一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用。本发明专利技术融合蛋白包括鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白。本发明专利技术通过基因工程的方法，将鸡α干扰素基因与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因连接，并进行密码子优化，构建表达载体，诱导融合蛋白表达，来促进鸡α干扰素在表达系统中的可溶表达，从而解决了鸡α干扰素在原核系统呈不可溶的难题，提高了准确性和重复性。本发明专利技术提供的鸡α干扰素融合蛋白的生产方法操作简单、成本低，可实现鸡α干扰素规模化生产。本发明专利技术生产的鸡α干扰素融合蛋白具有良好的生物学活性和稳定性，对鸡病毒性传染病的防治具有重大的意义。性传染病的防治具有重大的意义。性传染病的防治具有重大的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种可溶性鸡
α
干扰素融合蛋白及其生产方法与应用


[0001]本专利技术属于生物技术药物
，具体涉及一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用。

技术介绍

[0002]鸡α干扰素是一类能够广泛表达于多种单核细胞如巨噬细胞、树突状细胞及成纤维细胞等的细胞因子，在兽医临床中，因其具有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等多重功能而应用广泛。当病毒入侵动物体内，最先引起干扰素的分泌及抵御。干扰素的生物学功能主要有，增强免疫调节活性，抑制病毒增殖以及抑制肿瘤和相关细胞生长。干扰素功能多样，但过去因干扰素生产成本较高，家禽若非重大疫病，较少使用干扰素，也就意味着干扰素在家禽养殖市场并没有充分地体现其使用价值。
[0003]2018年非洲猪瘟疫情对中国养猪行业产生了巨大的冲击，家禽的供需进一步增加，这种状况，增加了中国大部分地区家禽的经济价值及食用价值，人们对肉食物质的追求，也造就了如今家禽供不应求的情况。据统计，2018年以来，蛋鸡价格经历了多轮上涨，蛋鸡养殖成效显著，家禽的经济价值得以体现，提高了家禽在养殖业的应用。家禽价值的提高，鸡α干扰素的功能在家禽临床得到更为充分的体现，通过一些易操作、成本低的手段来获得大量的鸡α干扰素迫不及待。
[0004]原核表达系统成本低、易操作，易获得大量的目的蛋白，较容易实现规模化生产，是获得大量鸡α干扰素的一种可靠方法。然而，鸡α干扰素在原核系统中以包涵体形式存在而难以通过原核表达系统实现规模化生产，阻碍了鸡α干扰素在临床中广泛应用。

技术实现思路
<br/>[0005]鉴于鸡α干扰素成本高，应用广，在原核表达系统中以包涵体形式存在，需要变复性，产量低，而难以通过原核表达系统实现规模化生产，阻碍了鸡α干扰素在临床中广泛应用，本专利技术的第一个目的在于提供一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白。这是一种在原核表达系统中，呈可溶性表达的鸡α干扰素，可实现规模化生产。
[0006]本专利技术的第二个目的在于提供编码上述可溶性鸡α干扰素融合蛋白的基因。
[0007]本专利技术的第三个目的在于提供上述可溶性鸡α干扰素融合蛋白的生产方法。
[0008]本专利技术的第四个目的在于提供上述可溶性鸡α干扰素融合蛋白的应用。
[0009]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0010]一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白，包括鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白，鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白连接。
[0011]所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白还包括还包括连接肽，鸡α干扰素、连接肽与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白依次连接。
[0012]所述的鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的氨基酸序列如下：
[0013]MAQVINTNSLSLLTQNNLNKSQSALGTAIERLSSGLRINSAKDDAAGQAIANRFTANIKGLTQASRNA
NDGISIAQTTEGALNEINNNLQRVRELAVQSANSTNSQSDLDSIQAEITQRLNEIDRVSGQTQFNGVKVLAQDNTLTIQVGANDGETIDIDLKQINSQTLGLDTLNVQQKYKVSDTAATVTGYADTTIALDNSTFKASATGLGGTDQKIDGDLKFDDTTGKYYAKVTVTGGTGKDGYYEVSVDKTNGEVTLAGGATSPLTGGLPATATEDVKNVQVANADLTEAKAALTAAGVTGTASVVKMSYTDNNGKTIDGGLAVKVGDDYYSATQNKDGSISINTTKYTADDGTSKTALNKLGGADGKTEVVSIGGKTYAASKAEGHNFKAQPDLAEAAATTTENPLQKIDAALAQVDTLRSDLGAVQNRFNSAITNLGNTVNNLTSARSRIEDSDYATEVSNMSRAQILQQAGTSVLAQANQVPQNVLSLLR。
[0014]所述的鸡α干扰素的氨基酸序列为去除信号肽序列的鸡α干扰素氨基酸序列，其氨基酸序列如下：
[0015]CNHLRPQDATFSHDSLQLLRDMAPTLPQLCPQHNASCSFNDTILDTSNTRQADKTTHDILQHLFKILSSPSTPAHWNDSQRQSLLNRIHRYTQHLEQCLDSSDTRSRTRWPRNLHLTIKKHFSCLHTFLQDNDYSACAWEHVRLQARAWFLHIHNLTGNTRT。
[0016]所述的连接肽优选为柔性的连接肽；更优选为氨基酸序列为(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)
n
的连接肽，式中所述n是2～10的整数；最优选为氨基酸序列为(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)3的连接肽。
[0017]优选地，所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白的氨基酸全序列为(亦如SEQ ID NO.1所示)：
[0018]MAQVINTNSLSLLTQNNLNKSQSALGTAIERLSSGLRINSAKDDAAGQAIANRFTANIKGLTQASRNANDGISIAQTTEGALNEINNNLQRVRELAVQSANSTNSQSDLDSIQAEITQRLNEIDRVSGQTQFNGVKVLAQDNTLTIQVGANDGETIDIDLKQINSQTLGLDTLNVQQKYKVSDTAATVTGYADTTIALDNSTFKASATGLGGTDQKIDGDLKFDDTTGKYYAKVTVTGGTGKDGYYEVSVDKTNGEVTLAGGATSPLTGGLPATATEDVKNVQVANADLTEAKAALTAAGVTGTASVVKMSYTDNNGKTIDGGLAVKVGDDYYSATQNKDGSISINTTKYTADDGTSKTALNKLGGADGKTEVVSIGGKTYAASKAEGHNFKAQPDLAEAAATTTENPLQKIDAALAQVDTLRSDLGAVQNRFNSAITNLGNTVNNLTSARSRIEDSDYATEVSNMSRAQILQQAGTSVLAQANQVPQNVLSLLRGGGGSGGGGSGGGGSCNHLRPQDATFSHDSLQLLRDMAPTLPQLCPQHNASCSFNDTILDTSNTRQADKTTHDILQHLFKILSSPSTPAHWNDSQRQSLLNRIHRYTQHLEQCLDSSDTRSRTRWPRNLHLTIKKHFSCLHTFLQDNDYSACAWEHVRLQARAWFLHIHNLTGNTRT。
[0019]编码上述可溶性鸡α干扰素融合蛋白的基因，可通过密码子规则得到；优选为依据宿主菌密码子使用偏好，进行密码子优化设计得到；最优选地，所述的鸡α干扰素融合蛋白的基因的序列如下所示(亦如SEQ ID NO.2所示)：
[0020]ATGGCTCAGGTCATTAATACGAACAGCTTGTCATTGCTGACGCAGAACAACCTCAATAAATCGCAATCAGCGTTGGGGACAGCCATCGAGCGGTTGTCGTCAGGTTTGCGCATTA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白，其特征在于：包括鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白，鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白连接；所述的鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的氨基酸序列如下：MAQVINTNSLSLLTQNNLNKSQSALGTAIERLSSGLRINSAKDDAAGQAIANRFTANIKGLTQASRNANDGISIAQTTEGALNEINNNLQRVRELAVQSANSTNSQSDLDSIQAEITQRLNEIDRVSGQTQFNGVKVLAQDNTLTIQVGANDGETIDIDLKQINSQTLGLDTLNVQQKYKVSDTAATVTGYADTTIALDNSTFKASATGLGGTDQKIDGDLKFDDTTGKYYAKVTVTGGTGKDGYYEVSVDKTNGEVTLAGGATSPLTGGLPATATEDVKNVQVANADLTEAKAALTAAGVTGTASVVKMSYTDNNGKTIDGGLAVKVGDDYYSATQNKDGSISINTTKYTADDGTSKTALNKLGGADGKTEVVSIGGKTYAASKAEGHNFKAQPDLAEAAATTTENPLQKIDAALAQVDTLRSDLGAVQNRFNSAITNLGNTVNNLTSARSRIEDSDYATEVSNMSRAQILQQAGTSVLAQANQVPQNVLSLLR；所述的鸡α干扰素的氨基酸序列如下：CNHLRPQDATFSHDSLQLLRDMAPTLPQLCPQHNASCSFNDTILDTSNTRQADKTTHDILQHLFKILSSPSTPAHWNDSQRQSLLNRIHRYTQHLEQCLDSSDTRSRTRWPRNLHLTIKKHFSCLHTFLQDNDYSACAWEHVRLQARAWFLHIHNLTGNTRT。2.根据权利要求1所述的可溶性...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓冰，冯赛祥，罗开健，施建鑫，李伟业，陈爱华，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：