一种荧光探针及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种荧光探针及其制备方法与应用。该探针以萘酰亚胺为荧光信号单元，以甲酰胺作为过氧亚硝酸根响应基团，响应速度快，灵敏度高，选择性好。此外，探针结构中的吡啶阳离子使其能够靶向聚集于线粒体，苄基氯基团能够与线粒体内的巯基蛋白形成共价连接，进而使探针锚定在线粒体内，即使线粒体膜电位显著降低甚至完全消失，探针也不会从线粒体内渗出，从而对线粒体内的过氧亚硝酸根进行稳定和精准的荧光成像检测。

【技术实现步骤摘要】
一种荧光探针及其制备方法与应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种靶向锚定线粒体中过氧亚硝酸根的荧光探针及其制备方法与应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。在生物体内，过氧亚硝酸根(ONOO-)是重要的活性氮物种，由超氧阴离子自由基和一氧化氮反应生成，能同时代表氧化应激和硝化应激的水平。而且，现有研究已表明，ONOO-与多种疾病的发生和发展密切相关，包括神经退行性疾病、糖尿病、癌症等。线粒体是活性氧和活性氮生成的主要细胞器，也是过氧亚硝酸根(ONOO-)产生的主要场所。ONOO-的生成、发生反应和发挥作用大部分都是在线粒体中进行的。线粒体可以生成ONOO-，也可以消耗ONOO-。许多与ONOO-相关的生化反应，能够调节线粒体的功能。因此，检测线粒体内ONOO-的浓度变化尤为重要。目前传统的检测线粒体内ONOO-的荧光探针，其结构中带有正电荷，因受到线粒体内膜负电位的牵引而靶向聚集本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种荧光探针，其特征在于：结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.一种荧光探针，其特征在于：结构式为：



其中，R1选自氢、乙酰基、C1-C8的直链烷基、F、Cl或CN。


2.权利要求1所述的荧光探针在对活细胞线粒体中过氧亚硝酸根进行荧光成像检测方面的应用。


3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：检测方法包括如下步骤：将培养的细胞经适当处理后，用权利要求1所述的荧光探针的二甲基亚砜溶液孵育，去除上述溶液，并用PBS清洗，然后进行激光共聚焦成像；
优选的，孵育时间为20-40分钟。


4.权利要求1所述的荧光探针的制备方法，其特征在于：将化合物1和化合物2溶于乙腈中进行反应，即得所述荧光探针；
反应方程式为：





5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：将化合物3溶于甲酸中进行反应，制备得到化合物1；
反应方程式为：





6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：将化合物4和化合物5溶于无水乙醇中，反应得到化合物3；
反应方程式为：

【专利技术属性】
技术研发人员：解希雷，孙园玉，唐波，王栩，
申请(专利权)人：山东师范大学，
类型：发明
国别省市：山东;37