一种高效的氨基酸发酵液低温加压灭菌方法技术

本发明专利技术涉及一种高效的氨基酸发酵液低温加压灭菌方法，包括下述步骤，将氨基酸发酵液在0.1

【技术实现步骤摘要】
一种高效的氨基酸发酵液低温加压灭菌方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种高效的氨基酸发酵液低温 加压灭菌方法。

技术介绍

[0002]微生物发酵法制备氨基酸的方法具有生物基原料、高效率转化、反 应温和、环保经济等优点，从而被行业广泛运用。该方法以葡萄糖为原 料，经微生物发酵获得氨基酸发酵液。发酵液经除菌、脱色、浓缩、结 晶、分离等处理，得到氨基酸产品。
[0003]灭菌是发酵液的必要处理步骤之一。灭菌使发酵液中的菌体蛋白变 性凝固而终止反应，避免活菌外泄和噬菌体感染。发酵液的灭菌方式主 要是蒸汽灭菌，在80
‑
90℃下对发酵液热处理10
‑
20分钟，彻底消灭活菌。 高温情况下，发酵液易发生复杂的化学反应(如美拉德反应)，产生色 素和其他杂质成分，为后续纯化处理增加难度，影响L
‑
缬氨酸纯度和外 观。因此，本领域亟需一种高效的灭菌方法，提高灭菌效益。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种高效的氨基酸发酵液低温加压灭菌方 法，包括下述步骤，将氨基酸发酵液在0.1
‑
0.4MPa和不高于80℃条件下 进行灭菌处理，制得氨基酸发酵灭菌液。
[0005]本专利技术优选的技术方案，所述氨基酸发酵液选自甘氨酸发酵液、丙 氨酸发酵液、缬氨酸发酵液、亮氨酸发酵液、异亮氨酸发酵液、脯氨酸 发酵液、色氨酸发酵液、丝氨酸发酵液、酪氨酸发酵液、半胱氨酸发酵 液、苯丙氨酸发酵液、天冬酰胺发酵液、苏氨酸发酵液、天冬氨酸发酵 液、谷氨酸发酵液、赖氨酸发酵液、蛋氨酸发酵液、精氨酸发酵液、组 氨酸发酵液中的任一种。
[0006]本专利技术优选的技术方案，所述灭菌压力为0.2
‑
0.3MPa。
[0007]本专利技术优选的技术方案，所述灭菌温度为50
‑
65℃，优选为53
‑
57℃。
[0008]本专利技术优选的技术方案，所述灭菌时间≥20分钟，优选为25
‑
30分 钟。
[0009]本专利技术优选的技术方案，所述低温灭菌方法的活菌数为0。
[0010]本专利技术优选的技术方案，所述氨基酸发酵灭菌液的透光率≥45％，优 选为≥50％。
[0011]本专利技术优选的技术方案，所述氨基酸发酵液为缬氨酸发酵液。
[0012]本专利技术优选的技术方案，所述缬氨酸发酵液的制备包括下述步骤， 将缬氨酸生产菌接种到发酵培养基中，将其置于30
‑
38℃、pH6
‑
7条件下 发酵培养至残糖量≤0.5g/L，制得缬氨酸发酵液。
[0013]本专利技术优选的技术方案，所述缬氨酸生产菌的接种方法包括下述步 骤：
[0014](1)将缬氨酸生产菌按照接种量为1
‑
5％接种到LB培养基中，将 其置于180
‑
220r/min、35
‑
37℃、pH6
‑
7条件下培养至OD值3
‑
4，得到 LB种子液；
[0015](2)将LB种子液按照0.5
‑
5％接种量转接至合成培养基中，将其置 于180
‑
220r/min、35
‑
37℃、pH6
‑
7条件下培养至OD值3
‑
4，得到种子培 养液；
[0016](3)将种子培养液按接种量0.5
‑
10％接种到发酵培养基中。
[0017]本专利技术优选的技术方案，LB培养基组成为：8
‑
10g/L蛋白胨、5
‑
10g/L 酵母粉和8
‑
10g/L氯化钠。
[0018]本专利技术优选的技术方案，合成培养基组成为：甘油8
‑
10g/L、磷酸二 氢钾18
‑
21g/L、硫酸铵5
‑
7g/L、硫酸镁1
‑
2g/L、酵母粉1.0
‑
1.2g/L、维生 素B1为0.002
‑
0.004g/L，灭菌前用氨水调pH7.3
‑
7.5。
[0019]本专利技术优选的技术方案，发酵培养基的组成为：葡萄糖100
‑
150g/L、 磷酸二氢钾18
‑
22g/L、硫酸铵5
‑
6g/L、VB1为0.010
‑
0.012g/L、七水硫酸 镁2
‑
3g/L、硫酸铜0.03
‑
0.05g/L、七水硫酸亚铁0.02
‑
0.04g/L、聚醚消泡 剂0.2mL/L。
[0020]本专利技术优选的技术方案，所述发酵培养方式选自厌氧发酵、微通氧 发酵、先需氧后厌氧发酵的任一种或其组合。
[0021]除非另有说明，本专利技术涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百 分比为体积/体积百分比；本专利技术涉及液体与固体之间的百分比时，所述 百分比为体积/重量百分比；本专利技术涉及固体与液体之间的百分比时，所 述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。
[0022]除非另有说明，本专利技术采用如下检测方法：
[0023]透光率：采用紫外分光光度计，以去离子水为参照，待测溶液在 430nm波长下进行检测，获得透光率。
[0024]与现有技术相比，本专利技术具有下述有益技术效果：
[0025]本专利技术的低温加压灭菌方法的活菌数为0，绿色环保，且灭菌温度 低，能耗低，提高了灭菌发酵液的透光率并降低了灭菌发酵液中的色素 含量，利于脱色处理，显著降低成本，适合工业化生产。
具体实施方式
[0026]通过以下实施例和实验例进一步详细说明本专利技术。这些实施例和实 验例仅用于说明性目的，而并非用于限制本专利技术的范围。
[0027]黄色短杆菌(拉丁文名称：Brevibacterium flavum HHVLA
‑
002，保 藏编号：CCTCC NO:M 2019496，保藏日期：2019年06月26日，保 藏地点：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八 一路珞珈山。)，甘油管保藏(菌种终浓度为0.5
‑
1.0OD)。
[0028]具体实施方式中所用的培养基包括：
[0029]LB培养基的组成为：10g/L蛋白胨、10g/L酵母粉和10g/L氯化钠， 121℃灭菌30min。
[0030]合成培养基的组成为：甘油10g/L、磷酸二氢钾18g/L、硫酸铵5g/L、 硫酸镁2g/L、酵母粉1.2g/L、维生素B1为0.004g/L，灭菌前用氨水调 pH 7.3
‑
7.5，121℃灭菌30min。
[0031]发酵培养基的组成为：葡萄糖150g/L、磷酸二氢钾18g/L、硫酸铵 6g/L、VB1为0.010g/L、七本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效的氨基酸发酵液低温加压灭菌方法，包括下述步骤，将氨基酸发酵液在0.1
‑
0.4MPa和不高于80℃条件下进行灭菌处理，制得氨基酸发酵灭菌液。2.根据权利要求1所述的灭菌方法，所述氨基酸发酵液选自甘氨酸发酵液、丙氨酸发酵液、缬氨酸发酵液、亮氨酸发酵液、异亮氨酸发酵液、脯氨酸发酵液、色氨酸发酵液、丝氨酸发酵液、酪氨酸发酵液、半胱氨酸发酵液、苯丙氨酸发酵液、天冬酰胺发酵液、苏氨酸发酵液、天冬氨酸发酵液、谷氨酸发酵液、赖氨酸发酵液、蛋氨酸发酵液、精氨酸发酵液、组氨酸发酵液中的任一种。3.根据权利要求1
‑
2任一项所述的灭菌方法，所述灭菌压力为0.2
‑
0.3MPa。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的灭菌方法，所述灭菌温度为50
‑
65℃，优选为53
‑
57℃。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的灭菌方法，所述低温灭菌方法的活菌数为0。6.根据权利要求1
‑
5任一项所述的灭菌方法，所述氨基酸发酵灭菌液的透光率≥45％，优选为≥50％。7.根据权利要求1
‑
6任一项所述的灭菌方法，所述氨基酸发酵液为缬氨酸发酵液。8.根据权利要求1

【专利技术属性】
技术研发人员：余军，刘树蓬，刘磊，张大伟，马祥亮，
申请(专利权)人：巴彦淖尔华恒生物科技有限公司合肥华恒生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：