中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，以花椒粕为发酵基质，加入嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus，经固态发酵处理降解烷基酰胺。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，固态发酵处理时，所加入的花椒粕与水的质量比为1：(0.4-0.7)，优选1：(0.6-0.7)。


5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，固态发酵处理时，所加入的葡萄糖浓度为0.5％-1.5％mg/g，优选0.5％-1.0％mg/g，更优选1.0％mg/g。


6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔青，黎晨曼，牟海津，张芳，
申请(专利权)人：中国海洋大学，威海迪普森生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37