一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法，所述疫苗能够高效表达两种抗原，即本身的HA抗原与外源的SC2R1抗原，这使得该疫苗能诱发两种抗原的免疫反应，达到同时预防流感病毒和新冠肺炎病毒的目的，一次性解决流感和新冠两大传染病对社会经济等带来的影响。同时，流感疫苗基于现有成熟流感平台技术，可大规模制备生产，且流感疫苗使用历史悠久，具有良好安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法
本专利技术涉及一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法。
技术介绍
新型冠状病毒SARS-CoV-2的潜伏期可长达24天，传染性强，与引发非典SARS病毒不同，部分病例潜伏期具有传染性，另有一些病毒携带者没有表现出任何明显症状。这对疫情的防控增加了难度。针对新型冠状病毒，目前国内外尚无明确验证的特效抗病毒药物。因此做好预防，阻断病毒的传播是控制疫情的关键。而疫苗的应用已在消除多种传染病中发挥了不可替代的作用。流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，传播速度快，传染性强，并具有一定季节性。流感病毒会不定期地引起大流行，导致严重的呼吸系统疾病,死亡率很高。流感病毒完整基因片段的重组形成新亚型，而且由于人群缺少对新亚型变异病毒株的免疫力，从而引起大流行。病毒基因突变的发生以及新亚型病毒的出现，都引起了人们对健康问题的担忧。由于耐药性的产生，流感没有得到有效的控制，所以疫苗接种是预防和控制流感的主要策略。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种基于流感病毒载体的的新型冠状病毒疫苗。本专利技术的第二个目的在于提供一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗的制备方法。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供一种基于流感病毒载体的的新型冠状病毒疫苗，其包括负载有新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1的流感病毒载体。作为优选的：所述的疫苗为DNA质粒或RNA表达质粒。作为优选的：所述流感病毒载体包含截短的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M或NS基因序列，截短的基因序列保留3’与5’端的编码区包装信号序列；所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1插入截短的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M或NS基因序列中。优选在PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M或NS截短基因序列的开放阅读框中插入新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1。作为优选的：所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R13’端连接有NA基因截短片段，所述NA基因截短片段包含3’端编码区包装信号。NA是流感病毒粒子表面的第二种糖蛋白，是一种典型的Ⅱ型糖蛋白，氨基端朝向病毒粒子内部。NA蛋白在结构上形成一个四聚体，每个蛋白单体都由一段短的非保守的氨基端细胞质区、一个疏水的跨膜区、一个茎区和一个球状的头部组成。本申请选取3’端第1-201个核苷酸，该段包含了NA的3’端编码区包装信号(183个核苷酸)，将该段与新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1用接头序列连接，再插入截短的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M或NS基因序列上。此时，NA的第1-201个核苷酸作为一个基座，达到将新型冠状病毒S蛋白受体结合区带到流感病毒表面的目的。所述NA基因截短片段所编码的氨基酸序列为：MNPNQKITTIGSICLVVGLISLILQIGNIISIWISHSIQTGSQNHTGICNQNIITYKNSTWVKDTTS(SEQIDNO.1)；作为优选的：所述NA基因截短片段的核苷酸序列为：atgaatccaaatcagaaaataacaaccattggatcaatctgtctggtagtcggactaattagcctaatattgcaaatagggaatataatctcaatatggattagccattcaattcaaactggaagtcaaaaccatactggaatatgcaaccaaaacatcattacctataaaaatagcacctgggtaaaggacacaacttca(SEQIDNO.2)。作为优选的：所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1与NA基因截短片段通过接头序列(Linker)相连。常用的linker有GGGSG、GGGGS或GSG。当然，还可以采用其他常用的融合蛋白linker。作为优选的：所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区的氨基酸序列如下所示：RVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCS(SEQIDNO.3)新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因SC2R1的核苷酸序列如下所示：agggtgcagccaacagagtccatcgtgcgctttcccaatatcaccaacctgtgcccttttggcgaggtgttcaatgccacacgcttcgccagcgtgtacgcctggaataggaagcgcatctccaactgcgtggccgactattctgtgctgtacaacagcgcctccttctctacctttaagtgttatggcgtgagccccaccaagctgaatgatctgtgctttacaaacgtgtacgccgattccttcgtgatcaggggcgacgaggtgcgccagatcgcaccaggacagaccggcaagatcgcagactacaattataagctgcctgacgatttcacaggctgcgtgatcgcctggaactctaacaatctggatagcaaagtgggcggcaactacaattatctgtaccggctgtttagaaagtctaatctgaagccattcgagcgggacatctccaccgagatctaccaggccggctctacaccctgcaatggcgtggagggctttaactgttatttccctctgcagtcctacggcttccagccaaccaacggcgtgggctatcagccctacagagtggtggtgctgtcttttgagctgctgcacgcacctgcaaccgtgtgcggcccaaagaagagcacaaatctggtgaagaacaagtgcgtgaacttcaacttcaacggactgaccggcacaggcgtgctgaccgagagcaacaagaagttcctgccatttcagcagttcggcagggacatcgcagataccacagacgccgtgcgcgaccctcagaccctggagatcctggacatcacaccatgttcc(SEQIDNO.4)。所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区的氨基酸序列所表达的蛋白可在人体内：诱导免疫应答；或产生生物报告分子；或用于检测的追踪分子；或调节基因功能；或作为治疗性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗，其特征在于：所述疫苗包括负载有新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因序列的流感病毒载体；优选地，所述S蛋白受体结合区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗，其特征在于：所述疫苗包括负载有新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因序列的流感病毒载体；优选地，所述S蛋白受体结合区的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述疫苗，其特征在于：所述氨基酸序列所表达的蛋白可在人体内：
诱导免疫应答；或
产生生物报告分子；或
用于检测的追踪分子；或
调节基因功能；或
作为治疗性分子。


3.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于：所述的疫苗为DNA质粒或RNA表达质粒。


4.权利要求1所述的疫苗，其特征在于：所述流感病毒载体包含截短的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M或NS基因序列，截短的基因序列保留3’与5’端的编码区包装信号序列。


5.根据权利要求1-4任一项所述的疫苗，其特征在于：所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区编码基因核苷酸序列的3’端连接有NA基因截短片段，所述NA基因截短片段包含3’端编码区包装信号。


6.根据权利要5所述的疫苗，其特征在于：所述NA基因截短片段编码的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；优选地，所述NA基因截短片段的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


7.根据权利要求1-6任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凌，韩璐杰，杨臣臣，汪乾，
申请(专利权)人：广州恩宝生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44